专利名称：用cd4抗体治疗狼疮的方法
技术领域：
本发明涉及单独地或与其他化合物组合使用非消耗性 (non-depleting) cd4抗体来治疗哺乳动物对象的狼疮和其他自身免疫性病症的 方法。
背景技术：
自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(sle)、重症肌无力、多发性 硬化症和特发性血小板减少性紫癜等仍旧是人类的重要临床疾病。顾名思义， 自身免疫性疾病通过身体自身的免疫系统造成其巨大破坏。尽管各种类型的自 身免疫性疾病的病理学机制不同，但一个共有机制涉及患者血清中存在的某些 抗体(文中称为自身反应性抗体或自身抗体)与自身核抗原或细胞抗原的结合。狼疮是一种涉及攻击结缔组织的抗体的自身免疫性疾病。预计有 ioo万美国人患有这种疾病，其中主要是20-40岁的女性。狼疮的主要形式是 系统性狼疮(系统性红斑狼疮；sle)。 sle与抗核抗体、循环免疫复合物的产 生以及补体系统的活化有关。每700名20-60岁之间女性约有1人发生sle。 sle能影响所有器官系统并能造成严重的组织损伤。sle中存在许多不同特异 性的自身抗体。sle患者产生的自身抗体通常具有抗-dna、抗-ro和抗-血小板特异性并能够引起该病的临床特征，如肾小球肾炎、关节炎、浆膜炎、新生 儿完全性心脏传导阻滞和血液学异常。这些自身抗体还可能涉及中枢神经系统
紊乱。arbuckle等描述了 sle临床发作之前自身抗体的产生(arbuckle等，(2003) n. engl. j. med. 349(16): 1526-1533)。存在与双链天然dna具有免疫反应性 的抗体通常用作sle的诊断标记。狼疮不治疗可能是致命的，因为它会从攻击皮肤和关节发展到内部 器官，其中包括肺、心脏和肾脏(主要涉及肾病)。狼疮主要表现为一系列突然 发作，具有疾病表现较轻或没有的间隔期。通过尿中蛋白尿的量测定的肾损伤 是sle中病原性相关损伤的最严重区域之一，占该病死亡率和发病率的至少 50%。目前还没有治疗已诊断患有sle的患者的方法。实际上，医生通 常采用许多强效的免疫抑制药物如高剂量皮质激素类，例如，泼尼松或硝基咪 唑硫嘌呤或环磷酰胺，这些药物在突然发作期间给予，但也可以长期给予经历 频繁突然发作的患者。即便有效治疗减轻了症状并延长了生命，但许多这些药 物对被治疗的患者具有潜在的严重副作用。此外，这些免疫抑制药会干扰个体 产生所有抗体而并非仅自身反应性抗-dna抗体的能力。免疫抑制药还能减弱 身体防御其他潜在病原体的能力，从而使患者对感染和其他潜在致命疾病如癌 症及其易感。 一些此类情况中，目前治疗方法的副作用以及疾病的持续低水平 发作会造成严重损害和早产儿死亡。最近的治疗方案包括环磷酰胺、氨甲喋呤、抗疟药、激素治疗(例 如，dhea)和抗-激素疗法(例如，抗-促乳素药溴隐亭)。还描述了涉及抗体的 治疗sle的方法。例如，diamond等的方法(美国专利号4690905)包括产生针 对抗-dna抗体的单克隆抗体(该单克隆抗体在其中被称为抗-独特型抗体)然后 使用这些抗-独特型抗体来除去患者系统中的病原性抗-dna抗体。然而，在治 疗时除去大量血液是一种危险而复杂的过程。美国专利号6726卯9披露了治疗 sle的方法，其中将包含纯化的抗-dna抗-独特型抗体的抗体组合物给予患 者，该给药要求注射或其他等效的给药模式进行。高剂量静脉内免疫球蛋白免疫球蛋白(ivig)输注也被用于治疗某 些自身免疫性疾病。迄今，用ivig治疗sle提供了混合效果，其中包括既治疗狼疮肾炎(akashi等，j. rheumatology 17: 375-379 (19卯))，而在少数情况中 又会恶化蛋白尿和肾损伤(jordan等，clin. immunol. immunopathol. 53: s164-169 (1989))。狼疮患者，如显示狼疮肾炎临床证据的sle患者和狼疮肾炎患者 需要经济且安全的治疗方法，该方法将有助于缓解那些最终导致肾衰竭的组织 损伤以及对这些症状造成的慢性血液透析和/或肾移植的需求。类似地，其他自 身免疫性疾病，如多发性硬化症(ms)、类风湿性关节炎、重症肌无力、银屑病、 青少年型糖尿病、斯耶格伦病、甲状腺疾病和炎性肠病患者也需要有效而安全 的治疗方法。
发明概述 —类常规实施方式提供了治疗哺乳动物对象，如人类对象的狼疮的 方法。在所述方法中，将治疗有效量的非消耗性cd4抗体和至少一种第二化 合物的组合给予所述对象，所述第二化合物选自下组例如环磷酰胺、霉酚酸 酯、ctla4-ig和a4-整联蛋白抗体等。某些实施方式中，所述对象是人。某些 实施方式中，所述第二化合物是环磷酰胺。在一类实施方式中，所述非消耗性cd4抗体具有seqidno:3所 示轻链氨基酸序列和seq id no: 6所示重链氨基酸序列、seq id no: 9所示 轻链氨基酸序列和seq id no: 12所示重链氨基酸序列、seq id no: 15所示 轻链氨基酸序列和seq id no: 18所示重链氨基酸序列、或seq id no: 21所 示轻链氨基酸序列和seq id no: 24所示重链氨基酸序列。在一类实施方式中，所述非消耗性cd4抗体包含含有以下序列的 抗体的cd4结合片段seq id no: 3所示轻链氨基酸序列和seq id no: 6所 示重链氨基酸序列、seq id no: 9所示轻链氨基酸序列和seq id no: 12所示 重链氨基酸序列、seq id no: 15所示轻链氨基酸序列和seq id no: 18所示 重链氨基酸序列、或seq id no: 21所示轻链氨基酸序列和seq id no: 24所 示重链氨基酸序列。在一类实施方式中，所述非消耗性cd4抗体包含图ia所示轻链的 cdr1 (seq id no: 25)、cdr2 (seq id no: 26)或优选cdr3 (seq id no: 27);例如，该抗体可包含
