专利名称：一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，涉及一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，尤其是一种应用硅藻土脱色、大孔树脂富集和高速逆流色谱制备囊状紫檀素的方法。
背景技术：
囊状紫檀素(marsupsin)，分子式为c16h14o6,分子量302. 28，mpl93 195°c，是从豆科(leguminosae)植物囊状紫檀ptoroceirpus marsupium roxb.的心木中提取分离出的一种噢挵类活性成分。药理研究表明，囊状紫檀素具有降血糖活性，能显著降低实验糖尿病大鼠的血糖水平，效果可与二甲基双胍相比。目前尚未见囊状紫檀素工业分离制备方法的相关报道。
发明内容
本发明要解决技术问题是提供一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，该方法获得的产品纯度高。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的
一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于包括以下步骤以囊状紫檀心木为原料，粉碎，加入6-12倍量65-90%的乙醇，投入超声提取罐进行超声提取，过滤得到提取液，加入适量硅藻土保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到囊状紫檀素。所述超声频率为50-75khz，提取1-3次，每次15_45min。所述大孔树脂选自hpd-700型、⑶-180型和h-50型大孔树脂中的一种。所述娃藻土为用量为液体量的0. 2-0. 5%。所述高速逆流色谱的两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水，体积比为(3-7) :(4-5) :(2-3) : (3-5)，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为850_1000rpm。本发明具有以下优点采用超声提取效率高，能耗低；硅藻土脱色，除去部分杂质，提高柱层析吸附率；本发明采用高速逆流色谱进行精制，获得的产品品质好，符合食品药品的要求。本发明方法不仅适合实验室小规模提取分离，也适合规模化大生产。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例i :
取囊状紫檀心木，粉碎，加入6l75%的乙醇超声提取3次，每次15min，超声频率为50khz，过滤得到提取液，提取液加入0. 3%硅藻土，55°c保温脱色30min，脱色液浓缩至无醇味，通过h-50型大孔树脂柱，先用水洗脱杂质，再用3bv80%的乙醇溶液洗脱，收集富含囊状紫檀素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(4:4:3:4 )为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为850rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度囊状紫檀素流分，浓缩干燥即得囊状紫檀素，含量为96. 9%。实施例2:
取囊状紫檀心木，粉碎，加入8l90%的乙醇超声提取2次，每次30min，超声频率为60khz，过滤得到提取液，提取液加入o. 3%硅藻土，50°c保温脱色60min，脱色液浓缩至无醇味，通过hpd-700型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用4bv75%的乙醇溶液洗脱，收集富含囊状紫檀素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(3:4:2:3)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3. 5ml/min，同时启动主机，调节转速为950rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度囊状紫檀素流分，浓缩干燥即得囊状紫檀素，含量为 98. 0%。
实施例3
取囊状紫檀心木，粉碎，加入18l70%的乙醇超声提取2次，每次18min，超声频率为75khz，过滤得到提取液，提取液加入o. 2%硅藻土，60°c保温脱色50min，脱色液浓缩至无醇味，通过hpd-700型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用3bv80%的乙醇溶液洗脱，收集富含囊状紫檀素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(7:5:3:5)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为looorpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度囊状紫檀素流分，浓缩干燥即得囊状紫檀素，含量为98. 2%。实施例4:
取囊状紫檀心木，粉碎，加入12l65%的乙醇超声提取3次，每次20min，超声频率为50khz，过滤得到提取液，提取液加入o. 5%硅藻土，60°c保温脱色40min，脱色液浓缩至无醇味，通过cd-180型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用5bv85%的乙醇溶液洗脱，收集富含囊状紫檀素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(5:4:2:4)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为850rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度囊状紫檀素流分，浓缩干燥即得囊状紫檀素，含量为
97.6%。实施例5:
取囊状紫檀心木，粉碎，加入60l70%的乙醇超声提取i次，提取45min，超声频率为60khz，过滤得到提取液，提取液加入o. 4%硅藻土，60°c保温脱色45min，脱色液浓缩至无醇味，通过cd-180型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用6bv35%的乙醇溶液洗脱，收集富含囊状紫檀素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(4:5:3:4)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为950rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度囊状紫檀素流分，浓缩干燥即得囊状紫檀素，含量为
98.1%。
权利要求
1.一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于包括以下步骤以囊状紫檀心木为原料，粉碎，加入6-12倍量65-90%的乙醇，投入超声提取罐进行超声提取，过滤得到提取液，加入适量硅藻土保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到囊状紫檀素。
2.根据权利要求i所述的一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于所述超声频率为50-75khz，提取1-3次，每次15_45min。
3.根据权利要求i所述的一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于所述大孔树脂选自hpd-700型、⑶-180型和h-50型大孔树脂中的一种。
4.根据权利要求i所述的一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于所述硅藻土为用量为液体量的o. 2-0. 5%。
5.根据权利要求i所述的一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，其特征在于所述高速逆流色谱的两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水，体积比为(3-7): (4-5): (2-3):(3-5),上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为850-1000rpm。
全文摘要
本发明涉及一种高纯度囊状紫檀素的分离制备工艺，具体步骤为取囊状紫檀心木，粉碎，加入乙醇超声提取，提取液加入适量硅藻土保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到囊状紫檀素。本发明所述方法操作简便、分离效率高、产品纯度好，适合工业化生产。
文档编号c07d307/83gk102827120sq201210371878
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月29日 优先权日2012年9月29日
发明者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司