一种治疗卵巢癌的二萜化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从香椿的干燥叶中分离得到的一种具有治疗 卵巢癌作用的二萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 香棒toonasinensis(a. juss · )roemor又名春芽树、棒、棒树，在《植物名实图考》中 称为红椿，为楝科(mel iaceae)香椿属(toona)落叶乔木，是我国特有的珍贵速生药材书中， 素有"中国桃花心木"之称，主要分布于我国的山东、安徽、河南、河北等省份，其中又以安徽 太和、河南焦作和山东西牟出产的香椿产品最为出名。
[0003] 香椿全株具有特殊气味，并因富含多种生物活性物质而具有很高的药用价值，其 叶、树皮和果实均可入药，应用历史十分悠久，始载于《唐本草》。香椿叶味苦、性温，具有清 热收敛、消炎解毒、去燥湿等功效，主治肠炎、痢疾等疾病;此外，香椿叶富含维生素 c、氨基 酸、优质蛋白质和磷、铁等微量元素，是我国著名的传统时令蔬菜，已有两千多年的食用历 史，曾与荔枝一同作为贡品进献宫廷御用，是蔬菜中不可多得的珍品，深受广大消费者的青 睐，在国外被称为"绿色保健菜"，现多出口至日本及东南亚国家。香椿皮味苦涩、性凉，具有 除热、燥湿、润肠止血、杀虫的功效，临床常用于治疗痢疾、肠炎、泌尿道感染、便血、白带、风 湿腰腿痛等。香椿子味辛苦、性温，具祛风、散寒、止痛之功效，临床用于治疗风寒外感、心胃 气痛、风湿关节痛、疝气及冷骨风等。
[0004] 目前，香椿中分离鉴定出的化合物主要可分为黄酮类、酚类及其衍生物、萜类(三 萜、倍半萜、二萜）、苯丙素类、含硫化合物等。现代研究表明，香椿中的化学成分有抗肿瘤、 抗氧化、降血脂等多种生物活性；国内外学者对香椿中的化学成分开展了一些较为深入的 研究，发现其所含化合物的种类丰富，是值得进一步研究、开发前景良好的一种药食同源植 物资源。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从香椿的干燥叶中分离得到的一种具有治疗卵巢癌作 用的二萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(i)，
[0008]
[0009]所述的化合物（i)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将香椿的干燥叶粉碎，用80 ~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体 积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸 膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80 :1、55:1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和 10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(i)。
[0010]进一步地，所述大孔树脂为ab-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85%。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（i)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(i)在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（i)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(i)结构式；
[0019 ]图2为化合物（i)理论ecd值与实验ecd值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(i)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)将香椿的干燥叶（8kg)粉碎，用85 %乙醇热回流提取(25l x 3次），合 并提取液，浓缩至无醇味(3l)，依次用石油醚(3lx3次）、乙酸乙酯(3lx3次)和水饱和的正 丁醇(3lx3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(355g)和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用ab-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用 75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏（136g); (c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积）、55:1 (8个柱体积）、30:1 (6个柱体积）、15:1 (8个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(31g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为 20:1(8个柱体积）、15:1(10个柱体积)和10:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3 个组分；（e)步骤(d)中组分2(llg)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度 为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合 物（i)(228mg)。
[0024] 结构确证:无色粉末；hr-esms显示[m na] 为m/z 335 · 1604，结合核磁特征可得 分子式为〇2〇1124〇3，不饱和度为9。核磁共振氢谱数据51^。111，〇]\^〇-(16,60〇]\0^):!1-1(6.65， s)，h-5(7.52，s)，h-7(3.89，d，j=12.0)，h-8(0.92，m)，h-8(1.93，m)，h-9(0.49，m)，h-ll (0.68，m)，η-12(1·ll，m)，h-12(1.85，m)，h-13(1.78，m)，h-16(1.89，d，j=1.0)，h-17 (5.44，s)，h-17(5.47，s)，h-18(1.01，s)，h-19(0.86，s)，h-20(1.26，d，j = 6.9);核磁共振 碳谱数据 sc(ppm，dms0-d6，150mhz):146.2(chd-c)，148.7(c，2-c)，193.6(c，3-c)，130.1 (c，4-c)，147.3(ch，5-c)，143.9(c，6-c)，76.5(ch，7-c)，22.4(ch 2,8-c)，25.3(ch，9-c)， 16.1(c，10-c)，19.8(ch，11-c)，27.1(ch2，12-c)，36.3(ch，13-c)，91.8(c，14-c)，67.5(c， 15-c)，11.1(ch3，16-c)，114.8(ch2，17-c)，27.6(ch3，18-c)，15.1(ch3，19-c)，11.2(ch 3,20-(：);碳原子标记参见图1。111匪1?谱显示两个双峰甲基信号[6!11.26((1，1 = 6.9他，!1-20)和 1.89((1，1=1.0抱，!1-16)]，两个单峰甲基信号[5!10.86(8，!1-19)，1.01(8，!1-18)]，一个烯属 亚甲基质子信号[sh5.44(s，h-17)和5.47(8，!1-17)]，两个烯属次甲基质子信号[6!16.65(8， !1-1)和7.52(8，!1-5)]，一个含氧次甲基质子信号[5!13.89((1，1=12.0抱，!1-7)]。 13(：-匪1?谱