因子xia抑制剂
1.发明背景
2.因子xia是参与血液凝固调节的血浆丝氨酸蛋白酶。虽然血液凝固是调节生物体的体内稳态的必要且重要的部分，但异常的血液凝固也可能具有有害影响。例如，血栓形成是在血管或心脏腔体内形成或存在血块。这样的血块可以滞留在血管中，从而阻塞循环并诱导心脏病发作或中风。血栓栓塞性障碍是工业化世界中死亡和残疾的最主要原因。
3.血液凝固是控制哺乳动物生存所必需的血流的过程。血管损伤后开始的凝固过程及随后在伤口已愈合后的凝块溶解可以分为四个阶段。第一阶段，血管收缩或血管紧缩，可以造成损伤区域的失血量减少。在下一阶段，凝血酶导致血小板活化，血小板粘附到血管壁损伤部位并形成血小板聚集体。在第三阶段，凝固复合物的形成导致凝血酶的大量形成，所述凝血酶通过两种小肽的裂解将可溶性的纤维蛋白原转化为纤维蛋白。在第四阶段，在伤口愈合以后，通过内源性纤维蛋白溶解系统的关键酶纤溶酶的作用来溶解血栓。
4.两种可替换的途径可以导致纤维蛋白凝块的形成，即内在途径和外在途径。这些途径通过不同的机制启动，但在后期阶段，它们汇聚以产生共同的最终的凝固级联路径。在这个最终的凝固路径中，凝固因子x被活化。活化的因子x负责从血液中循环的无活性前体凝血酶原形成凝血酶。在没有创伤的血管壁异常的底部上形成血栓是内在途径的结果。作为对组织损伤或伤害的应答的纤维蛋白凝块形成是外在途径的结果。两种途径都包含相对大量的蛋白，它们被称为凝固因子。内在途径需要凝固因子v、viii、ix、x、xi和xii以及前激肽释放酶、高分子量激肽原、钙离子和来自血小板的磷脂。因子xia的活化是凝固活化的两条途径之间的中心交叉点。因子xia在血液凝固中具有重要作用。
5.当血液暴露于人工表面(例如，在血液透析期间、“体外循环(on-pump)”心血管外科手术、血管移植物、细菌性脓毒症)、细胞表面上、细胞受体、细胞碎片、dna、rna和细胞外基质时，凝固开始。该过程也被称为接触活化。因子xii的表面吸收导致因子xii分子的构象变化，从而促进对蛋白水解性的活性因子xii分子(因子xiia和因子xiif)的活化。因子xiia(或xiif)具有许多靶蛋白，包括血浆前激肽释放酶和因子xi。活性血浆激肽释放酶进一步活化因子xii，从而导致接触活化的扩大。可替换地，丝氨酸蛋白酶脯氨酰羧基肽酶可以活化在细胞和基质的表面上形成的多蛋白复合物中与高分子量激肽原配合的血浆激肽释放酶(shariat-madar等人，blood，108：192-199(2006))。接触活化是部分地负责调节血栓形成和炎症的表面介导的过程，并且至少部分地由纤维蛋白溶解性途径、补体途径、激肽原/激肽途径和其它体液和细胞途径介导(关于综述，coleman，r.，“contact activationpathway”，hemostasis and thrombosis，第103-122页，lippincott williams和wilkins(2001)；schmaier，a.h.，“contact activation”，thrombosis and hemorrhage，第105-128页(1998))。血栓栓塞性疾病的接触活化系统的生物相关性得到因子xii缺陷小鼠的表型的支持。更具体地，在几种血栓形成模型以及中风模型中因子xii缺陷小鼠免于血栓性血管闭塞，并且xii缺陷小鼠的表型与xi缺陷小鼠相同(renne等人，j exp.med.，202：271-281(2005)；kleinschmitz等人，j exp.med.，203：513-518(2006))。因子xi在因子xiia的下游以及与xii和xi缺陷小鼠的相同表型的事实提示，接触活化系统可在体内xi因子活
化中起主要作用。
6.血浆激肽释放酶是胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的酶原并且存在于血浆中。基因结构与因子xi的基因结构相似。总的来说，血浆激肽释放酶的氨基酸序列与因子xi具有58％的同源性。因子xiia在内部i389-r390键处的蛋白水解活化产生一条重链(371个氨基酸)和一条轻链(248个氨基酸)。血浆激肽释放酶的活性位点被包含在轻链中。血浆激肽释放酶的轻链与蛋白酶抑制剂(包括α2巨球蛋白和c1-抑制剂)反应。令人感兴趣的是，在高分子量激肽原(hmwk)存在下，肝素显著加速抗凝血酶iii对血浆激肽释放酶的抑制。在血液中，大部分血浆激肽释放酶与hmwk形成复合物进行循环。血浆激肽释放酶裂解hmwk以释放缓激肽。缓激肽释放导致血管渗透性和血管舒张的增加(关于综述，coleman，r.，“contact activation pathway”，hemostasis and thrombosis，第103-122页，lippincott williams&wilkins(2001)；schmaier a.h.，“contact activation”，thrombosis and hemorrhage，第105-128页(1998))。
7.表现出在c1-酯酶抑制剂上的遗传缺陷的患者患有遗传性血管性水肿(hae)，这是一种终生性疾病，其导致全身(包括手、脚、面部、喉咙、生殖器和胃肠道)的间歇性肿胀。对急性发作引起的水泡的分析已经证实含有高水平的血浆激肽释放酶，并且用基于蛋白的可逆血浆激肽释放酶抑制剂艾卡拉肽(kalbitor)的治疗已被fda批准用于治疗hae的急性发作(schneider，l等人，j.allergy clin.immunol.，120：第416页(2007))。
8.此外，在诊断出晚期糖尿病性黄斑水肿(dme)的患者中，血浆激肽释放酶-激肽系统是异常丰富的。最近的出版物已经证实，血浆激肽释放酶会促进在糖尿病性啮齿动物模型中观察到的视网膜血管渗漏和功能障碍(a.clermont等人，diabetes，60：1590(2011))，并且用小分子血浆激肽释放酶抑制剂的治疗改善了观察到的视网膜血管渗透性和其它与视网膜血流有关的异常。
9.发明概述
10.本发明涉及式i的化合物：
[0011][0012]
及其药学上可接受的盐。式i的化合物是选择性因子xia抑制剂或者因子xia和血浆激肽释放酶的双重抑制剂，并因此可用于治疗、抑制或改善可受益于因子xia或血浆激肽释放酶的抑制的一种或多种疾病状态，包括血栓形成、栓塞、高凝状态或纤维化改变。本发明的化合物还可与其它治疗有效的药剂组合使用，包括、但不限于可用于治疗血栓形成、栓塞、高凝状态或纤维化改变的其它药物。此外，本发明涉及用于制备式i的化合物的方法，以及包含式i的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物。
[0013]
发明详述
[0014]
本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐：
[0015][0016]
其中
[0017]
r1是氢、ochf2或任选地被cf3取代的吡唑；
[0018]
r2是氯或氟；
[0019]
r3是氢或氟；
[0020]
r4是氢或c
1-3
烷基；
[0021]
x是ch或n。
[0022]
本发明的另一个实施方案涉及式ia的化合物或其药学上可接受的盐：
[0023][0024]
其中
[0025]
r2是氯或氟；
[0026]
r4是氢、ch3或ch2ch3。
[0027]
本发明的一个实施方案涉及式ib的化合物或其药学上可接受的盐：
[0028][0029]
其中
[0030]
r2是氯或氟；
[0031]
r4是氢、ch3或ch2ch3；
[0032]
x是ch或n。
[0033]
本发明的另一个实施方案涉及式ic的化合物或其药学上可接受的盐：
[0034][0035]
其中
[0036]
r2是氯或氟；
[0037]
r4是ch3或ch2ch3。
[0038]
在本发明的一个实施方案中，r1是氢。在本发明的另一个实施方案中，r1是ochf2。在本发明的另一个实施方案中，r1是任选地被cf3取代的吡唑。在所述实施方案的一类中，r1是被cf3取代的吡唑。
[0039]
在本发明的一个实施方案中，r2是氯。在本发明的另一个实施方案中，r2是氟。
[0040]
在本发明的一个实施方案中，r3是氢。在本发明的另一个实施方案中，r3是氟。
[0041]
在本发明的一个实施方案中，r4是ch3。在本发明的另一个实施方案中，r4是ch2ch3。在本发明的另一个实施方案中，r4是氢。
[0042]
在本发明的一个实施方案中，x是ch。在本发明的另一个实施方案中，x是n。
[0043]
在本发明的一个实施方案中，式i的化合物是：
[0044]
[0045][0045]
或其药学上可接受的盐。
[0046]
对上述优选类和亚类的提及意在包括特定和优选组的所有组合，除非另外说明。
[0047]
本发明的具体实施方案包括、但不限于在本文中鉴定为实施例1至9的化合物或其药学上可接受的盐。
[0048]
在本发明范围内还包括药物组合物，其包含如上所述的式i、式ia、式ib或式ic的化合物和药学上可接受的载体。本发明还考虑涵盖药物组合物，其包含药学上可接受的载体和在本技术中具体公开的任何化合物。本发明的这些和其它方面将从本文包含的教导显而易见。
[0049]
本发明还包括用于在哺乳动物中抑制血小板损失、抑制血小板聚集体的形成、抑制纤维蛋白形成、抑制血栓形成、抑制栓塞物形成、治疗炎症性障碍、治疗糖尿病性视网膜病变和治疗遗传性血管性水肿的组合物，其包含在药学上可接受的载体中的本发明的化合物。这些组合物可以任选地包括抗凝血剂、抗血小板剂和溶栓剂。可以将所述组合物添加到
血液、血液制品或哺乳动物器官中以实现期望的抑制。
[0050]
本发明还包括用于在哺乳动物中预防或治疗不稳定型心绞痛、顽固性心绞痛、心肌梗塞、短暂缺血发作、心房颤动、血栓性中风、栓塞性中风、深静脉血栓形成、弥散性血管内凝血、眼部纤维蛋白积聚以及再通血管的再阻塞或再狭窄的组合物，其包含在药学上可接受的载体中的本发明的化合物。这些组合物可以任选地包括抗凝血剂、抗血小板剂和溶栓剂。
[0051]
本发明还包括用于治疗不稳定型心绞痛、顽固性心绞痛、心肌梗塞、短暂缺血发作、心房颤动、血栓性中风、栓塞性中风、深静脉血栓形成、弥散性血管内凝血、眼部纤维蛋白积聚以及再通血管的再阻塞或再狭窄的方法，所述方法包括将本发明的化合物的组合物施用给有此需要的哺乳动物。
[0052]
本发明还包括通过将本发明的化合物共价地或非共价地附着至表面来降低哺乳动物中表面致血栓性的方法。
[0053]
本发明还包括用于制备药物的本发明的化合物或其药学上可接受的盐，所述药物用于在哺乳动物中抑制凝血酶、抑制血栓形成、治疗血栓形成或预防血栓形成。另外，本发明包括用于治疗的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0054]
本发明的化合物是因子xia抑制剂并且可以具有治疗价值，例如在预防冠状动脉疾病中。与本领域已知的化合物相比，本发明的化合物具有改善的药代动力学特性。此外，与已知化合物相比，本发明的一些化合物具有效力、功效和药代动力学性质的更好组合。
[0055]
应当理解，本文中使用的本发明的化合物包括结构式i、式ia、式ib和式ic的化合物的药学上可接受的盐，以及当用作游离化合物或它们的药学上可接受的盐的前体或用于其它合成操作中时的非药学上可接受的盐。
[0056]
本发明的化合物可以以药学上可接受的盐的形式施用。术语“药学上可接受的盐”是指从药学上可接受的无毒碱或酸(包括无机或有机碱和无机或有机酸)制备的盐。被包括在术语“药学上可接受的盐”中的碱性化合物的盐是指本发明的化合物的无毒盐，其通常通过使游离碱与合适的有机酸或无机酸反应来制备。本发明的碱性化合物的代表性盐包括、但不限于以下的盐：乙酸盐、抗坏血酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐(aspirate)、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、右旋樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二乙基乙酸盐、二葡萄糖酸盐、二盐酸盐、十二烷基磺酸盐(dodecylsulfanate)、依地酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐(esylate)、乙磺酸盐(ethanesulfonate)、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡萄糖庚酸盐(glucoheptanoate)、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、羟乙酰氨基苯胂酸盐(glycollylarsanilate)、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、2-羟基乙磺酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、异烟酸盐、异硫代硫酸盐(isothionate)、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、甲磺酸盐、粘酸盐、2-萘磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、n-甲基葡糖胺铵盐、油酸盐、草酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、棕榈酸盐、泛酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、庚二酸盐、苯基丙酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、碱式醋酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘化物、三氟乙酸盐、十一酸盐