图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3(即，seqidno: 25、 seqidno:26和seqidno:27)。类似地，在一类实施方式中，所述抗 体包含图1d所示重链的cdr1 (seq id no: 28)、 cdr2 (seq id no: 29)或优 选cdr3 (seq id no: 30);例如，该抗体可包含图id所示重链的cdr1、cdr2 和cdr3(即，seq id no: 28、 seq id no: 29和seq id no: 30)。一实施方式 中，所述抗体包含图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3以及图id所示重 链的cdr1、 cdr2和cdr3(即，seq id no: 25-30)。其他示例性抗体包括， 但不限于，与图l-4中任一所示抗体相同的表位结合的抗体。所述非消耗性cd4抗体可以是人源化抗体，例如，其中要治疗的 对象是人。所述抗体可具有非糖基化的(aglycosylated)fc部分。任选地，所述 抗体不结合fc受体。某些实施方式中，所述抗体是结合fcrn受体的抗-cd4 变体抗体。该抗体任选在fc区氨基酸位置270、 322、 326、 327、 329、 313、 333和/或334中的一个或多个位置上包含氨基酸取代，该取代改变了抗体的 clq结合和/或依赖于补体的细胞毒性(例如，就不包含这种取代的亲代抗体而 言)。某些实施方式中，所述抗体包含补救受体结合表位或血清白蛋白结合肽。 任选地，所述抗体包含三个或多个抗原结合位点。要治疗对象的狼疮通常是系统性红斑狼疮(sle)、皮肤红斑狼疮 (cle)或狼疮肾炎。要治疗的狼疮在治疗开始时可以是早期、中期或晚期疾病。 在治疗狼疮肾炎的实施方式中，所述狼疮肾炎可以是i-vi级中的任何一种。例 如，要治疗的狼疮可以是ii级狼疮肾炎、iii级狼疮肾炎、iv级狼疮肾炎或v 级狼疮肾炎。 一实施方式中，用所述组合开始治疗后，与治疗开始前对象显示 的蛋白尿和/或活动性尿沉淀水平相比，所述对象显示出蛋白尿减轻和/或活动 性尿沉淀减轻。例如，蛋白尿可降低至少25%、至少50%、至少75%或至少 卯％，或蛋白尿可降至低于1 g/天或低于500 mg/天，和/或活动性尿沉淀可降 低至少25%、至少50%、至少75%或至少90%,或者在治疗开始后仅有活动 性尿沉淀。 —实施方式中，用所述组合开始治疗前，所述对象显示出蛋白尿， 通过治疗改善了这种蛋白尿。例如，治疗开始前，所述对象显示出的蛋白尿高 于500 mg/天、高于1000mg/天、高于2000 mg/天或高于3500 mg/天。治疗开始后，蛋白尿可降低至少25%、至少50%、至少75%或至少90%，或蛋白尿 可降至低于l g/天或低于500 mg/天。另一个例子是，治疗开始前，所述对象 显示出的蛋白质与肌酸酐之比高于0.5、高于1或高于2;治疗开始后，对象尿 液中的蛋白质与肌酸酐之比可降低至少25%或至少50%，或者该比例可降至低 于1或低于0.5。 —方面，该方法包括用所述非消耗性cd4抗体和所述第二化合物 治疗对象以减轻症状，然后用所述非消耗性cd4抗体或用所述第二化合物(彼 此不组合)继续治疗该对象以持续缓解症状。例如，在一类实施方式中，用所 述组合开始治疗后，狼疮得到改善；然后停止用该组合治疗所述对象，而是给 予该对象治疗有效量的非消耗性cd4抗体。在另一类示例性实施方式中，用 所述组合开始治疗后，狼疮得到改善；然后停止用该组合治疗所述对象，而是 给予该对象治疗有效量的第二化合物或者一种或多种其他化合物。另一类常规实施方式还提供了治疗哺乳动物对象如人的狼疮肾炎 的方法。在该方法中，将治疗有效量的非消耗性cd4抗体给予所述对象。用 所述非消耗性抗体开始治疗后，与治疗开始前对象显示的蛋白尿和/或活动性尿 沉淀水平相比，所述对象显示肾功能改善、蛋白尿减轻和/或活动性尿沉淀减轻。 例如，蛋白尿可降低至少25%、至少50%、至少75%或至少90%，或者蛋白 尿可降至低于l g/天或低于500 mg/天；蛋白质与肌酸酑之比可降低至少25% 或至少50%，或者该比例可降至低于1或低于0.5;和/或活动性尿沉淀可降低 至少25%、至少50%、至少75%或至少90%，或者在治疗开始后仅有活动性 尿沉淀。所述狼疮肾炎可以是i-vi级中的任何一种。例如，要治疗的狼疮
可以是n级狼疮肾炎、ni级狼疮肾炎、iv级狼疮肾炎或v级狼疮肾炎。 —实施方式中，治疗开始前，所述对象显示出蛋白尿高于500 mg/ 天、高于1000mg/天、高于2000 mg/天或高于3500 mg/天。 一实施方式中，用 所述抗体开始治疗后蛋白尿降低了例如至少25%、至少50%、至少75%或至少 90%，或降至低于lg/天或低于500 mg/天。 一实施方式中，用所述抗体开始治 疗后蛋白质与肌酸酐之比降低了例如至少25%或至少50%，或降至低于1或低 于0.5。
所述非消耗性cd4抗体可选自下组a)包含seq id no: 3所示轻 链氨基酸序列和seq id no: 6所示重链氨基酸序列的抗体；b)包含seq id no: 9所示轻链氨基酸序列和seq id no: 12所示重链氨基酸序列的抗体；c)' 包含seq id no: 15所示轻链氨基酸序列和seq id no: 18所示重链氨基酸序 列的抗体；d)包含seq id no: 21所示轻链氨基酸序列和seq id no: 24所示 重链氨基酸序列的抗体；e)包含a)、 b)、 c)或d)的抗体的cd4结合片段的抗 体；f)包含图1a所示轻链的cdr3(seqidn0:27)的抗体；g)包含图id所 示重链的cdr3 (seq id no: 30)的抗体；h)包含图ia所示轻链的cdri、 cdr2和cdr3 (seq id no: 25-27)的抗体；i)包含图id所示重链的cdrl 、 cdr2和cdr3(seqidno:28-30)的抗体；和j)包含图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3和图id所示重链的cdrl 、cdr2和cdr3 (seq id no: 25-30) 的抗体。