一种用于治疗卵巢癌的新的二萜化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从益母草干燥地上部分中分离得到的一种二 萜化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 益母草（16011111'118」3。011；[0118!10111：1：)为唇形科植物益母草，药用部分是干燥或新 鲜地上部分，全国各地均产。益母草是一味古老的中药材，《神农本草经》、《本草纲目》等古 代医药著作均有记载。一年或二年生草本全国大部分地区均有分布，生于山野荒地、田埂、 草地等。在夏季生长茂盛花未全开时采摘，味辛苦、凉，活血、祛淤、调经、消水，治疗妇女月 经不调，胎漏难产，胞衣不下，产后血晕，瘀血腹痛，崩中漏下，尿血、泻血，痈肿疮疡。古时常 用于妇科疾病，故名为益母。
[0003] 益母草的化学成分是益母草中发挥药理作用的主要因素。益母草中主要含有的化 合物有:生物碱类，黄酮类，二萜类，苷类，脂肪酸类，挥发油类，环型多肽等，并含有锌，铜， 锰，铁等多种微量元素。
[0004] 现代医学表明，益母草还有溶栓，抗凝，降脂，降血黏度，降低红细胞聚集，抑制血 小板聚集，改善微循环，抗氧自由基等诸多作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从益母草干燥地上部分中分离得到的一种二萜化合物， 含其的药物组合物及其制备方法和应用。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(i):
[0008]
[0009]所述的化合物（i)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将益母草干燥地上部分粉 碎，用70~80%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱8个柱 体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩得70 %乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70 %乙醇洗脱浓缩 物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到 4个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、5:1和2:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶 分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液 减压浓缩得到纯的化合物(i)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用75%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为ab-8型大孔吸附树脂。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（i)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(i)在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（i)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(i)结构式；
[0019] 图2为化合物（i)计算e⑶和实验e⑶图。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ] 主要材料、试剂来源及仪器类型：
[0022]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限 公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]实施例1:化合物(i)分离制备及结构确证
[0024] (a)将益母草干燥地上部分(8kg)粉碎，用75%乙醇热回流提取(30lx3次），合并 提取液，浓缩至无醇味(6l)，依次用石油醚(6l x 3次）、乙酸乙酯(6l x 3次)和水饱和的正丁 醇(6lx3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(375g)和正丁醇萃取物；（b)步 骤(a)中乙酸乙酯萃取物用ab-8大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇 洗脱8个柱体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物（129g);(c)步骤(b)中 70 %乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1 (8个柱体积）、30 :1 (8个柱体 积）、15:1(8个柱体积)和5:1(10个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1(8个柱体积）、5:1(10个柱 体积）和2:1(8个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 (15g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗 脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(i)(38mg)。
[0025] 结构确证:册431]\^显示[]\1 他] 为111/2 469.1802，结合核磁特征可得分子式为 c24h3q〇8，不饱和度为 10。核磁共振氢谱数据 δη( ppm，dms〇-d6，600mhz ):h-l(5.01，d，j = 4.9)，h-2(4.49，br，d，j=4.9)，h-3(4.05，br，s)，h-5(2.75，s)，h-7(5.77，s)，h-9(2.86， m)，h-ll(1.37，m)，h-12(4.38，dd，j=10.2,4.0)，h-14(2.63，d，j=16.0)，h-14(2.16，d，j = 16.0)，h-15(5.79，dd，j=17.8，11.2)，h-16(5.12，d，j=11.2)，h-16(4.97，d，j=17.8)， h-17( 1.01，s)，h-19( 1.48, s)，h-20( 1.03, s)，2-c0ch3(2.18, s)，12-c0ch3( 1.99, s);核磁共 振碳谱数据3。（口口111，0150-(16，15冊抱）：78.5(〇1，1-〇,72.2(〇1，2-〇,76.4(〇1，3-〇,46.1 (c，4-c)，57.7(ch，5-c)，193.9(c，6-c)，126.0(ch，7-c)，155.1(c，8-c)，45.4(ch，9-c)， 41.5(c，10-c)，11.9(ch2，11-c)，76.6(ch，12-c)，41.1(c，13-c)，43.1(ch2，14-c)，138.8 (ch，15-c)，116.2(ch2，16-c)，20.0(ch 3，17-c)，175.3(c，18-c)，17.2(ch3，19-c)，20.7 (ch 3，20-c)，169 · 1 (c，2-c0ch3)，25 · 7 (ch3，2-c0ch3)，170 · 3 (c，12-c0ch3)，25 · 8 (ch3，12-c0ch3);碳原子标记参见图1。红外光谱表明该化合物含有羟基(3438cht 1)和羰基（1757(31^1) 基团。4和13c nmr谱表明该化合物含有一个酮羰基，一个酯羰基，两个乙酰氧基，单取代和 三取代双键。此外，典型的乙烯基[双二重峰狃5.79( j= 17.8和11.2hz，h-15)，两个双峰δ η5.12( j= 11.2hz，h-16)，4.97( j = 17.8hz，η-16)和δ(：138.8(015)，116.2(c-16)和20.0 (c-l7)]和偕甲基[δηι. 07 (s，me-17)]信号表明该化合物为二萜类化合物。hmbc谱中，c-l3 与 me-17;c-15 与!1-12，!1-168，!12-14和]^-17;(：-17与!1-12，!12-14，!1-15和!12