(undeconate)、戊酸盐等。此外，在本发明的化合物携带酸性部分的情况下，其合适的药学上可接受的盐包括、但不限于源自无机碱的盐，包括铝、铵、钙、铜、三价铁、二价铁、锂、镁、三价锰、二价锰、钾、钠、锌等。还包括铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。源自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，环胺，二环己胺和碱性离子交换树脂，诸如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、n，n-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙胺、乙二胺、n-乙基吗啉、n-乙基哌啶、葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。此外，所包括的碱性含氮基团可以被诸如以下试剂季铵化：低级烷基卤化物，诸如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯，长链卤化物，诸如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物如苄基和苯乙基的溴化物等。
[0057]
这些盐可以通过已知的方法获得，例如通过将本发明的化合物与等量和含有所需酸、碱等的溶液混合，然后通过过滤盐或蒸馏出溶剂来收集所需盐。本发明的化合物及其盐可以与溶剂(诸如水、乙醇或甘油)形成溶剂化物。根据侧链取代基的类型，本发明的化合物可以同时形成酸加成盐和与碱的盐。
[0058]
如果式i、式ia、式ib或式ic的化合物在分子中同时含有酸性和碱性基团，除了提到的盐形式外，本发明还包括内盐或内铵盐(betaines)(两性离子)。
[0059]
本发明包括式i、式ia、式ib和式ic的化合物的所有立体异构形式。除非指明具体的立体化学，否则本发明意在包括这些化合物的所有这样的异构形式。存在于式i、式ia、式ib和式ic的化合物中的不对称中心可以都彼此独立地具有(r)构型或(s)构型。当与手性碳的键在本发明的结构式中被描绘为直线时，应当理解，手性碳的(r)和(s)构型和因此各单个对映异构体及其混合物被包括在该式内。当描绘特定构型时，意指该对映异构体((r)或(s)，位于该中心)。类似地，当在没有指定手性碳的手性的情况下描述化合物名称时，应当理解，手性碳的(r)和(s)构型以及因此单个对映异构体及其混合物都被包含在该名称中。具体立体异构体或其混合物的产生可以在得到这类立体异构体或混合物的实例中鉴别，但是这决不限制所有立体异构体及其混合物被包括在本发明范围内。
[0060]
除非指明具体对映异构体或非对映异构体，否则本发明包括所有可能的对映异构体和非对映异构体以及两种或更多种立体异构体以所有比率的混合物，例如对映异构体和/或非对映异构体的混合物。因而，以下形式的对映异构体是本发明的主题：对映异构纯的形式，作为左旋和右旋对映体，外消旋体的形式，和两种对映异构体以所有比率的混合物的形式。在顺/反异构现象的情况下，本发明包括顺式形式和反式形式以及这些形式的所有比率的混合物。如果需要的话，通过用常规方法(例如色谱法或结晶)分离混合物，通过使用立体化学一致的合成起始材料，或通过立体选择性的合成，可以进行单个立体异构体的制备。任选地，可以在分离立体异构体之前进行衍生化。立体异构体混合物的分离可以在式i、式ia、式ib或式ic的化合物的合成期间的中间步骤进行，或者可以在最终的外消旋产物上进行。绝对立体化学可以通过结晶产物或结晶中间体的x-射线晶体学来确定，如果必要的话，所述结晶产物或结晶中间体用含有已知构型的立体中心的试剂衍生化。在本发明的化合物能够互变异构化的情况下，所有单个互变异构体及其混合物都被包括在本发明的范围内。本发明包括所有这样的异构体、以及这样的外消旋体、对映异构体、非对映异构体和互
变异构体的盐、溶剂化物(包括水合物)和溶剂化盐及其混合物。
[0061]
在本发明的化合物中，原子可以表现出它们的天然同位素丰度，或者原子中的一个或多个可以被人工地富集特定同位素，所述同位素具有相同原子序数，但是其原子质量或质量数不同于在自然界中占优势地存在的原子质量或质量数。本发明意在包括具体地和一般地描述的化合物的所有合适的同位素变体。例如，氢(h)的不同同位素形式包括氕(1h)和氘(2h)。氕是在自然界中发现的占优势的氢同位素。氘富集可以提供某些治疗优点，诸如增加体内半衰期或减小剂量需求，或者可以提供可用作生物样品表征的标准品的化合物。通过本领域技术人员众所周知的常规技术，或通过类似于本文一般方法方案和实施例中描述的那些的方法，使用适当的同位素富集的试剂和/或中间体，无需过度实验就可以制备同位素富集的化合物。
[0062]
当任何变量在任何组分中出现超过一次时，它在每次出现时的定义独立于其它每次出现。并且，只有当取代基和变量的组合产生稳定的化合物时，才允许这样的组合。从取代基绘制到环系统中的线代表所示的键可以连接至任何可取代的环原子。如果环系统是二环，则意指该键连接至二环部分的任一个环上的任何合适原子。
[0063]
应当理解，本领域普通技术人员可以将一个或多个硅(si)原子掺入本发明的化合物中以替代一个或多个碳原子，以提供化学上稳定的且可以通过本领域已知的技术从容易得到的起始材料容易地合成的化合物。在对比类似的c元素和si元素键时，碳和硅的共价半径不同，这导致键长和空间排列的差异。与碳相比，这些差异导致含硅化合物的尺寸和形状的细微变化。本领域普通技术人员会理解，尺寸和形状差异可以导致效力、溶解度、脱靶活性的缺乏、包装性能等方面的细微或显著变化。(diass，j.o.等人，organometallics(2006)5：1188-1198；showell，g.a.等人，bioorganic&medicinal chemistry letters(2006)16：2555-2558)。
[0064]
应当理解，本领域普通技术人员可以选择本发明的化合物的取代基和取代型式，以提供化学上稳定的且可以通过本领域已知的技术以及下面阐述的那些方法从容易得到的起始材料容易地合成的化合物。如果取代基本身被超过一个基团取代，应当理解，这多个基团可以在同一个碳上或在不同碳上，只要产生稳定的结构即可。短语“任选地(被一个或多个取代基)取代”应当理解为意指，所讨论的基团未被取代或可以被一个或多个取代基取代。
[0065]
此外，本发明的化合物可以以无定形形式和/或一种或多种结晶形式存在，且因此式i、式ia、式ib和式ic的化合物的所有无定形和结晶形式及其混合物意图被包括在本发明范围内。此外，本发明的一些化合物可以与水(即，水合物)或普通有机溶剂形成溶剂化物。本发明的化合物的这样的溶剂化物和水合物(特别是药学上可接受的溶剂化物和水合物)，以及非溶剂化形式和无水形式，同样被包括在本发明的范围内。
[0066]
并且，在羧酸(-cooh)或醇基存在于本发明的化合物中的情况下，可以采用羧酸衍生物的药学上可接受的酯，诸如甲酯、乙酯或新戊酰氧基甲酯，或醇的酰基衍生物，诸如o-乙酰基、o-新戊酰基、o-苯甲酰基和o-氨酰基。包括本领域已知的用于改变用作持续释放或前药制剂的溶解度或水解特征的那些酯和酰基。
[0067]
本发明的化合物的任何药学上可接受的前药修饰(其导致在体内转化为在本发明范围内的化合物)也在本发明的范围内。例如，通过可利用的羧酸基团的酯化或通过在化合
物中可利用的羟基上形成酯，可以任选地制备酯。类似地，可以制备不稳定的酰胺。可以制备本发明的化合物的药学上可接受的酯或酰胺以作为前药，其可以水解回酸(或-coo-，取决于发生转化的液体或组织的ph)或羟基形式，特别是在体内，并因此被包括在本发明的范围内。药学上可接受的前药修饰的例子包括、但不限于-c
1-6
烷基酯和被苯基酯取代的-c
1-6
烷基。
[0068]
因此，本文描述和要求保护的通用结构式、实施方案和具体化合物中的化合物包括其盐、所有可能的立体异构体和互变异构体、物理形式(例如，无定形和结晶形式)、溶剂化物和水合物形式以及这些形式的任何组合，及其盐、其前药形式及其前药形式的盐，只要这样的形式是可能的，除非另有说明。
[0069]
除非指出，否则术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴或碘。
[0070]
(fluka)硅藻土是硅藻土，且可以被称作“celite”。
[0071]
除非在本文中指出，否则二环环系统包括稠合环系统，其中两个环共享两个原子；和螺环系统，其中两个环共享一个原子。
[0072]
本发明还涉及药物，其含有至少一种式i、式ia、式ib或式ic的化合物和/或式i、式ia、式ib或式ic的化合物的药学上可接受的盐和/或任选的式i、式ia、式ib或式ic的化合物的立体异构形式或式i、式ia、式ib或式ic的化合物的立体异构形式的药学上可接受的盐，以及药学上合适的和药学上可接受的媒介物、添加剂和/或其它活性物质和助剂。
[0073]
抗凝血疗法适用于治疗和预防多种血栓性病症，特别是冠状动脉和脑血管疾病。在该领域中有经验的人容易知道需要抗凝血疗法的情况。本文所用的术语“患者”用于指示哺乳动物诸如灵长类动物、人类、绵羊、马、牛、猪、狗、猫、大鼠和小鼠。
[0074]
所述化合物可以是选择性因子xia抑制剂或者因子xia和血浆激肽释放酶的双重抑制剂。因子xia或双重因子xia/血浆激肽释放酶抑制不仅可用于具有血栓性病症的个体的抗凝血疗法，而且每当需要抑制血液凝固时也是有用的，诸如以防止储存的全血凝固和防止用于试验或储存的其它生物样品中的凝固。因此，可以将因子xia或双重因子xia/血浆激肽释放酶抑制剂加入到含有或疑似含有凝血酶并且其中希望抑制血液凝固(例如，当使哺乳动物的血液与选自血管移植物、支架、矫形假体、心脏假体和体外循环系统的材料接触时)的任何介质中或与其接触。
[0075]
本发明的化合物可用于治疗或预防哺乳动物中的静脉血栓栓塞(例如，由脱离的血栓引起的静脉阻塞或闭塞；由脱离的血栓引起的肺动脉阻塞或闭塞)、心源性血栓栓塞(例如，由脱离的血栓引起的心脏阻塞或闭塞)、动脉血栓形成(例如，在动脉内形成血栓，其可能造成由动脉供应的组织的梗塞)、动脉粥样硬化(例如，以不规则地分布的脂质沉积物为特征的动脉硬化)，以及用于降低与血液接触的装置使血液凝固的倾向。
[0076]
可以用本发明的化合物治疗或预防的静脉血栓栓塞的例子包括静脉阻塞、肺动脉阻塞(肺栓塞)、深静脉血栓形成、与癌症和癌症化疗相关的血栓形成、与血栓形成性疾病(诸如蛋白c缺乏、蛋白s缺乏、抗凝血酶iii缺乏和因子v leiden)一起遗传的血栓形成、以及由获得性血栓形成性障碍诸如系统性红斑狼疮(炎症性结缔组织病)引起的血栓形成。同样关于静脉血栓栓塞，本发明的化合物可用于维持留置导管的通畅。
[0077]
可以用本发明的化合物治疗或预防的心源性血栓栓塞的例子包括血栓栓塞性中风(脱离的血栓造成与脑血液供应受损有关的神经性痛苦)、与心房颤动相关的心源性血栓
栓塞(上心室肌原纤维的快速、不规律颤搐)、与假体心脏瓣膜诸如机械心脏瓣膜相关的心源性血栓栓塞、以及与心脏病相关的心源性血栓栓塞。
[0078]
动脉血栓形成的例子包括不稳定型心绞痛(冠状动脉起源的胸部严重收缩性疼痛)、心肌梗塞(由供血不足引起的心肌细胞死亡)、缺血性心脏病(由于供血阻塞(例如通过动脉狭窄)引起的局部贫血)、在经皮冠状动脉腔内血管成形术期间或之后的再阻塞、经皮冠状动脉腔内血管成形术之后的再狭窄、冠状动脉旁路移植物的阻塞和闭塞性脑血管疾病。同样关于动脉血栓形成，本发明的化合物可用于维持动静脉插管的通畅。
[0079]
动脉粥样硬化的例子包括动脉硬化。
[0080]
本发明的化合物还可以是激肽释放酶抑制剂，并且特别可用于治疗遗传性血管性水肿。
[0081]
与血液接触的装置的例子包括血管移植物、支架、矫形假体、心脏假体和体外循环系统。
[0082]
通过口服、吸入、直肠或透皮施用或通过皮下、关节内、腹膜内或静脉内注射，可以施用根据本发明的药物。口服施用是优选的。可以用式i、ia、ib和ic的化合物涂覆支架和与体内血液接触的其它表面。
[0083]
本发明还涉及用于制备药物的方法，其包括使用药学上合适的和药学上可接受的载体以及任选的其它合适的活性物质、添加剂或助剂将至少一种式i、ia、ib和ic的化合物制成合适的施用形式。
[0084]
合适的固体或盖仑制剂形式是例如颗粒剂、粉剂、包衣片剂、片剂、(微)胶囊剂、栓剂、糖浆剂、液汁(juice)、混悬液、乳剂、滴剂或可注射溶液以及具有活性物质的延长释放的制剂，在其制备中使用常规赋形剂诸如媒介物、崩解剂、粘合剂、包衣剂、膨胀剂、助流剂或润滑剂、调味剂、甜味剂和增溶剂。可以提及的经常使用的助剂是碳酸镁、二氧化钛、乳糖、甘露醇和其它糖、滑石、乳糖、明胶、淀粉、纤维素及其衍生物、动物油和植物油诸如鳕鱼肝油、向日葵油、花生油或芝麻油、聚乙二醇和溶剂，诸如无菌水和一元醇或多元醇诸如甘油。
[0085]
根据多种因素来选择利用因子xia抑制剂或双重因子xia/血浆激肽释放酶抑制剂的给药方案，所述因素包括患者的类型、种族、年龄、重量、性别和医疗状况；要治疗的病症的严重程度；施用途径；患者的肾和肝功能；和所采用的特定化合物或其盐。普通技术医师或兽医可以容易地确定和开出预防、对抗或阻止病症进展所需的药物的有效量。
[0086]
式i、式ia、式ib和式ic的化合物可以作为单一疗法施用和与其它治疗剂组合施用，所述其它治疗剂包括抗血栓形成剂(抗凝血剂和血小板聚集抑制剂)、溶栓剂(纤溶酶原激活物)、其它促纤溶活性物质、降血压剂、血糖调节剂、降脂剂和抗心律不齐剂。
[0087]
所述因子xia抑制剂或双重因子xia/血浆激肽释放酶抑制剂还可以与合适的抗凝血剂共同施用以在各种血管病变的治疗中实现协同效应，所述抗凝血剂包括、但不限于其它因子xia抑制剂、凝血酶抑制剂、凝血酶受体拮抗剂、因子viia抑制剂、因子xa抑制剂、因子ixa抑制剂、因子xiia抑制剂、腺苷二磷酸抗血小板剂(例如，p2y12拮抗剂)、纤维蛋白原受体拮抗剂(例如以治疗或预防不稳定型心绞痛或预防血管成形术以后的再阻塞和再狭窄)、其它抗凝血剂诸如阿司匹林和溶栓剂诸如纤溶酶原激活物或链激酶。这样的抗凝血剂包括例如阿哌沙班、达比加群、坎格雷洛、替格瑞洛、沃拉帕沙、氯吡格雷、依度沙班、米泊美
生、普拉格雷、利伐沙班和塞莫肝素。例如，患有冠状动脉疾病的患者和接受血管成形术手术的患者将受益于纤维蛋白原受体拮抗剂和凝血酶抑制剂的共同施用。可以在血栓形成后首先施用因子xia抑制剂，并在此后施用组织型纤溶酶原激活物或其它纤溶酶原激活物。
[0088]