类似地，所述抗体可以是与图l-4中任一所示抗体的相同表位结合的 cd4抗体。对于有关的，例如非消耗性抗体和至少一种第二化合物的任选组 合、抗体类型和/或等等而言，上述方法的基本上所有特征也适用于这些实施方 式。例如，在本发明的一个实施方式中，所述非消耗性cd4抗体任选为人源 化抗体，具有非糖基化的fc部分，不结合fc受体，包含改变clq结合和/或 依赖于补体的细胞毒性的氨基酸取代，包含补救受体结合表位，包含血清白蛋 白结合肽，和/或具有三个或多个抗原结合位点。某些实施方式中，所述抗体是 能够结合fcrn受体的抗-cd4变体抗体。 —类常规实施方式提供了治疗哺乳动物对象如人类对象的多发性 硬化症的方法。在该方法中，将治疗有效量的非消耗性cd4抗体和/或至少一 种第二化合物给予所述对象。例如，合适的第二化合物包括，但不限于，例如， 细胞毒剂；免疫抑制剂(例如，环磷酰胺)；b细胞表面标记拮抗剂；b细胞表 面标记的抗体；cd20抗体(例如，利妥昔单抗(rituximab)); cd5、 cd28或cd40 抗体或阻断剂；皮质激素(例如，泼尼松)、ctla4-ig、 a4-整联蛋白抗体如那他 珠单抗(natalizumab)(tysabi^)，霉酚酸酯，他汀，lfa-1或cd-lla抗体或阻断 齐ij，白介素-12抗体，卩干扰素(例如，干扰素(3-la如avonex 或rebif<^或干 扰素卩-lb如betaseron ),醋酸格拉默(glatiramer acetate)(c(3paxone )， cd52抗体如阿仑单抗(alemtuzuman)(campath )，白介素受体抗体如达珠单抗 (daclizumab)(zenapax ，白介素-2受体a亚基的抗体)，等等。相关类型的实施方式提供了治疗哺乳动物对象(例如，人类对象)某 病症的方法。所述病症可以是类风湿性关节炎、哮喘、银屑病、移植排斥、移 植物抗宿主病、多发性硬化、克罗恩病、溃疡性结肠炎、斯耶格伦综合征或其 他自身免疫性病症或疾病。在该方法中，将治疗有效量的非消耗性cd4抗体 和至少一种第二化合物的组合给予该对象。在一类实施方式中，所述第二化合 物是环磷酰胺、霉酚酸酯或ctla4-ig。对于有关的，例如抗体类型、第二化合物的类型和/或等等而言， 上述方法的基本上所有特征也适用于这些实施方式。例如，所述非消耗性cd4 抗体可选自下组a)包含seq id no: 3所示轻链氨基酸序列和seq id no: 6 所示重链氨基酸序列的抗体；b)包含seq id no: 9所示轻链氨基酸序列和 seq id no: 12所示重链氨基酸序列的抗体；c)包含seq id no: 15所示轻链 氨基酸序列和seqidno: 18所示重链氨基酸序列的抗体;d)包含seqidno: 21所示轻链氨基酸序列和seq id no: 24所示重链氨基酸序列的抗体；e)包 含a)、 b)、 c)或d)的抗体的cd4结合片段的抗体；f)包含图1a所示轻链的 cdr3 (seq id no: 27)的抗体；g)包含图id所示重链的cdr3 (seq id no: 30)的抗体；h)包含图la所示轻链的cdrl、cdr2和cdr3(seqidno:25-27) 的抗体；i)包含图id所示重链的cdr1、 cdr2和cdr3 (seq id no: 28-30) 的抗体；和j)包含图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3和图id所示重 链的cdr1、 cdr2和cdr3 (seq id no: 25-30)的抗体。类似地，所述抗体可 以是与图1-4中任一所示抗体的相同表位结合的cd4抗体。
附图简述图1a-1f显示了 trx1非消耗性cd4抗体一个实施方式的重链和 轻链的核苷酸和氨基酸序列。图ia显示了轻链的核苷酸(seq id no: l)和氨 基酸(seqidno:2)序列，以及cdr和构架区。图ib显示了轻链的核苷酸序 列(seq id no: 1)。图1c显示了有(seq id no: 2)和没有(seq id no: 3)前导 序列的轻链的氨基酸序列。图id显示了重链的核苷酸(seq id no: 4)和氨基酸(seqidno:5)序列，以及cdr和构架区。图ie显示了重链的核苷酸序列 (seq id no: 4)。图if显示了有(seq id no: 5)和没有(seq id no: 6)前导序 列的重链的氨基酸序列。图2a-2f显示了 trx1非消耗性cd4抗体一个实施方式的重链和 轻链的核苷酸和氨基酸序列。图2a显示了轻链的核苷酸(seqidno:7)和氨 基酸(seq id no: 8)序列，以及cdr和构架区。图2b显示了轻链的核苷酸 序列(seq id no: 7)。图2c显示了有(seq id no: 8)和没有(seq id no: 9)前 导序列的轻链的氨基酸序列。图2d显示了重链的核苷酸(seq id no: io)和 氨基酸(seqidno: ll)序列，以及cdr和构架区。图2e显示了重链的核苷 酸序列(seqidno: 10)。图2f显示了有(seq id no: ll)和没有(seq id no: 12) 前导序列的重链的氨基酸序列。图3a-3f显示了 trx1非消耗性cd4抗体一个实施方式的重链和 轻链的核苷酸和氨基酸序列。图3a显示了轻链的核苷酸(seqidno: 13)和 氨基酸(seqidno: 14)序列，以及cdr和构架区。图3b显示了轻链的核苷 酸序列(seq id no: 13)。图3c显示了有(seq id no: 14)和没有(seq id no: 15)前导序列的轻链的氨基酸序列。图3d显示了重链的核苷酸(seqidno: 16) 和氨基酸(seqidno: 17)序列，以及cdr和构架区。图3e显示了重链的核 苷酸序列(seqidno: 16)。图3f显示了有(seq id no: 17)和没有(seq id no: 18)前导序列的重链的氨基酸序列。图4a-4f显示了 trx1非消耗性cd4抗体一个实施方式的重链和 轻链的核苷酸和氨基酸序列。图4a显示了轻链的核苷酸(seqidno: 19)和 氨基酸(seqidno:20)序列，以及cdr和构架区。图4b显示了轻链的核苷 酸序列(seq id no: 19)。图4c显示了有(seq id no: 20)和没有(seq id no: 21)前导序列的轻链的氨基酸序列。图4d显示了重链的核苷酸(seqidno: 22) 和氨基酸(seqidno:23)序列，以及cdr和构架区。图4e显示了重链的核 苷酸序列(seq id no: 22)。图4f显示了有(seq id no: 23)和没有(seq id no: 24)前导序列的重链的氨基酸序列。图5为sle的nzbxw fl临床前功效模型中疾病进展随年龄变化 的示意图。