可替换地或另外地，一种或多种另外的药理学活性剂可以与本发明的化合物组合施用。所述另外的活性剂(或多种活性剂)意指在体内具有活性的药物活性剂(或多种活性剂)，包括在施用后转化为药学活性形式的前药，其不同于本发明的化合物，并且当这样的形式在商业上销售或在其它方面化学上可能时，还包括所述另外的活性剂的游离酸、游离碱和药学上可接受的盐。通常，任何合适的一种或多种另外的活性剂(包括、但不限于抗高血压剂、另外的利尿剂、抗动脉粥样硬化剂诸如调节脂质的化合物、抗糖尿病剂和/或抗肥胖剂)可以在单一剂量制剂中与本发明的化合物一起以任何组合使用(固定剂量药物组合)，或者可以在一种或多种单独的剂量制剂中施用给患者，这允许同时或依次施用活性剂(单独的活性剂的共同施用)。可以使用的另外的活性剂的例子包括、但不限于血管紧张素转换酶抑制剂(例如，阿拉普利、贝那普利、卡托普利、西罗普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫维普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利或群多普利)；血管紧张素ii受体拮抗剂，也被称作血管紧张素受体阻滞剂或arb，其可以呈游离碱、游离酸、盐或前药形式，诸如阿齐沙坦，例如，美阿沙坦钾坎地沙坦，例如，坎地沙坦酯依普罗沙坦，例如，甲磺酸依普罗沙坦厄贝沙坦氯沙坦，例如，氯沙坦钾奥美沙坦，例如，奥美沙坦酯替米沙坦缬沙坦和与噻嗪样利尿剂诸如氢氯噻嗪(例如，diovanatacand)等)组合使用的这些药物中的任一种；保钾利尿剂诸如盐酸阿米洛利、螺内酯、依普利酮、氨苯蝶啶，每种与或不与hctz一起；中性内肽酶抑制剂(例如，塞奥芬(thiorphan)和膦酰二肽)；醛固酮拮抗剂；醛固酮合酶抑制剂；肾素抑制剂；enalkrein；ro 42-5892；a 65317；cp 80794；es1005；es 8891；sq 34017；阿利吉仑(2(s)，4(s)，5(s)，7(s)-n-(2-氨基甲酰基-2-甲基丙基)-5-氨基-4-羟基-2，7-二异丙基-8-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)-苯基]-辛酰胺半富马酸盐)spp600，spp630和spp635)；内皮素受体拮抗剂；血管扩张剂(例如硝普盐)；钙通道阻滞剂(例如，氨氯地平、硝苯地平、维拉帕米、地尔硫卓、非洛地平、戈洛帕米、尼鲁地平、尼莫地平、尼卡地平)；钾通道活化剂(例如，尼可地尔、吡那地尔、色满卡林、米诺地尔、阿普卡林、氯普唑仑)；交感神经阻滞药；β-肾上腺素能阻断药(例如，醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、比索洛尔、卡维地洛、美托洛尔、酒石酸美托洛尔、纳多洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、噻吗洛尔)；α肾上腺素能阻断药(例如，多沙唑嗪、哌唑嗪或α甲基多巴)；中枢α肾上腺素能激动剂；周围血管扩张剂(例如肼屈嗪)；降脂剂，例如，hmg-coa还原酶抑制剂诸如辛伐他汀和洛伐他汀(它们以内酯前药形式作为和销售并在施用后作为抑制剂起作用)，和二羟基开环酸hmg-coa还原酶抑制剂的药学上可接受的盐诸如阿托伐他汀(特别是以销售的钙盐)、瑞舒伐他汀(特别是以销售的钙盐)、普伐他汀(特别是以
销售的钠盐)和氟伐他汀(特别是以销售的钠盐)；胆固醇吸收抑制剂诸如依折麦布和与任何其它降脂剂诸如上面指出的hmg-coa还原酶抑制剂和特别是与辛伐他汀或与阿托伐他汀钙组合的依折麦布；立即释放或控释形式的烟酸，和特别是与dp拮抗剂诸如拉罗匹仑和/或与hmg-coa还原酶抑制剂组合的烟酸；烟酸受体激动剂诸如阿昔莫司和阿昔呋喃，以及烟酸受体部分激动剂；代谢改变剂，包括胰岛素敏化剂和用于治疗糖尿病的有关化合物诸如双胍类(例如，二甲双胍)、氯茴苯酸类(例如，瑞格列奈、那格列奈)、磺酰脲类(例如，氯磺丙脲、格列美脲、格列吡嗪、格列本脲、妥拉磺脲、甲苯磺丁脲)、也被称作格列酮类的噻唑烷二酮类(例如，吡格列酮、罗格列酮)、α葡萄糖苷酶抑制剂(例如，阿卡波糖、米格列醇)、二肽基肽酶抑制剂、(例如，西格列汀阿格列汀、维格列汀、沙格列汀、利拉利汀、度格列汀、吉格列汀)、麦角生物碱(例如，溴隐亭)、组合药物诸如(西格列汀和二甲双胍)和可注射的糖尿病药物诸如艾塞那肽和乙酸普兰林肽；葡萄糖摄取抑制剂，诸如钠-葡萄糖转运蛋白(sglt)抑制剂和它的各种异形体，诸如sglt-1、sglt-2(例如，asp-1941、ts-071、bi-10773、托格列净、lx-4211、卡格列净、达格列净、埃格列净、依格列净、瑞格列净和索格列净)和sglt-3；或与对于预防或治疗上述疾病有益的其它药物，包括、但不限于二氮嗪；且包括游离酸、游离碱和药学上可接受的盐形式、前药形式，例如，在化学上可能的情况下，以上药剂的前药的酯和盐。提供上述药物的商标名称来举例说明活性剂的销售形式；这样的药物可以以单独的剂型使用以与本发明的化合物同时或依次施用，或者其中的一种或多种活性剂可以用于包括本发明的化合物的固定剂量药物组合。
[0089]
与其它合适的抗血小板剂、抗凝剂或溶栓剂组合的本发明的因子xia抑制剂或因子xia/血浆激肽释放酶抑制剂的典型剂量可以与没有共同施用另外的抗血小板剂、抗凝剂或溶栓剂而施用的因子xia抑制剂的那些剂量相同，或者可以显著低于没有共同施用另外的抗血小板剂、抗凝剂或溶栓剂而施用的凝血酶抑制剂的那些剂量，取决于患者的治疗需要。
[0090]
将化合物以治疗有效量施用给哺乳动物。“治疗有效量”是指这样的本发明的化合物的量：其当单独地或与另外的治疗剂组合施用给哺乳动物时，有效治疗(即，预防、抑制或改善)血栓栓塞性和/或炎性疾病状况或治疗宿主中疾病的进展。
[0091]
本发明的化合物优选地以治疗有效量单独施用给哺乳动物。但是，本发明的化合物也可以如下所述以治疗有效量与另外的治疗剂组合施用给哺乳动物。当组合施用时，化合物的组合优选地、但不一定是协同组合。当组合施用时化合物的作用(在本技术中，对期望靶标的抑制)大于当作为单一药剂分别施用时每种化合物的累加作用时，则发生协同作用，例如如chou和talalay，adv.enzyme regul.1984，22，27-55所描述。一般而言，在化合物的次优浓度下最清楚地证明协同作用。与单个组分相比，协同作用可以是降低的细胞毒性、增加的抗凝血作用或所述组合的一些其它有益作用。
[0092]“组合施用”或“组合疗法”是指，将本发明的化合物和一种或多种另外的治疗剂并行地施用给受治疗的哺乳动物。当组合施用时，每种组分可以同时施用或在不同时间点以任何顺序依次施用。因此，每种组分可以单独施用，但在时间上足够接近，从而提供期望的
治疗效果。
[0093]
本发明在范围上不受限于实施例中公开的具体实施方案，所述实施方案旨在举例说明本发明的几个方面，并且在功能上等同的任何实施方案均在本发明的范围内。实际上，除了本文所示和描述的那些之外，本发明的各种修改对于相关领域的技术人员来说将变得显而易见，并且意图落入所附权利要求的范围内。
[0094]
一般方法
[0095]
在下述方案和实施例中举例说明了用于制备本发明的化合物的几种方法。起始材料和必需的中间体在某些情况下是商购可得的，或者可以根据文献程序或如本文所说明的那样制备。除了在文献中已知的或在实验程序中举例说明的其它标准操作之外，还可以通过采用如在下述方案中所示的反应来制备本发明的化合物。在方案中显示的取代基编号不一定与在权利要求中使用的编号相关，并且经常为了清楚起见，如果在上文定义下允许多个取代基，将单个取代基显示为连接至化合物。除了如文献中已知的或在实验程序中举例说明的其它标准操作诸如酯水解、保护基团的裂解等以外，通过采用如本文的方案和实施例中所示的反应来进行用于生成本发明的化合物的反应。根据本领域已知的程序或如本文所说明的那样制备起始材料。
[0096]
可以以多种方式制备本发明的化合物。在某些情况下，可以进一步修饰终产物，例如，通过取代基的操作。这些操作可以包括、但不限于本领域技术人员公知的还原、氧化、烷基化、酰化和水解反应。在某些情况下，可以改变进行前述反应方案的顺序以促进反应或避免不希望的反应产物。因为方案是示例性的，所以本发明不应解释为受所表达的化学反应和条件限制。本文所用的各种起始材料的制备完全在本领域技术人员的技能范围内。提供以下实施例以便可能更充分地理解本发明。这些实施例仅仅是示例性的，且不应解释为以任何方式限制本发明。未确定在实施例和中间体中的单独立体异构体的绝对立体化学，除非在实施例中另外说明或在命名法中明确说明。
[0097]
使用缩写并定义如下：
[0098]
s-( )-dtbm-是(s)-( )-5，5
′‑
双[二(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基]-4，4
′‑
二-1，3-苯并二氧杂环戊烯；xphos-g2是氯(2-二环己基膦基-2
′
，4
′
，6
′‑
三异丙基-1，1
′‑
联苯)[2-(2
′‑
氨基-1，1
′‑
联苯)]钯(ii)；apdg2是氯[(二(1-金刚烷基)-n-丁基膦)-2-(2-氨基联苯)]钯(ii)；其可得自sigmaaldrich。
[0099]
ac乙酰基
[0100]
ar芳基
[0101]
aq水性的
[0102]
bn苄基
[0103]
boc叔丁基氧基羰基
[0104]
t-bu叔丁基
[0105]
18-冠-61，4，7，10，13，16-六氧杂环十八烷
[0106]
dast二乙基氨基三氟化硫
[0107]
dce二氯乙烷
[0108]
dcm氯甲烷
[0109]
dea二乙胺
[0110]
diad偶氮二甲酸二乙酯
[0111]
diea或dipean，n-二异丙基乙胺
[0112]
dma二甲基乙酰胺
[0113]
dme1，2-二甲氧基乙烷
[0114]
dmf二甲基甲酰胺
[0115]
dmpu1，3-二甲基-四氢嘧啶-2(1h)-酮
[0116]
dmso二甲亚砜
[0117]
dppa叠氮磷酸二苯酯
[0118]
edc或edcin-(3-二甲基氨基丙基)-n
’‑
乙基碳二亚胺
[0119]
esms电喷雾质谱法
[0120]
et乙基
[0121]
etoac乙酸乙酯
[0122]
et3n三乙胺
[0123]
h小时
[0124]
hatu1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶鎓-3-氧化物六氟磷酸盐
[0125]
hex己烷
[0126]
hobt羟基苯并三唑水合物
[0127]
hplc高效液相色谱法
[0128]
ipa异丙醇
[0129]
lcms液相色谱-质谱法
[0130]
lda二异丙基氨基锂
[0131]
lihmds双(三甲基甲硅烷基)氨基锂
[0132]
m-cpba间氯过氧苯甲酸
[0133]
me甲基
[0134]
mecn乙腈
[0135]
meoh甲醇
[0136]
mg毫克
[0137]
min分钟
[0138]
μl微升
[0139]
ml毫升
[0140]
mmol毫摩尔
[0141]
nmr核磁共振
[0142]
nisn-碘琥珀酰亚胺ms质谱法
[0143]
mtbe甲基叔丁基醚
[0144]
pd/c碳载钯
[0145]
ph苯基
[0146]
py吡啶
[0147]
pd(dppf)cl2[1，1
′‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)
[0148]
pph3三苯基膦
[0149]
tbai四丁基碘化铵
[0150]
tea三乙胺
[0151]
tfa三氟乙酸
[0152]
tfaa三氟乙酸酐
[0153]
thf四氢呋喃
[0154]
tlc薄层色谱法
[0155]
tmeda四甲基乙二胺
[0156]
tms四甲基甲硅烷
[0157]
rt室温
[0158]
sem2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基
[0159]
sfc超临界流体色谱法
[0160]
在variannmr系统(400、500或600mhz)和brukernmr系统(400、500mhz)上测量nmr谱。以参照tms的低场和高场ppm报告化学位移，并参考内部tms或溶剂共振(1hnmr：对于cdcl3为δ7.27，对于(cd3)(chd2)so为δ2.50；和
13
cnmr：对于cdcl3为δ77.02，对于(cd3)2so为δ39.51)。以赫兹(hz)为单位表示耦合常数(j)，并将自旋多重性表示为s(单峰)、d(双峰)、dd(双二重峰)、t(三重峰)、m(多重峰)和br(宽峰)。在watersthar80sfc或bergermgii、thar80sfc、waters80sfc、sepiatec100sfc、waters200sfc、thar350sfc、bergermgiii制备型sfc系统上进行手性拆分。使用c18柱采用mecn在含有0.02至0.1％tfa的水中的梯度，在shimadazulcms-2020、shimadazulcms-2010ev或agilent1100系列lcms或watersacquitylcms仪器上记录lcms数据。紫外检测在220和/或254nm，并将esi电离用于ms检测。
[0161]
当使用手性柱通过色谱法实现手性拆分时，用于sfc手性拆分的手性柱如所指出的。
[0162]
另外，tlc是薄层色谱法；uv是紫外；w是瓦特；wt.％是重量百分比；xg是重力的倍数；αd是在589nm的偏振光比旋光度；℃是摄氏度；％w/v是前一种试剂的重量相对于后一种试剂的体积的百分比；hz是赫兹；cpm是每分钟计数；δh是化学位移；d是双峰；dd是双二重峰；mhz是兆赫；ms是质谱图，并且通过esms得到的质谱图在本文中可以用“lcms”表示；m/z是质荷比；n是正(normal)；n是eq浓度(normal)；nm是纳米；nm是纳摩尔浓度。
[0163]“人fxiaki(nm)”是人因子xiaki(nm)。
[0164]
方案
[0165]
方案1说明了制备本发明的化合物的一种合成顺序。可以如方案1中所述制备通式8的大环化合物。中间体大环核心2的制备详细描述于中间体部分，并且与这样的系统相关的一般方法描述于国际专利公开wo2017/074832中。化合物诸如1(其中y是适当的反应性卤素)可以利用suzuki反应与适当的硼酸2或硼酸酯偶联。可以通过碘化将甲酯或乙酯引入到化合物3的咪唑上，然后在甲醇或乙醇存在下进行碳酸化反应。随后可以通过不对称氢化过程将化合物5的烯烃还原为化合物6，其中可以通过使用rh催化剂/s-( )-dtbm-试剂系统获得对映异构体富集。在7中的n-氧化物的形成可以通过用氧化剂诸
如单过硫酸氢钾复合盐(oxone)或过乙酸氧化6的吡啶来实现。最后，通过用tfa处理可以除去7的sem保护基团，以提供通式8的化合物。
[0166]
方案1
[0167][0168]
中间体1
[0169]
(3-氨基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯
[0170][0171]
步骤1：(4-溴-3-硝基苯基1氨基甲酸酯
[0172]
向在2-me-thf(2.5l)中的4-溴-3-硝基苯胺(500.0g，2.30mol，1eq)中一次性加入diea(655.0g，5.07mol，883.0ml，2.2eq)。然后将氯甲酸甲酯(261.0g，2.76mol，214.0ml，1.2eq)历时0.5h加入反应中，同时将温度维持在20-48℃。将反应加热至50℃并老化1h。然后将其冷却至20℃。将反应倒入水中，并用etoac萃取。将合并的有机部分用盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥。将混合物过滤，然后在真空下浓缩。将产物用石油醚制浆。然后将产物通过过滤进行收集并在真空下干燥以提供(4-溴-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯。1hnmr：
(400mhz，cdcl3)8.03(s，1h)，7.64(d，j＝8.8hz，1h)，7.45-7.47(m，1h)，6.99(s，1h)，3.81(s，3h)。
[0173]
步骤2：(3-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯
[0174]
在25℃向配备磁力搅拌器的3l三颈烧瓶中加入在二氧杂环己烷(2.7l)中的(4-溴-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯(450.0g，1.64mol，1.0eq)、4，4，4
′
，4
′
，5，5，5
′
，5
′‑
八甲基-2，2
′‑
二(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(456.9g，1.80mol，1.1eq)、koac(353.2g，3.60mol，2.2eq)和pd(dppf)cl2(59.8g，0.08mol，0.05eq)。将反应用n2净化3次，然后加热至80℃并老化7h。将反应在真空下浓缩。将残余物悬浮于mtbe中。将混合物过滤，并将滤液在真空下浓缩。将残余物通过柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝50：1至4：1)纯化。将含有期望产物的级分合并，并在真空下浓缩以提供(3-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯。1hnmr：400mhz cdcl3δ：8.18(s，1h)，7.69-7.71(d，j＝7.2hz，1h)，7.46-7.48(d，j＝8.0hz，1h)，6.96(s，1h)，3.80(s，3h)，1.42(s，12h)。
[0175]
步骤3：(3-氨基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯
[0176]
向干燥的氢化瓶中加入pd/c(3.0g，10.0％纯度)、meoh(1.5l)和(3-硝基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯(60.0g，0.18mol，1.0eq)。将容器在真空下脱气并用h2净化3次。然后将反应在h2(20psi)下在25℃老化2h。将反应混合物在硅藻土上过滤并将滤液在真空下浓缩以提供(3-氨基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：292.9[m h]
。
[0177]1hnmr：(400mhz，cdcl3)7.51(d，j＝8.0hz，1h)，6.91(s，1h)，6.55(s，1h)，6.46-6.49(m，1h)，4.80(s，2h)，3.76(s，3h)，1.33(s，12h)。
[0178]
中间体2
[0179]
(5-溴吡啶-2-基)(4-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-2-基)甲酮
[0180][0181]
步骤1：4-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑
[0182]
在0℃向nah(4.21g，105mmol，60重量％)在dmf(200ml)中的悬浮液中加入分成小份的4-碘-1h-咪唑(17g，88mmol)。将其搅拌1h并将sem-cl(16.07g，96mmol)加入反应中。将混合物在室温搅拌12h并倒入冰水(200ml)中。将混合物用etoac(100ml x 3)萃取。将合并的有机层用水(3x50ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶上的快速柱色谱法(用石油醚∶etoac＝10∶1至3∶1v/v洗脱)纯化以提供标题化合物。ms(es
)m/z：325(m h)。
[0183]
步骤2：5-溴-n-甲氧基-n-甲基吡啶甲酰胺
[0184]
在0℃向5-溴吡啶甲酸(15g，74.3mmol)在dcm(200ml)中的溶液中加入edc(21.35g，111mmol)、n，o-二甲基羟胺盐酸盐(10.86g，111mmol)和吡啶(15.01ml，186mmol)。
将混合物在室温搅拌16h并在减压下浓缩。将残余物用etoac(250ml)稀释，并用1n hcl(50ml)洗涤和然后用盐水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生标题化合物，将其不经进一步纯化用在下一步中。ms(es
)m/z：245，247(m h)。
[0185]
步骤3：(5-溴吡啶-2-基)(4-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-2-基)甲酮
[0186]
在-78℃向4-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑(15.88g，49.0mmol)在thf(100ml)中的溶液中逐滴加入lda溶液(26.5ml，53.0mmol，2m在thf中)。将反应搅拌1h并逐滴加入5-溴-n-甲氧基-n-甲基吡啶甲酰胺(10g，40.8mmol)在thf(20ml)中的溶液。将得到的混合物在-78℃搅拌1h，并将其用饱和氯化铵水溶液(10ml)淬灭。将混合物用etoac(150ml)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶上的快速柱色谱法(用石油醚∶etoac＝10∶1v/v洗脱)纯化以产生标题化合物。1h nmr(400mhz，cdcl3)：δ8.85(s，1h)，8.23(m，1h)，8.02(m，1h)，7.52(s，1h)，5.81(s，2h)，3.65(m，2h)，0.96(m，2h)，-0.01(s，9h)。
[0187]
中间体3
[0188]
(3-氨基-4-(2-(5-溴吡啶甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯
[0189][0190]
在60℃将中间体2(40g，79mmol)、中间体1(25.3g，87mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(4.55g，3.94mmol)、dmf(354ml)和磷酸三钾(50.1g，236mmol)的混合物搅拌3.5h。将其冷却至室温并在减压下除去大部分溶剂。将残余物用乙酸乙酯(200ml)稀释，并用水(3x100ml)洗涤，然后用盐水(100ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶上的快速柱色谱法(用0-60％etoac/己烷洗脱，梯度)纯化以产生标题化合物。ms(es
)m/z：546，548[m h]。
[0191]
中间体4
[0192]
5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酸
[0193][0194]
步骤1：5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)戊酸甲酯
[0195]
在20℃在配备磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶中将苯并[d]噻唑-2-硫醇(220g，1.32mol)和5-溴戊酸甲酯(282.2g，1.45mol)与丙酮(2.0l)合并。在20℃向其中一次性加入k2co3(181.8g，1.32mol)。将反应在20℃搅拌12小时。将反应过滤，并在真空下浓缩以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)戊酸甲酯，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0196]
步骤2：5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2-甲基戊酸甲酯
[0197]
在20℃给配备磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶装入在干燥thf(1.5l)中的5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)戊酸甲酯(300.0g，1.07mol)和ch3i(151.3g，1.07mol)。将反应冷却至-70℃，然后历时2小时将lihmds(2m在thf中，746.3ml)加入混合物中，同时维持温度低于-60℃。将反应在-60℃老化2小时。将反应混合物倒入饱和nh4cl水溶液(8.0l)中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，然后在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化。将含有期望产物的级分合并，并在真空下浓缩以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)戊酸甲酯。
[0198]
步骤3：5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2
‑‑
二甲基戊酸甲酯
[0199]
在20℃给配备磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶装入在干燥thf(1.0l)中的5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2-甲基戊酸甲酯(200.0g，0.68mol)和ch3i(283.5g，2.0mol)。将反应冷却至-70℃，然后历时2小时将lda(2m，0.88l)加入混合物中，同时维持温度低于-60℃。将反应在-60℃老化2小时。将反应混合物倒入饱和nh4cl水溶液(4.0l)中，并用乙酸乙酯(5.0l，4.0l)萃取2次。将有机相用盐水(5.0l)洗涤，然后在真空下浓缩以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2-二甲基戊酸甲酯，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0200]
步骤4：5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2-二甲基戊酸
[0201]
在20℃给配备磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶装入在2-甲基四氢呋喃(0.2l)中的5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2-二甲基戊酸甲酯(200.0g，0.64mol)。在20℃将naoh水溶液(3.75m，1.0l)一次性加入混合物中。将混合物在80℃回流老化15小时。冷却至室温以后，将反应用乙酸乙酯萃取，并将水相用hcl水溶液(4m，1.0l)调至ph＝2以允许固体沉淀。将固体过滤，并将滤饼用石油醚洗涤以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2-二甲基戊酸，将其不经进一步纯化用于下一步。
[0202]
步骤5：5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酸
[0203]
在20℃给配备磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶装入在etoh(3600ml)中的5-(苯并[d]噻唑-2-基硫基)-2，2-二甲基戊酸(730.0g，2.48mol)。在20℃向其中一次性加入钼酸铵(73g)。在20℃历时0.2小时将h2o2(1403g，12.4mol，30％纯度)加入混合物中。将反应在约20-30℃老化2小时，在此时在20℃加入水(15l)。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用饱和na2so3水溶液(4.0l x 3)洗涤，然后经na2so4干燥。将混合物过滤，并将滤液在真空下浓缩。将产物与石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1一起研磨以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酸。lcms(es，m/z)：328.0[m h]
。
[0204]
中间体5
[0205]
((12z，8z)-9-(5-溴吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0206][0207]
步骤1：5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酰氯