图6a-6f示意了对给予非消耗性cd4抗体的反应。图6a为时间 对进展(蛋白尿为300 mg/dl或死亡)的图示，图6b为存活百分数与治疗开始后 时间的函数，图6c为治疗5个月时的蛋白尿，图6d为平均血尿素氮与治疗 开始后时间的函数，在动物8个月大时开始治疗。图6e显示了时间对进展(蛋 白尿为300mg/dl)的关系，图6f显示了存活百分数与治疗开始后时间的函数， 在动物6个月大时开始治疗。图7a-7b为用非消耗性cd4抗体治疗能逆转严重性狼疮肾炎的图 示。图7a显示了在治疗后标示时间时蛋白尿〈300mg/dl的小鼠的百分比。图 7b显示了在治疗第一个月内从蛋白尿soo mg/dl中逆转的小鼠的百分比。图8a-8d为对给予非消耗性cd4抗体的反应的图示。图8a显示 了募集时的ds-dna抗体滴度，而图8b显示了治疗3个月后的滴度。图8c显 示了治疗3周后在脾脏中发现的cd4 cd69 细胞的数目。图8d显示了治疗3 周后在脾脏中发现的cd4 cd25 细胞的数目。图9a-9b显示了治疗6个月时蛋白尿的多重比较分析，图9a采用 环磷酰胺(cytoxar^)治疗组作为对照组，图9b采用cd4非消耗性抗体治疗组 作为对照组。图10为通过给作为ms临床前功效模型的sjl/j小鼠注射plp肽 而诱导的eae疾病进展随时间复发和消退的示意图。图11a-11b为对给予非消耗性cd4抗体的反应的图示。图11a为 对照抗体、醋酸格拉默(copaxon^)、 a-4整联蛋白抗体、ctla4-ig和非消耗 性cd4抗体治疗组的临床评分随时间变化的图示。图iib显示了这些组的平 均每日临床评分。图12a-12b为对给予非消耗性cd4抗体的反应的图示。图12a为 对照抗体、ctla4-ig和非消耗性cd4抗体治疗组的临床评分随时间变化的图 示。图12b显示了这些组的平均每日临床评分。图13a-13b为对给予非消耗性cd4抗体的反应的图示。图13a为 对照抗体、ctla4-ig和非消耗性cd4抗体治疗组的临床评分随时间变化的图 示。图13b显示了这些组的平均每日临床评分。图14展示了对照抗体或cd4抗体治疗的小鼠的脊髓切片，显示非消耗性cd4抗体治疗降低了 eae的脱髓鞘。图15显示了用对照抗体、非消耗性cd4抗体或ctla4-ig治疗的 动物每微升血液中ic0shicd4或ic0shicd8 t细胞的数目。图16比较了用非消耗性cd4抗体、消耗性(depleting)cd4抗体、 对照抗体、ctla4-ig或消耗性cd8抗体治疗髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白 (mog)-肽诱导eae的临床评分随时间变化情况。图17a-17b为对给予非消耗性cd4抗体的反应的图示。图17a显 示了在治疗后标示时刻蛋白尿<300 mg/dl的小鼠的百分比。图17b显示了从 蛋白尿2300 mg/dl中逆转的小鼠的百分比。图18a-18d为对治疗的反应的图示。图18a为时间和疾病进展(蛋 白尿300 mg/dl或死亡)的关系，图18b为用非消耗性cd4抗体和50 mg/kg/天 mmf的组合治疗的动物的存活百分数与治疗开始后时间的函数，用非消耗性 cd4抗体和25 mg/kg/天mmf的组合治疗的动物的时间与疾病进展以及存活 百分数的关系分别示于图18c和图18d。图19a-19b显示了治疗2个月时蛋白尿的多重比较分析，采用对 照抗体治疗组作为对照组。用每天50 mg/kg mmf(单独或与非消耗性cd4抗 体组合)治疗的组的结果示于图19a，而用每天25 mg/kg mmf治疗的组的结果 示于图19b。图20a-20i为对治疗的反应的图示。图中显示了用对照抗体、非消 耗性cd4抗体、标示剂量的mmf、或非消耗性cd4抗体和标示剂量的mmf 的组合治疗的动物的每微升血液中cd4 t细胞的数目(图20a)，每微升血液 中b2b细胞的数目(图20b)，每个脾中cd4 t细胞的数目(图20c)，每个脾 中b2 b细胞的数目(图20d), igm 浆细胞的数目(图20e)，同种型-转换浆细 胞的数目(图20f)，生发中心细胞的数目(图20g)，每个脾中浆细胞样树突细胞 的数目(图20h)，以及浆细胞样树突细胞的mhc ii表达水平(图201)。图21a-21b显示了人cd4的核酸和氨基酸序列。图21a显示了前 导序列被切除的成熟蛋白质的人cd4氨基酸序列。图21b显示了成熟的人cd4 dna序列。定义除非另有说明，这里使用的技术和科学术语和本发明所属技术领域 一般技术人员的通常理解有着相同的含义。以下定义对本领域的理解进行了补 充，涉及本申请但不归于任何相关或无关的情况，例如任何共有的专利或申请。 与文中的那些描述类似或等价的任何方法及材料都可用于实践测试本发明，文 中描述了非限制性的材料和方法。因此，文中采用的术语仅为了描述特定实施 方式而非限制性的。在本说明书和附加权利要求书中，单数形式"一个"包括复数指代， 文中另有明确说明除外。因此，例如，当提及"一个蛋白质"时包括多个蛋白质； 提及"一个细胞"时包括多个细胞，依此类推。"狼疮"在文中指涉及攻击结缔组织的抗体的自身免疫性疾病或病 症。狼疮的主要形式是系统性狼疮(sle)，该病也可累及皮肤。"狼疮"在文中 包括sle以及其他类型的狼疮(包括，例如，皮肤红斑狼疮(cle)、狼疮肾炎 (ln)、肾外狼疮、脑炎狼疮、儿科狼疮、非肾狼疮、盘状狼疮和脱发性狼疮)。"对象"在文中通常指人，但也可以是非人哺乳动物。示例性的非人 哺乳动物包括实验室动物、家养动物、宠物、竞技动物和家畜，如小鼠、猫、 狗、马和牛。通常，能够对所述对象进行治疗，例如治疗自身免疫性病症、组 织移植相关的治疗，等等。 一方面，能够对这种对象进行狼疮治疗。出于本文 的目的，这种符合条件的对象正经历或曾经历过一种或多种狼疮病征、症状或 其他标志或者已经被诊断出狼疮(例如，可以是新诊断出的，或是之前诊断出 又新发作是，或是慢性类固醇依赖性又新发作的，或是有患狼疮风险)。符合 狼疮治疗条件的对象可通过肾活检筛选和/或通过检测例如下述那些自身抗体 的试验筛选来鉴定，其中，自身抗体的产生被定性，优选定量评估。示例性的 sle相关自身抗体是抗-核抗体(ab)、抗-双链dna(dsdna)ab、抗-smab、抗 -核核糖核蛋白ab、抗-磷脂ab、抗-核糖体pab、抗-ro/ss-aab、抗-ro ab 和抗-laab。狼疮的诊断(以及确定治疗的适格性)可按照本领域已知方法进行。 例如，可按照美国风湿病学协会(acr)的标准来诊断sle。可由不列颠群岛狼 疮活动组织(bilag， british isles lupus activity group)的一个"a"标准或两个bilag "b"标准来定义活动性疾病，例如，如brunetta的题为"method for treating lupus(狼疮治疗方法)"的美国专利申请公开号2006/0024295所采用的标 准。tan等，(1982) "the 1982 revised criteria for the classification of sle(1982 年修订的sle分类标准)"arth rheum 25: 1271-1277采用的用来诊断sle的
一些病征、症状或其他标志可以是面颊疹如脸颊上的疹、盘状疹、或凸起的 红疹，光敏感性如对日光的反应(导致皮疹产生或恶化)，口腔溃疡如鼻或嘴中 的通常不痛的溃疡，关节炎如涉及两个或多个末稍关节的非糜烂性关节炎(关 节周围的骨骼未被破坏的关节炎)，桨膜炎，胸膜炎或心包炎，肾病如尿中有
过多蛋白质(蛋白尿，测试棉签显示高于0.5 g (克)/天或3 )和/或细胞管形 (cellular cast)(衍生自尿和/或白细胞和/或肾小管细胞的异常元件)，神经病学病 征、症状或其他标志，癫痫发作(抽搐)，和/或不存在药物时的精神病或已知能 造成这种影响的代谢紊乱，和血液学病征、症状或其他标志如溶血性贫血或白 细胞减少(每立方毫米的白血球计数低于4000个细胞)或淋巴细胞减少(每立方 毫米的淋巴细胞低于1500)或血小板减少(每立方毫米的血小板低于100000)。 在两种或多种情况下一定会检测到白细胞减少和淋巴细胞减少。在不存在已知 的诱导药物时一定会检测到血小板减少。本发明不限于狼疮的这些病征、症状 或其他标志。肾炎性狼疮发作可定义为1)l个月内scr增幅30。/。，或2)肾病 综合征复发或出现，或3)尿蛋白质增加3倍，即基线蛋白尿mg/24小时或如 美国专利申请公开号2006/0024295所述。对于狼疮肾炎，可通过按照美国专利 申请公开号2006/0024295所述的肾标准定义的肾炎发作来证实治疗适格性。狼疮肾炎可任选被诊断和分类为isn/whoi级、ii级、iii级、iv 级、v级或vi级狼疮肾炎，例如，如weening等(2004)在"the classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited(对系统性红斑狼搭 复发时肾小球肾炎的分类)"kidney international 65: 521-530中的描述。对象的"治疗"在文中指治疗性治疗以及预防性手段。需要治疗的对 象包括已患狼疮(或其他症状或自身免疫性病症如ms,类风湿性关节炎，或炎 性肠病)的对象以及需要预防狼疮(或其他病症)的对象。因此，对象可以已经被 诊断患有狼疮(或其他病症)或者倾向于或易于患狼疮(或其他病症)。
术语"缓解"在文中指减轻、减少或消除某状况、疾病、病症或表型， 包括异常或症状。疾病或病症(例如，狼疮)的"症状"指对象所经历的并指示疾病的任 何病态现象或者结构、功能或感觉偏离正常。表述"治疗有效量"指有效预防、缓解或治疗疾病或病症(例如，狼 疮，ms，类风湿性关节炎，或炎性肠病)的量。例如，抗体的"治疗有效量"指 能有效预防、缓解或治疗特定疾病或病症的抗体量。类似地，抗体和第二化合 物的组合的"治疗有效量"指当组合时能有效预防、缓解或治疗特定疾病或病症 的抗体量和第二化合物量。应理解，两种化合物的"组合"并不是指这两种化合物要彼此混合地 给予。因此，利用或采用这种组合治疗包括给予各化合物的混合物或单独给予 各化合物，包括在同一天或不同天给予。因此，术语"组合"是指单独或彼此混 合地用两种或多种化合物来治疗。例如当将抗体和第二化合物组合给予对象 时，对象体内存在抗体之时第二化合物也可存在于对象中，无论所述抗体和第 二化合物是单独或混合给予该对象。 cd4抗原或"cd4"是一种在t淋巴细胞以及某些其他细胞表面表达 的糖蛋白。cd4在文献中的其他名称包括分化蔟4和l3t4。 cd4描述于，例 如，万维网www.ncbi.nlm.nih.gov/omim上人类数据库(man database)的在线孟 德尔遗传(online mendelian inheritance)中的186940条目。 "cd4抗体"是以足够的亲和力和特异性结合cd4的抗体。例如， 任选地，该抗体结合cd4的亲和力和特异性与trx1抗体对cd4的结合亲和 力和特异性相当或基本类似。文中，"cd4抗体"、"抗-cd4抗体"和"抗-cd4" 是等价术语并可替换使用。"非消耗性cd4抗体"消耗少于50q/。 cd4 细胞，优选低于25% cd4 细胞，最优选低于10% cd4 细胞的cd4抗体。相反，"消耗性cd4抗体"是 消耗50%或更多cd4 细胞，或者甚至75%或更多或这90%或更多cd4 细胞 的cd4抗体。cd4 细胞的消耗(例如，抗体治疗对象中循环cd4 细胞水平的 降低)可通过各种机制获得，如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性，依赖于补体 的细胞毒性，t细胞增殖的抑制，和/或t细胞死亡的诱导。