[0208]
在25℃历时10分钟向5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酸(200g，0.61mol)在乙腈(1000ml)中的混合物中加入氯化亚砜(109g，0.12mol)。将反应混合物在25℃搅拌2h，然后将其在真空下浓缩以提供5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酰氯，将其不经进一步纯化地使用。
[0209]
步骤2：(3-(5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酰胺基)-4-(2-(5-溴吡啶甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯
[0210]
在25℃向(3-氨基-4-(2-(5-溴吡啶甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯(276g，0.51mol)在dcm(850ml)中的混合物中历时5分钟加入5一(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酰氯(180g，0.52mol)在dcm(1100ml)中的溶液，随后历时10分钟加入三乙胺(144.9ml，1.04mol)。将反应混合物在25℃搅拌2h。将两批反应合并用于后处理。将反应混合物倒入水(4.4l)中。将有机相用1n hcl(4.4l x 2)、饱和nahco3(4.4l)、盐水(4.4l)洗涤，并在真空中浓缩至干燥以提供标题化合物，将其不经进一步纯化地使用。lcms(es，m/z)：855.2，857.3[m h]
。
[0211]
步骤3：((12z，8z)-9-(5-溴吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0212]
在-20℃向lihmds(1.0m，818ml，0.82mol)在thf(1250ml)中的溶液中逐滴加入(3-(5-(苯并[d]噻唑-2-基磺酰基)-2，2-二甲基戊酰胺基)-4-(2-(5-溴吡啶甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-咪唑-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯(250g，0.20mol)在thf(1250ml)中的溶液。将反应混合物在-30℃至-20℃搅拌2h。将四批反应合并用于后处理。在0～10℃将反应混合物倒入饱和nh4cl(10l)中。将有机相用5％naoh(10l、9l和8l)洗涤。将水相用乙酸乙酯(5l，3l)萃取。将合并的有机相用盐水(5l，4l)洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。在真空下浓缩以后，将产物通过从meoh中重结晶进行纯化以提供标题化合物。lcms(es，m/z)：640.2，642.2[m h]
。1h nmr(400mhz，cdcl3)：δ8.71(d，j＝2.4hz，1h)，7.96-7.89(m，2h)，7.64(br s，1h)，7.54(d，j＝8.4hz，1h)，7.40(d，j＝8.6hz，1h)，7.34(s，1h)，6.94(br dd，j＝6.4，10.4hz，1h)，6.81(br s，1h)，5.09(d，j＝10.8hz，1h)，4.85(d，j＝10.6hz，1h)，3.85(s，3h)，3.37-3.24(m，2h)，2.52-2.26(m，3h)，1.86(dt，j＝6.0，13.8hz，1h)，1.42(s，3h)，1.27(s，3h)，0.83(t，j＝8.3hz，2h)，0.00(s，9h)。
[0213]
中间体6
[0214]
(6-((12z，8z)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-9-基)吡啶-3-基)硼酸
[0215][0216]
在n2下在25℃向((12z，8z)-9-(5-溴吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三
2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(4.4g，5.6mmol)在ch3cooh(25ml)中的搅拌混合物中加入1-碘吡咯烷-2，5-二酮(1.44g，6.41mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌16h。在0℃将反应混合物小心地逐滴加入到na2co3溶液中直到ph＝7。将混合物用乙酸乙酯(200ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(200ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-50％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：916.2(m h)
。
[0224]
步骤3：(12z，8z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯
[0225]
向((12z，8z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(8.50g，9.28mmol)在etoh(60ml)和dmso(60ml)中的混合物中加入pdcl2(dppf)(2.037g，2.78mmol)和tea(10.35ml，74.3mmol)，并将混合物在co气氛下在50psi在70℃搅拌16h。将反应混合物浓缩。将混合物冷却，用乙酸乙酯(200ml)稀释，用盐水(200ml x 4)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过色谱法(c18；0～50％mecn/h2o洗脱剂)纯化以产生(12z，8z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：862.5(m h)
。
[0226]
步骤4：(r，z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯
[0227]
在手套箱中在25℃向双(降冰片二烯)四氟硼酸铑(i)(0.195g，0.522mmol)在l，2-二氯乙烷(15ml)中的搅拌混合物中加入(s)-( )-5，5
′‑
双[二(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基]-4，4
′‑
二-1，3-苯并二氧杂环戊烯(0.616g，0.522mmol)，并将混合物在n2气氛下在25℃搅拌1h。在25℃向(12z，8z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯(4.5g，5.2mmol)在三氟乙醇(80ml)中的搅拌混合物中加入上述混合物，并将反应混合物在h2下在50psi在50℃搅拌48h。将反应混合物冷却并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-60％etoac/石油醚)纯化以产生(r，z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：864.3(m h)
。
[0228]
步骤5：(r，z)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环
九蕃-9-基)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶1-氧化物
[0229]
将(r，z)-9-(5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯(2.0g，2.3mmol)在ch3coooh(30ml)中的混合物在n2气氛下在30℃搅拌3h。在0℃将混合物加入碳酸氢钠水溶液(饱和的，200ml)和na2so3水溶液(饱和的，500ml)中，并将混合物用乙酸乙酯(500ml x 2)萃取。将合并的有机级分经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发以产生(r，z)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶1-氧化物，将其不经进一步纯化用在下一步中。lcms(es，m/z)：880.3(m h)
。
[0230]
步骤6：(r，z)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶1-氧化物
[0231]
向(r，z)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶1-氧化物(2.0g，2.3mmol)、2-氨基-3-巯基丙酸(0.826g，6.82mmol)在dcm(10ml)中的搅拌混合物中加入2，2，2-三氟乙酸(20ml，2.3mmol)，并将混合物在n2气氛下在40℃搅拌3h。在减压下蒸发挥发物。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0～65％ch2cl2/etoac)纯化。将其进一步通过手性sfc(daicel chiralcel od，40％0.1％nh3h2o etoh/co2)纯化以产生(r，z)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶1-氧化物。lcms(es，m/z)：750.3(m h)
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)：δ12.90(s，1h)，10.93(s，1h)，9.74(s，1h)，8.71-8.47(m，2h)，8.22-8.12(m，1h)，8.07(br d，j＝4.3hz，1h)，7.94-7.69(m，3h)，7.68-7.60(m，1h)，7.56-7.48(m，1h)，7.42-7.28(m，1h)，7.05-6.92(m，1h)，4.92-4.71(m，1h)，4.23-4.03(m，2h)，3.72-3.62(m，3h)，2.24-1.78(m，4h)，1.58-1.36(m，1h)，1.29-1.21(m，3h)，1.19-1.11(m，3h)，1.07-0.92(m，3h)，0.33-0.42(m，1h)。
[0232]
实施例2
[0233]
(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(15-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0234]
[0235]
步骤1：1-(2-溴-4-氯苯基)-4-(三氟甲基)-1h-吡唑
[0236]
向2-溴-4-氯-1-氟苯(8.32g，39.7mmol)和4-(三氟甲基)-1h-吡唑(3.20g，23.5mmol)在dma(40ml)中的溶液中加入cs2co3(15.32g，47.0mmol)。将混合物加热至80℃保持20h。加入水(80ml)并将混合物用乙酸乙酯(40ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(40ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-20％etoac/石油醚)纯化以产生1-(2-溴-4-氯苯基)-4-(三氟甲基)-1h-吡唑。
[0237]
步骤2：((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0238]
向(6-((12z，8z)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-9-基)吡啶-3-基)硼酸(1.50g，2.48mmol)、1-(2-溴-4-氯苯基)-4-(三氟甲基)-1h-吡唑(0.766g，2.35mmol)、磷酸钾(2.477ml，4.95mmol)在thf(15ml)中的搅拌混合物中加入a pd g2(0.166g，0.248mmol)，并将混合物在n2气氛下在80℃搅拌2h。lcms表明反应结束。加入水(10ml)并将混合物用乙酸乙酯(20ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(30ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：806.3(m h)
。
[0239]
步骤3：((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0240]
在25℃向((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.3g，1.6mmol)在ch3cooh(10ml)中的搅拌混合物中加入1-碘吡咯烷-2，5-二酮(0.381g，1.69mmol)，并将混合物在40℃搅拌2h。lcms表明反应结束。在0℃将反应混合物小心地逐滴加入到nahco3溶液中直到ph＝7。将混合物用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(50ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：932.1(m h)
。
[0241]
步骤4：(12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5
‑‑
二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯
[0242]
向((12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.10g，1.18mmol)在etoh(10ml)