术语"抗体"在文中以最广泛含义使用，具体包括单克隆抗体、多克 隆抗体、由至少两个完整抗体形成的多特异性抗体(例如双特异抗体)、嵌合抗
体、人抗体、以及显示出所需生物活性(例如，cd4结合)的抗体片段。抗体是
包含基本上或部分由免疫球蛋白基因或免疫球蛋白基因片段编码的一种或多
种多肽的蛋白质。已知的免疫球蛋白基因包括k、 x、 a、 y、 5、 e和p恒定区 基因，以及无数免疫球蛋白可变区基因。"抗体片段"包含完整抗体的一部分，优选包含其抗原结合区。抗体 片段的例子包括fab、 fab'、 f(ab')2和fv片段；双特异抗体；线性抗体；单链 抗体分子；和由抗体片段形成的多特异性抗体。"完整抗体"是包含重链-和轻链-可变结构域以及fc区的抗体。
"天然抗体"通常是由两个相同轻(l)链和两个相同重(h)链构成的约 150,000道尔顿的异四聚(heterotetrameric)糖蛋白。各轻链通过一个共价二硫键 与重链相连，而不同免疫球蛋白同种型重链之间的二硫键数目不同。各重链和 轻链还具有规则隔开的链内二硫桥。各重链的一端为可变结构域(vh)，接着多 个恒定结构域。各轻链的一端为可变结构域(vl)，另一端为恒定结构域；轻链 的恒定结构域与重链的第一个恒定结构域对齐，同时轻链可变结构域与重链的 可变结构域对齐。据信，特定氨基酸残基形成了轻链和重链可变结构域之间的 界面。术语"可变"指可变结构域某些部分的序列在抗体之间变化很大并 可用于各特定抗体与其特定抗原的结合和特异性这一事实。然而，可变性在抗 体的可变结构域中不是均匀分布的。它集中于轻链和重链可变结构域中称为超 变区的三个区段。可变结构域更保守的部分称为构架区(fr)。天然重链和轻链 的可变结构域各包含通过三个超变区(形成连接(3-片层结构的环，而在某些情 况下形成部分(3-片层结构)相连的四个fr(多采取p-片层构型)。各链中的超变 区通过fr紧密结合在一起，并与其他链的超变区结合，形成抗体的抗原结合 位点(参见kabat等，sequences of proteins of immunological interest(感兴趣的免 疫蛋白的序列)，第五版，public health service, national institutes of health(国 立卫生研究院公众健康服务部)，bethesda(贝思达)，md.(马里兰州)(1991))。恒 定结构域不直接参与抗体与抗原的结合，但显示出各种效应物功能，如抗体参与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性。木瓜蛋白酶消化抗体产生两个相同的抗原-结合片段，称为"fab"片 段，它们各自具有一个抗原结合位点，和剩下的"fc"片段，这个名称反映出它 易于结晶。胃蛋白酶处理产生f(ab')2片段，该片段具有两个抗原结合位点并能 够与抗原交联。 "fv"是含有完整抗原识别和抗原结合位点的最小抗体片段。该区域 由紧密、非共价连接的一个重链和一个轻链可变结构域的二聚体构成。在这种 构型中，各可变结构域的三个超变区相互作用从而在vh-vl二聚体表面形成抗 原结合位点。总之，六个超变区赋予抗体了抗原结合特异性。然而，即便是一 个可变结构域(或仅包含三个抗原特异性的超变区的半个fv)也能够识别并结 合抗原，尽管其亲和力低于完整的结合位点。 fab片段还含有轻链的恒定结构域和重链的第一个恒定结构域 (ch1)。 fab'片段与fab片段的不同之处在于在重链ch1结构域的羧基末端加 入了若干残基，其中包括抗体绞链区的一个或多个半胱氨酸。fab'-sh在文中 被称为fab'，其中恒定结构域的半胱氨酸残基带有至少一个游离巯基。f(ab')2 抗体片段最初由一对fab'片段形成，它们之间具有绞链半胱氨酸。抗体片段的 其他化学偶联也是已知的。有关其他抗体片段的详细描述可参见，例如， fundamental immunology(基础免疫学)，w.e. paul编，raven press(雷芬出版社)， n.y. (1999)。尽管各种抗体片段是通过消化完整抗体来定义的，但技术人员将了 解，也可通过化学方法或利用重组dna法从头合成这些片段。因此，术语"抗 体"在文中包括通过修饰完整抗体或利用重组dna法从头合成而产生的抗体 或其片段。任何脊椎动物抗体(免疫球蛋白)的"轻链"可根据它们恒定结构域的 氨基酸序列指定为两种可明确区分的类型，称为k和x，中的一种。根据重链恒定结构域的氨基酸序列可将抗体分为不同种类。完整抗 体主要有五类iga、 igd、 ige、 igg和igm，其中一些可进一步分成亚类(同 种型)，例如iggl、 igg2、 igg3、 igg4、 iga和iga2。对应于不同抗体种类的 重链恒定结构域分别称为a、 5、 s、 y和p。不同种类免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是熟知的。"单链fv"或"scfv"抗体片段包含抗体的vh和vl结构域，其中，这 些结构域存在于单个多肽链中。优选地，fv多肽在vh和v^结构域之间还包 含多肽接头，这使得scfv能够形成结合抗原所需的结构。scfv的综述可参见 rosenburg禾q moore编的the pharmacology of monoclonal antibodies(单克隆抗 体药理学)，第113巻，springer-verlag，纽约(1994)'第269-315页中pluckthun 的论述。术语"双特异抗体"指具有两个抗原结合位点的小抗体片段，该片段
在同一多肽链中包含与轻链可变结构域(vl)相连的重链可变结构域(vh)