和dmso(10ml)中的混合物中加入pdcl2(dppf)(0.259g，0.354mmol)和tea(1.645ml，11.8mmol)，并将混合物在co气氛下在50psi在70℃搅拌16h。lcms表明反应结束。在减压下除去溶剂，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-50％etoac/石油醚)纯化以产生(12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：878.3(m h)
。
[0243]
步骤5：(r，z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯
[0244]
在手套箱中在室温向5，5
′‑
双(双(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基)-4，4
′‑
二苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯(102mg，0.087mmol)在1，2
‑‑
二氯乙烷(1ml)中的搅拌混合物中加入(s)-( )-5，5
′‑
双[二(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基]-4，4
′‑
二-1，3-苯并二氧杂环戊烯(32.4mg，0.087mmol)，并将混合物在n2气氛下在25℃搅拌1h。在室温将(12z，8z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯(760mg，0.865mmol)在2，2，2-三氟乙-1-醇(5ml)中的搅拌混合物加入上述催化剂混合物中，并将混合物在h2气氛下(50psi)在45℃搅拌36h。在减压下除去溶剂，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生(r，z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：880.4(m h)
。
[0245]
步骤6：(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0246]
将在ch3coooh(5ml，10重量％)中的(r，z)-9-(5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯(640mg，0.727mmol)在25℃搅拌2h。lcms表明反应结束。将反应混合物小心地逐滴转移至20g的冰、饱和nahco3(80ml)和饱和na2so3(80ml)的冷却(0℃)混合物中。将混合物用etoac(200ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(200ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发以产生(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物，将其不经进一步纯化用在下一步中。lcms(es，m/z)：896.3(m h)
。
[0247]
步骤7：(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0248]
向(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲
基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物(640mg，0.714mmol)、2-氨基-3-巯基丙酸(260mg，2.14mmol)在ch2cl2(6ml)中的混合物中加入tfa(6ml)，并将混合物在n2气氛下在40℃搅拌2h。在减压下除去溶剂。加入nahco3水溶液(饱和的，5ml)并将混合物用乙酸乙酯(10ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(15ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-60％etoac/石油醚)纯化。将其通过手性sfc(daicel chiralpak as，40％0.1％nh3h2o etoh/co2)、然后通过反相hplc(acn/水，含有0.04％nh3h2o 10mm nh4hco3调节剂)进一步纯化以产生(r，z)-5-(5-氯-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物。lcms(es，m/z)：766.2(m h)
。1h nmr(500mhz，cdcl3)：δ12.39-11.97(m，1h)，11.70(br s，1h)，8.30(s，1h)，7.91(br d，j＝8.5hz，1h)，7.82(s，1h)，7.77(br s，1h)，7.70(s，1h)，7.64-7.48(m，4h)，7.33(br d，j＝8.1hz，1h)，6.97-6.77(m，2h)，4.87-4.72(m，1h)，4.29(q，j＝6.9hz，2h)，3.76(s，3h)，3.03-2.63(m，1h)，2.37-2.11(br s，1h)，1.98-1.78(m，1h)，1.61-1.46(m，2h)，1.39-1.13(m，10h)。
[0249]
实施例3
[0250]
(r，z)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0251][0252]
步骤1：2-溴-1-(二氟甲氧基)-4-氟苯
[0253]
向2-溴-4-氟苯酚(20.0g，105mmol)在dmf(250ml)中的搅拌混合物中加入k2co3(43.4g，314mmol)和2-氯-2，2-二氟乙酸钠(19.16g，126mmol)，并将反应混合物在n2下在70℃搅拌15h。加入水(500ml)，并将混合物用石油醚(500ml x 3)萃取。将合并的有机级分用盐水(500ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-10％etoac/石油醚)纯化以产生2-溴-1-(二氟甲氧基)-4-氟苯。1h nmr(400mhz，cd3od)：δ7.52-7.45(m，1h)，7.35-7.25(m，1h)，7.20-7.10(m，1h)，6.76(t，j＝72hz，1h)。
[0254]
步骤2：((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0255]
向(6-((12z，8z)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-9-基)吡啶-3-基)硼酸(11.3g，18.7mmol)和pdcl2(dppf)(0.956g，1.31mmol)在二氧杂环己烷(120ml)中的搅拌混合物中加入2-溴-1-(二氟甲氧基)-4-氟苯(6.75g，28.0mmol)和磷酸钾
(2m，28.0ml，56.0mmol)。将反应混合物在n2气氛下在80℃搅拌4小时。加入水(150ml)，并将混合物用乙酸乙酯(250ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(250ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-50％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：722.6(m h)
。
[0256]
步骤3：((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0257]
在25℃向((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(8.0g，11mmol)在ch3cooh(60ml)中的搅拌混合物中加入1-碘吡咯烷-2，5-二酮(2.244g，9.97mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌1h。在0℃将反应混合物小心地逐滴加入到nahco3溶液中直到ph＝7。将混合物用乙酸乙酯(500ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(500ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-60％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：848.3(m h)
。
[0258]
步骤4：(12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯
[0259]
在n2下向((12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(9.0g，9.6mmol)在etoh(90ml)和dmso(90ml)中的混合物中加入pd(dppf)cl2(1.958g，2.68mmol)和et3n(7.99ml，57.3mmol)。将悬浮液在真空下脱气并用co净化几次。将反应混合物在co下(50psi)在70℃搅拌23小时。将反应混合物冷却至25℃，加入水(150ml)，并将混合物用乙酸乙酯(250ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(250ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(10-40％etoac/石油醚)纯化以产生(12z，8z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：794.2(m h)
。
[0260]
步骤5：(r，z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯
[0261]
在手套箱中在室温向双(降冰片二烯)四氟硼酸铑(i)(0.313g，0.838mmol)在1，2-二氯乙烷(5ml)中的搅拌混合物中加入(s)-( )-5，5
′‑
双[二(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基]-4，4
′‑
二-1，3-苯并二氧杂环戊烯(0.988g，0.838mmol)，并将混合物在n2气氛下
5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物
[0268][0269]
步骤1：3-溴-5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶
[0270]
向3-溴-5-氯吡啶-2-醇(1.85g，8.88mmol)和na2co3(1.88g，17.8mmol)在mecn(20ml)中的混合物中加入2，2
‑‑
二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(1.581g，8.88mmol)。将反应混合物在25℃搅拌15小时。将反应混合物用etoac(20ml)和水(20ml)稀释。将水层用etoac(20ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-30％etoac/石油醚)纯化以产生3-溴-5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶。1h nmr(400mhz，cdcl3)：δ8.08(s，1h)，7.95(s，1h)，7.38(t，j＝72.0hz，1h)。
[0271]
步骤2：((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0272]
在n2下向(6-((12z，8z)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-9-基)吡啶-3-基)硼酸(0.945g，1.56mmol)和3-溴-5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶(0.565g，2.19mmol)在二氧杂环己烷(20ml)中的混合物中加入pd(dppf)cl2(0.115g，0.140mmol)和k3po4(2m，2.34ml，4.68mmol)。将反应混合物在80℃搅拌5小时。然后将反应用etoac(30ml)和水(50ml)稀释。将水层用etoac(20ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(20-50％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：739.2(m h)
。
[0273]
步骤3：((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0274]
向((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.23g，1.66mmol)在乙酸(20ml)中的混合物中加入n-碘琥珀酰亚胺(0.356g，1.58mmol)。将反应混合物在40℃搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩以除去acoh，将残余的油用etoac(30ml)稀释，并倒入2n k2co3水溶液中直到ph＝8。将其用etoac(30ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(10-45％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：865.0(m h)
。
[0275]
步骤4：(12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯
[0276]