(vh-vl)。通过使用短到不能在同一链的两个结构域之间形成配对的接头，该 结构域被迫与另一链的互补结构域配对并形成两个抗原结合位点。双特异抗体 更加完整描述于，例如，ep 404097; wo 1993/11161;和hollinger等，proc. natl. acad. sci. usa， 90: 6444-6448 (1993)。术语"单克隆抗体"在文中指从基本均质的抗体群获得的抗体，即构 成该群体的各抗体相同和/或结合相同表位，但在制备单克隆抗体时可能产生变 体，这种变体通常以最小量存在。与多克隆抗体制品(通常包括针对不同决定 子(表位)的不同抗体)不同，各单克隆抗体只针对抗原上的一个决定子。除了它 们的特异性，单克隆抗体的优点在于，它们污染有其他免疫球蛋白。修饰语"单 克隆"表明该抗体的特征是从基本均质的抗体群获得的，但不能解释为需要通 过任何特定方法制备这种抗体。例如，本发明使用的单克隆抗体可通过最早由 kohler等，nature, 256: 495 (1975)描述的杂交瘤法制造，或者可通过重组dna 法制造(参见，例如，美国专利号4816567)。"单克隆抗体，，也可采用例如clackson 等，nature, 352: 624-628 (1991 )和marks等，j. mol.biol.， 222: 581-597 (1991) 描述的技术从噬菌体抗体文库分离。这里所述的单克隆抗体具体包括"嵌合"抗体(免疫球蛋白)，其中一 部分重链和/或轻链与衍生自特定种类或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的 相应序列相同或同源，但链的其余部分与衍生自另一种类或属于另一抗体类别 或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及包括这种抗体的片段，只要它们 显示出所需生物活性(美国专利号4816567; morrison等，proc. natl. acad. sci.usa， 81: 6851-6855 (1984))。文中，感兴趣的嵌合抗体包括"灵长类化 (primatized)"抗体，其包含衍生自非人灵长类(例如旧世界猴，如狒狒、恒河猴 或猕猴)的可变结构域抗原结合序列和人恒定区序列(美国专利号5693780)。非人(例如，鼠科)抗体的"人源化"形式属于嵌合抗体，它含有极少 衍生自非人免疫球蛋白的序列。人源化抗体的大部分是人免疫球蛋白(受者抗 体)，其中受者超变区的残基被非人种类(供者抗体)如小鼠、大鼠、兔或具有所 需特异性、亲和力和能力的非人灵长类超变区的残基替代。 一些情况中，人免 疫球蛋白的构架区(fr)残基被相应的非人残基替代。此外，人源化抗体可包含 未在受者抗体或供者抗体中发现的残基。作出这些修饰进一步优化抗体性能。 通常，人源化抗体将包含基本上所有或者至少一个、通常为两个可变结构域， 其中所有或基本上所有的超变环对应于非人免疫球蛋白的超变环，所有或基本 上所有的fr是人免疫球蛋白序列的fr，但上述fr取代除外。人源化抗体还 任选包含至少一部分免疫球蛋白恒定区，通常是人免疫球蛋白恒定区。更详细 描述可见jones等，nature 321: 522-525 (1986); riechmann等，nature 332: 323-329 (1988);禾卩presta， curr. op. struct. biol. 2: 593-596 (1992)。术语"超变区"当用于本文时是指负责抗原结合的抗体的氨基酸残 基。超变区包含来自"互补决定区"或"cdr"的氨基酸残基(参见，例如，kabat 等，s叫uences of proteins of immunological interest(感兴趣的免疫蛋白的序列)， 第五版，public health service, national institutes of health(国立卫生研究院公 众健康服务部)，bethesda(贝思达)，md.(马里兰州)(1991))和/或来自"超变环" 的那些残基(参见，例如，chothia和lesk j. mol. biol. 196: 901-917 (1987))。"构 架"或"fr"残基是除文中所定义的超变区残基之外的那些可变结构域残基。术语'tc受体"和"fer"用来描述结合抗体fc区的受体。fcr的综述 见ravetch和kinet (1991) annu. rev. immunol 9: 457-92; capel等，(1994) immunomethods 4: 25-34;和de haas等，(1995) j. lab. clin. med. 126: 330-41。 其他fcr,包括未来鉴定的那些，也包括在本文所用术语"fcr"当中。该术语 还包括新生儿受体，fcrn，其负责将母体的igg转移给胎儿(guyer等，(1976) j. immunol. 117: 587和kim等，(1994) j. immunol, 24: 249)。抗体的"cd4结合片段"是保留结合cd4的能力的抗体片段。如上所述，该片段是任选通过消化完整抗体或从头合成产生的。
"表位"是抗原分子上结合抗体的特定区域。短语"基本类似"或"基本相同"在文中指两个数值(通常一个与本发 明抗体有关，另一个与参比/比较抗体有关)之间的相似度足够高，因而就通过
所述值(例如，kd值)测得的生物学特征而言，本领域技术人员认为这两个值在
生物学和/或统计学意义上的差异极小或没有。作为参比/比较抗体的值的函数，