在n2下向((12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.00g，1.16mmol)在etoh(15ml)和dmso(15ml)中的混合物中加入pd(dppf)cl2(0.254g，0.347mmol)和et3n(1.611ml，11.56mmol)。将悬浮液在真空下脱气并用co净化几次。将混合物在co下(50psi)在70℃搅拌20小时。将反应混合物冷却至25℃，在真空中浓缩以除去etoh。将残余物用etoac(20ml)和水(50ml)稀释。将水层用etoac(30ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(10-45％etoac/石油醚)纯化以产生(12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：811.2(m h)
。
[0277]
步骤5：(r，z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯
[0278]
在手套箱中在25℃向(s)-( )-5，5
′‑
双[二(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基]-4，4
′‑
二-1，3-苯并二氧杂环戊烯(118mg，0.100mmol)在1，2-二氯乙烷(2.0ml)中的搅拌混合物中加入双(降冰片二烯)四氟硼酸铑(i)(37.3mg，0.100mmol)，并将混合物在n2下在25℃搅拌1h。在n2下向(12z，8z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯(810mg，0.998mmol)在2，2，2-三氟乙-1-醇(20ml)中的混合物中加入上述混合物。将悬浮液在真空下脱气并用h2净化几次。将混合物在h2下(50psi)在50℃搅拌48小时。将反应混合物冷却至25℃并浓缩至干燥。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(10-50％etoac/石油醚)纯化以提供(r，z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：813.2(m h)
。
[0279]
步骤6：(r，z)-5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-6-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物
[0280]
将(r，z)-9-(5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-[3，3
′‑
联吡啶]-6-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯(690mg，0.848mmol)在ch3coooh(12ml)中的混合物(8～10％)在25℃搅拌4小时。将反应混合物用etoac(20ml)稀释并倒入饱和na2so3水溶
液/nahco3(v/v，1∶1)中直到ph＝8。然后将其用etoac(30ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩以提供(r，z)-5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-6-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物，将其不经进一步纯化用在下一步中。lcms(es，m/z)：829.2(m h)
。
[0281]
步骤7：(r，z)-5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-6-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物
[0282]
向(r，z)-5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-6-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物(700mg，0.844mmol)在tfa(10ml)和dcm(5.0ml)中的混合物中加入2-氨基-3-巯基丙酸(307mg，2.53mmol)。将反应混合物在40℃搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩并用etoac(30ml)稀释，并倒入2n k2co3水溶液中直到ph＝8。然后将其用etoac(30ml x 2)萃取。将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(25-65％etoac/石油醚)纯化。将其通过手性sfc(daicelchiralcel od，40％0.1％nh3h2o etoh/co2)进一步纯化以产生(r，z)-5
′‑
氯-2
′‑
(二氟甲氧基)-6-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-[3，3
′‑
联吡啶]1-氧化物。lcms(es，m/z)：699.2(m h)
。1h nmr(400mhz，cd3od)：δ8.61(s，1h)，8.30(s，1h)，8.14(s，1h)，8.07-7.27(m，6h)，5.07-4.90(m，1h)，4.31-4.04(m，2h)，3.73(s，3h)，2.30-2.01(m，2h)，1.72-1.39(m，2h)，1.31-0.97(m，11h)。
[0283]
实施例5
[0284]
(r，z)-5-(3-氯-2-氟苯基)-2-(1
5-(乙氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0285][0286]
步骤1：((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5
‑‑
二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0287]
向((12z，8z)-9-(5-溴吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.0g，1.6mmol)和pdcl2(dppf)(0.114g，0.156mmol)在thf(15ml)中的搅拌混合物中加入(3-氯-2-氟苯基)硼酸(0.354g，2.03mmol)和磷酸钾(2m，2.341ml，4.68mmol)。将反应混合物在n2气氛下在85℃搅拌16小时。加入水(50ml)，并将混合物用乙酸乙酯(50ml x 2)
萃取。将合并的有机级分用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：690.2(m h)
。
[0288]
步骤2：((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯
[0289]
在25℃向((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(1.15g，1.67mmol)在ch3cooh(10ml)中的搅拌混合物中加入1-碘吡咯烷-2，5-二酮(0.352g，1.57mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌3h。在0℃将反应混合物小心地逐滴加入到nahco3溶液中直到ph＝7。将混合物用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5
‑‑
二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯。lcms(es，m/z)：816.1(m h)
。
[0290]
步骤3：(12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯
[0291]
向((12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-1
5-碘-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-2
4-基)氨基甲酸甲酯(500mg，0.613mmol)在etoh(20ml)和dmso(20ml)中的混合物中加入pdcl2(dppf)(134mg，0.184mmol)和tea(0.256ml，1.84mmol)，并将混合物在co气氛下在50psi在70℃搅拌16h。加入水(50ml)。将混合物用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-40％etoac/石油醚)纯化以产生(12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-8-烯-1
5-甲酸乙酯。lcms(es，m/z)：762.2(m h)
。
[0292]
步骤4：(r，z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯
[0293]
在手套箱中在25℃向(s)-( )-5，5
′‑
双(双(3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)膦基)-4，4
′‑
二苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯(132mg，0.111mmol)在1，2-二氯乙烷(4ml)中的搅拌混合物中加入双(降冰片二烯)四氟硼酸铑(i)(41.7mg，0.111mmol)，并将混合物在n2下在25℃搅拌1h。在n2下向(12z，8z)-9-(5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪
苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物
[0312]
向(r，z)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(甲氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物(5.00g，5.77mmol)、2-氨基-3-巯基丙酸(3.50g，28.9mmol)在dcm(20ml)中的搅拌混合物中加入2，2，2-三氟乙酸(40ml，5.77mmol)，并将混合物在40℃搅拌2h。将混合物浓缩至干燥。将残余物溶解在200ml乙酸乙酯中。在0℃将其小心地逐滴加入到碳酸氢钠水溶液中。将混合物用乙酸乙酯(200ml x 2)萃取。将合并的有机级分用盐水(200ml x 2)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(0-80％etoac/石油醚)纯化。将其通过手性sfc(daicel chiralcel od，55％0.1％nh3h2o etoh/co2)进一步纯化以产生(r，z)-5-(5-氟-2-(4-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)苯基)-2-(1
5-(甲氧基羰基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)吡啶1-氧化物。lcms(es，m/z)：736.2(m h)
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)：δ12.93(s，0.5h)，12.19(br s，0.5h)，10.89(br s，0.5h)，9.96-9.65(m，1h)，8.64(br d，j＝11.2hz，1h)，8.57(br s，0.5h)，8.25-8.10(m，1h)，8.07(br s，1h)，7.94(br d，j＝8.1hz，0.5h)，7.82-7.68(m，2h)，7.64-7.63(m，1.5h)，7.55-7.53(m，1.5h)，7.46-7.35(m，1h)，7.32(br d，j＝8.3hz，0.5h)，7.06-6.92(m，1h)，4.95-4.69(m，1h)，3.77-3.55(m，6h)，2.27-1.71(m，3h)，1.59-1.30(m，1h)，1.29-0.23(m，8h)。
[0313]
实施例7
[0314]
(r，z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)-1-氧代吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)苯杂环九蕃-1
5-甲酸铵
[0315][0316]
步骤1：(z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸
[0317]
将(z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸乙酯(2g，2.51mmol)、氢氧化锂水合物(0.527g，12.56mmol)在thf(20ml)、水(6ml)和meoh(5ml)中的混合物在40℃搅拌16h。将反应用hcl(1m)淬灭至ph＝3，加入水(10ml)，并将混合物用乙酸乙酯(2*100ml)萃取。将合并的有机部分用盐水(饱和的，2x50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过硅胶色谱法纯化以提供标题化合物。lcms(es，m/z)：768.5(m h)
。
[0318]
步骤2：(z)-2-(1
5-羧基-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶1-氧化物
[0319]
将(z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸(1g，1.302mmol)在ch3coooh(10ml，10重量％)中的混合物在25℃搅拌6h。将反应小心地逐滴转移至5g冰、饱和nahco3(50ml)/饱和na2so3(50ml)的冷却的0℃混合物。将混合物用etoac(2*150ml)萃取。将合并的有机部分用盐水(100ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发以提供标题化合物。将残余物不经进一步纯化用在下一步中。lcms(es，m/z)：784.4(m h)
。
[0320]
步骤3：(z)-2-(1
5-羧基-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶1-氧化物
[0321]
在室温向(z)-2-(1
5-羧基-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-1
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶1-氧化物(1.1g，1.403mmol)和dl-半胱氨酸(0.850g，7.02mmol)在dcm(5ml)中的搅拌混合物中加入tfa(10ml，130mmol)，并将混合物在40℃搅拌1h。将混合物浓缩并将残余物用etoac(50ml)稀释。在0℃将混合物倒入100ml nahco3溶液中，然后用乙酸乙酯(2*100ml)萃取。将合并的有机部分用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将溶剂在减压下蒸发。将残余物通过快速硅胶色谱法(12g硅胶快速柱，0～3％meoh/dcm梯度洗脱剂，以30ml/min，35min，干燥加载)纯化以产生标题化合物。lcms(es，m/z)：654.3(m h)
。
[0322]
步骤4：(r，z)-9-(5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)-1-氧代吡啶-2-基)-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-1
5-甲酸铵
[0323]
用sfc(柱daicel chiralcel od(250mm*30mm，10um)，条件0.1％nh3h2o，etoh。开始b 50，结束b 50，梯度流速(ml/min)80，注射150)分离(z)-2-(1
5-羧基-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶1-氧化物(480mg，0.734mmol)以产生峰1(s)-异构体(rt＝0.868min)和峰2(r)-异构体(rt＝3.819min)。将峰1残余物通过制备型hplc(柱ymc-actus triart c18 150*30mm*5um，条件：水(0.1％tfa)-acn。开始b 36，结束b 56，梯度时间(min)11，100％b保持时间(min)2，流速(ml/min)25，注射7)进一步纯化，并将溶液冻干以产生(s，z)-2-(1
5-羧基-2
4-((甲氧基羰基)氨基)-5，5-二甲基-4-氧代-11h-3-氮杂-1(4，2)-咪唑杂-2(1，2)-苯杂环九蕃-9-基)-5-(2-(二氟甲氧基)-5-氟苯基)吡啶1-氧化物。lcms(es，m/z)：654.2(m h)
。1h nmr(meod，400mhz)δ8.53(d，j＝1.2hz，1h)，7.89(d，j＝8.4hz，1h)，7.84-7.79(m，1h)，7.72(br d，j＝8.5hz，1h)，7.62(s，1h)，7.44-7.33(m，3h)，7.33-7.25(m，1h)，6.83(t，j＝58hz，1h)，4.95-4.90(m，1h)，3.77(s，3h)，2.46-2.15(m，2h)，1.83-1.55(m，2h)，1.50-1.25(m，4h)，1.13(s，3h)，1.10-0.80(m，1h)。
[0324]
将峰2冻干以产生标题化合物。lcms(es，m/z)：654.2(m h)
。1h nmr(meod，500mhz)δ8.51(br s，1h)，7.86-7.63(m，3h)，7.44-7.19(m，5h)，6.80(t，j＝58hz，1h)，5.00-4.93(m，1h)，3.75(s，3h)，2.39-1.84(m，2h)，1.56-1.33(m，2h)，1.32-1.21(m，4h)，1.17-1.12(m，4h)。
[0325]
通过使用与上述那些类似的程序和适当的起始材料，合成以下化合物并通过lc/ms进行表征。
[0326][0327]
因子xia测定
[0328]
使用有关的纯化的丝氨酸蛋白酶和适当的合成底物，可以确定本发明的化合物作为凝血因子xia的抑制剂的有效性。在不存在和存在本发明的化合物的情况下，测量有关的丝氨酸蛋白酶对生色或荧光底物的水解速率。在室温或在37℃进行测定。底物的水解导致氨基三氟甲基香豆素(afc)的释放，通过测量在405nm激发下在510nm的发射的增加来通过荧光光谱法对其进行监测。在抑制剂存在下荧光变化率的降低指示酶抑制。这样的方法是本领域技术人员已知的。将该测定的结果表示为半数最大抑制浓度(ic
50
)或抑制常数ki。
[0329]
将化合物与人(0.04nm)因子xia一起在含有150mm氯化钠、5mm氯化钙、0.1％peg 8000的ph 7.4的50mm hepes缓冲液中在25℃预温育30分钟。通过添加底物甘氨酸-脯氨酸-精氨酸-7-酰氨基-4-三氟甲基香豆素(gpr-afc)并在25℃温育60分钟以后在400/505nm测量荧光来确定因子xia酶活性。由数据计算每个数据点的抑制百分比，并使用log(抑制剂)相对于应答的四参数方程进行分析以确定半数最大抑制浓度(ic
50
)。使用cheng-prusoff方程将ic
50
转化成平衡抑制常数(ki)。
[0330]
该测定显示的活性指示，本发明的化合物可以在治疗上用于在患有不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、顽固性心绞痛、心肌梗塞、短暂缺血发作、心房颤动、中风诸如血栓性中风或栓塞性中风、静脉血栓形成、冠状动脉和脑动脉血栓形成、脑和肺栓塞、动脉粥样硬化、深静脉血栓形成、弥散性血管内凝血以及再通血管的再阻塞或再狭窄的患者中治疗或预防各种心血管和/或脑血管血栓栓塞性病症。
[0331]
激肽释放酶测定
solutions ltd.，英国)通过非线性最小二乘回归分析来确定ic50值。
[0340]
组织激肽释放酶酶活性的抑制
[0341]
在corning 3575非结合表面微量培养板中在50mm hepes、150mm nacl、5mm cacl2、0.1％peg-8000(ph 7.4)中在25℃用人组织激肽释放酶(raybiotech，目录号228-10996或evotec，终浓度5nm)测定化合物。从166.67um开始以3倍稀释系列，在10-点剂量滴定中测试化合物。通过使用tecan safire平板读数器在400/505nm连续地监测荧光来测量n-乙酰基-kpr-afc底物(sigma，目录号c6608，终浓度100um)的裂解速率，确定组织激肽释放酶酶活性。使用初始反应速率(0至20分钟)确定抑制百分比。由rfu/min数据重新计算每个数据点的抑制百分比，并用graphpad prism软件使用log(抑制剂)相对于应答的四参数方程进行分析。
[0342]
高通量(ht)溶解度测定
[0343]
色谱系统由agilent 1290uplc/dad系统和chemstation软件组成，二者都来自美国agilent technologies。在supelco ascentis express c18，30mm x 3.0mm i.d.，2.7μm hplc柱上进行分离。流动相由在ph 7缓冲的磷酸钾(流动相a)和乙腈(流动相b)组成。将柱温箱温度设定至30℃，并且uplc分析由梯度组成。注射体积是2μl，并将分光光度检测设定至215和238nm。
[0344]
供给化合物在dmso中的10mm储备溶液用于分析。将2.5μl储备溶液(10mm)稀释到247.5μl有机共溶剂(10％mecn/80％meoh/10％dmso，v/v/v)中以产生100μm的标准溶液。为了制备溶解度溶液，将4.1μl的10mm dmso储备溶液稀释到247.5μl磷酸盐缓冲盐水(pbs)(ph 7)溶液中。将10mm dmso储备溶液的第二份4.1μl等分试样加入196μl的pbs(ph 2)溶液中。将10mm dmso储备溶液的第三份4.1μl等分试样加入196μl的fassif(ph 6.5)溶液中。将每份溶解度溶液密封并在25℃摇动24小时。使用过滤器(0.45μm，聚丙烯)通过离心过滤经平衡的溶解度溶液。将各50μl的100μm标准溶液和经过滤的平衡的溶解度溶液放入384孔平板中，随后将平板热密封。
[0345]
通过uplc/dad分析每种标准品和溶解度溶液。通过下述方程计算溶解度值：
[0346]
溶解度＝(样品的峰面积/标准品的峰面积)(标准品浓度)
[0347]
表1
[0348]
下表显示实施例化合物的代表性数据。在该表中，fxia ki是试验化合物抑制fxia酶作用的能力的量度。这些结果指示化合物用作fxia酶抑制剂的内在活性。另外提供血浆激肽释放酶(pkal)抑制、组织激肽释放酶抑制(tkal)和去甲肾上腺素转运蛋白功能拮抗剂摄取活性(net)。
[0349][0350]
药代动力学通用程序：
[0351]
大鼠盒式(cassette)通用程序：
[0352]
通过静脉内盒式施用研究在大鼠中确定清除率、分布容积、半衰期和平均停留时间(mrt)的血浆药代动力学参数。将2只通常体重为225-260克的雄性大鼠在给药前禁食过夜。根据所使用的剂量，通过加入到媒介物中来制备用于静脉内给药的化合物。对于典型制备物，将1mg/ml(静脉内)的最多5种试验化合物加入由20％二甲亚砜(dmso)、60％聚乙二醇400(peg400)和20％水构成的媒介物中。通过预插管的颈静脉向2只大鼠施用静脉内制剂。通常在给药前、给药后2、8、15、30分钟、1、2、4、6和8小时通过预插管的动脉收集血液。将样品收集在k2edta试管中，在冰上储存并离心。将血浆转移至微量滴定板并在-70℃储存直至分析。利用蛋白沉淀提取血浆样品，并通过液相色谱法分离和随后的质谱检测(lcms/ms)进行分析，其中使用每种化合物的标准曲线。通过非房室法计算血浆药代动力学参数。
[0353]
大鼠筛选静脉内/口服通用程序：
[0354]
通过口服施用和静脉内施用研究在大鼠中确定清除率、分布容积、半衰期、平均停留时间(mrt)和口服生物利用度(％f)的血浆药代动力学参数。将4只通常体重为225-260克的雄性大鼠在给药前禁食过夜。根据所使用的剂量，通过加入到媒介物中来制备用于口服和静脉内给药的化合物。对于典型制备物，将1mg/ml(静脉内)或1.5mg/ml(口服)的试验化合物加入由20％-二甲亚砜(dmso)、60％聚乙二醇400(peg400)和20％水构成的媒介物中。通过预插管的颈静脉向2只大鼠施用静脉内制剂，并通过经口管饲法向2只大鼠施用口服剂量。通常在给药前、给药后2分钟、8分钟、15分钟、30分钟和1、2、4、6和8小时(对于静脉内)和在给药前、给药后15分钟、30分钟和1、2、4、6、8小时(对于口服给药)，通过预插管的动脉收集血液。将样品收集在k2edta试管中，在冰上储存并离心。将血浆转移至微量滴定板并在-70℃储存直至分析。利用蛋白沉淀提取血浆样品，并通过液相色谱法分离和随后的质谱检测(lcms/ms)进行分析，其中使用每种化合物的标准曲线。通过非房室法计算静脉内和口服给药数据的血浆药代动力学参数。将口服生物利用度确定为口服给药后相对于静脉内给药后剂量归一化的血浆曲线下面积(auc)之比。
[0355]
犬筛选静脉内/口服通用程序：
[0356]
通过口服施用和静脉内施用研究在犬中确定清除率、分布容积、半衰期、平均停留
时间(mrt)和口服生物利用度的血浆药代动力学参数。将4只通常体重为8-12千克的雄性犬在给药前禁食过夜。根据所使用的剂量，通过加入到媒介物中来制备用于口服和静脉内给药的化合物。对于典型制备物，将1mg/ml(静脉内)或1.5mg/ml(口服)的试验化合物加入由20％二甲亚砜(dmso)、60％聚乙二醇400(peg400)和20％水构成的媒介物中。通过隐静脉或头静脉将静脉内制剂施用给2只犬，并通过经口管饲法将口服剂量施用给2只犬。通常在给药前、给药后2分钟、8分钟、15分钟、30分钟和1、2、4、6、8和24小时(对于静脉内)和在给药前、给药后15分钟、30分钟和1、2、4、6、8和24小时(对于口服给药)，通过头静脉或颈静脉收集血液。将样品收集在k2edta试管中，在冰上储存并离心。将血浆转移至微量滴定板并在-70℃储存直至分析。利用蛋白沉淀提取血浆样品，并通过液相色谱法分离和随后的质谱检测(lcms/ms)进行分析，其中使用每种化合物的标准曲线。通过非房室法计算静脉内和口服给药数据的血浆药代动力学参数。将口服生物利用度确定为口服给药后相对于静脉内给药后剂量归一化的血浆曲线下面积(auc)之比。
[0357]
犬盒式通用程序：
[0358]
通过静脉内盒式施用研究在犬中确定清除率、分布容积、半衰期和平均停留时间(mrt)的血浆药代动力学参数。将2只通常体重为8-12千克的雄性犬在给药前禁食过夜。根据所使用的剂量，通过加入到媒介物中来制备用于静脉内给药的化合物。对于典型制备物，将1mg/ml(静脉内)的最多5种试验化合物加入由20％二甲亚砜(dmso)、60％聚乙二醇400(peg400)和20％水构成的媒介物中。通过隐静脉或头静脉将静脉内制剂施用给2只犬。通常在给药前、给药后2、8、15、30分钟、1、2、4、6、8和24小时，通过头静脉或颈静脉收集血液。将样品收集在k2edta试管中，在冰上储存并离心。将血浆转移至微量滴定板并在-70℃储存直至分析。利用蛋白沉淀提取血浆样品，并通过液相色谱法分离和随后的质谱检测(lcms/ms)进行分析，其中使用每种化合物的标准曲线。通过非房室法计算血浆药代动力学参数。
[0359]
表2
[0360]
下表显示实施例化合物的代表性数据。在此表中，提供大鼠和犬的选定药代动力学数据(mrt＝平均停留时间)。此外，提供在ph2磷酸盐缓冲溶液(pbs)和ph6.5fassif(禁食状态模拟肠液)中的高通量溶解度。
[0361]