所述两个值之间的差异优选低于约50%，优选低于约40%，优选低于约30%， 优选低于约20%，优选低于约10%。"结合亲和力"通常指分子(例如，抗体)的单个结合位点与其结合伴 侣(例如，抗原)之间非共价相互作用总和的强度。除非另有说明，文中，"结合 亲和力"指内在结合亲和力，它反应了结合对(例如，抗体和抗原)成员之间的 l:l相互作用。分子x对其伴侣y的亲和力通常用解离常数(kd)表示。亲和力 可通过本领域已知的常规方法测定，其中包括本文所述的那些方法。低亲和力 抗体通常缓慢结合抗原并有易于解离的趋势，而高亲和力抗体通常较快结合抗 原并有保持长期结合的趋势。测量结合亲和力的各种方法是本领域已知的，其 中的任何一种都可用于本发明的目的。具体的示例性实施方式在下文中描述。 —实施方式中，本发明的"kd"或"kd值"是通过放射性标记的抗原 结合试验(ria)采用感兴趣抗体的fab形式及其抗原测定的，该试验按下述试 验描述进行在存在未标记抗原的滴定系列时用最小浓度的[125i]-标记的抗原 平衡fab，然后用抗-fab抗体-包被的平板捕获结合的抗原来检测fab对抗原的 分辨结合亲和力(solution binding affmity)(chen等，(1999) j. mol biol 293: 865-881)。为建立试验条件，用50 mm碳酸钠(ph 9.6)配制的5 ug/ml捕获抗-fab 抗体(cappel labs)包被微滴定板(dynex)过夜，随后用pbs配制的2。/。 (w/v)牛 血清白蛋白在室温(约23°〇)封闭2-5小时。在非吸附平板(nunc #269620)上混 合100 pm或26 pm [1251]-抗原和感兴趣fab的连续稀释液(例如，与presta等， (1997) cancer res. 57: 4593-4599中抗-vegf抗体、fab-12的评估一致)。然后 将感兴趣的fab培育过夜；然而可以继续培育较长时间(例如，65小对)以确保 达到平衡。之后，将混合物转移到捕获平板室温培育(例如，培育1小时)。然 后除去溶液并用pbs配制的0.1% tween-20将平板洗涤8次。将平板晾干之后加入150 ul/孔闪烁体(microscint -20; packard),用topcount y记数仪 (packard)计数平板10分钟。选择获得低于或等于最大结合的20%的各fab浓 度进行竞争性结合试验。根据另一个实施方式，kd或kd值是采用表面等离振 子共振试验测定的，测定在25。c进行，使用biacore -2000或biacore -3000 (biacore， inc.,皮斯卡塔韦(piscataway)，纽约州)及固定抗原cm5芯片，反 应单位(ru)约为10。简言之，根据供应商的说明用n-乙基-n，-(3-二甲基氨基 丙基)-碳二亚胺盐酸盐(edc)和n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)活化羧甲基化的葡聚 糖生物传感器芯片(cm5， biacore inc.)。抗原用10mm乙酸钠，ph 4.8稀释 至5ug/ml (约0.2um)，然后以5ul/分的流速注射以获得约10个偶联蛋白的反应 单位(ru)。注射抗原之后注入1m乙醇胺以封闭未反应的基团。动力学测量时， 25。c时以约25ul/分的流速将fab的两倍连续稀释液(0.78 nm-500 nm)注射入含 0.05% tween 20 (pbst)的pbs中。用简单的一对一 langmuir结合模型 (biacore⑧评价软件，版本3.2)通过同时拟合结合或解离sensorgram来计算结合 速率(kon)和解离速率(koff)。平衡解离常数(kd)计算为koff/kon比值。参见，例 如，chen等，(1999) j. mol biol 293: 865-881。如果通过上述表面等离振子共 振试验计算出的结合速率超过106 m—1 s"，则可采用荧光猝灭技术测定结合速 率，该技术利用光度计测量25'c，存在浓度渐升的抗原时pbs(ph 7.2)配制的 20nm抗-抗原抗体(fab形式)的荧光发射强度增加或降低(激发=295 nm;发射 =340 nm， 16 nm带通)，所述分光计如装有截流装置的分光光度计(aviv instruments)或具有搅拌比色皿的8000系列slm-aminco 分光光度计 (thermospectronic)。"氨基酸序列"是氨基酸残基的聚合物(蛋白质、多肽等)或代表氨基 酸聚合物的字符串，根据上下文而定。术语"免疫抑制剂"在文中指治疗时是指用来抑制或掩蔽被治疗的 哺乳动物的免疫系统的物质。它包括抑制细胞因子产生、下调或抑制自身抗原 表达或掩蔽mhc抗原的物质。这种试剂的例子包括2-氨基-6-芳基-5-取代的嘧 啶(参见美国专利号4665077);非甾类抗炎药(nsaid);更昔洛韦，他克莫司， 糖皮质激素类如考的松或醛固酮，抗炎剂如环加氧酶抑制剂，5-脂肪氧化酶抑 帝ij剂，或白三烯受体拮抗剂；嘌呤拮抗剂如硝基咪唑硫嘌呤或霉酚酸酯(mmf);烷化剂如环磷酰胺；溴隐亭；达那唑；氨苯砜；戊二醛(掩蔽mhc抗原，如美 国专利号4120649所述)；mhc抗原和mhc片段的抗-独特型抗体；环孢菌素 a;类固醇如皮质激素或糖皮质激素或糖皮质激素类似物，例如，泼尼松，甲 泼尼龙和地塞米松；二氢叶酸还原酶抑制剂如氨甲喋呤(口服或皮下)；羟氯替 平(hydroxycloroquine);柳氮磺吡啶；来氟米特；细胞因子或细胞因子受体抗体 包括抗-干扰素-a， -|3，或-y抗体，抗-肿瘤坏死因子-a抗体(英夫利昔单抗或阿 达木单抗)，抗-tnf-a免疫粘附素(依那西普)，抗-肿瘤坏死因子-|3抗体，抗-白介素-2抗体和抗-il-2受体抗体；抗-lfa-l抗体，包括抗-cdlla和抗-cd18 抗体；异源抗-淋巴细胞球蛋白；泛-t抗体，优选抗-cd3;含lfa-3结合结构 域的可溶性肽(1990/7/26公布的wo 1990/08187);链激酶；tgf-(3;链道酶； 宿主的rna或dna; fk506; rs-61443;脱氧精胍菌素；雷帕霉素；t细胞 受体(cohen等，美国专利号5114721); t细胞-受体片段(offner等，science, 251: 430-432 (1991); wo 1990/11294; ianeway， nature, 341: 482 (1989); 和wo 1991/01133);和t细胞-受体抗体(ep340109)如t10b9。术语"细胞毒剂"在文中指抑制或防止细胞功能和/或造成细胞破坏 的物质。该术语包括放射性同位素(例如at211、 i131、 i125、 y9q、 re186、 re188、 sm153、 bi212、 p^和lu的放射性同位素)，化疗剂，以及细菌、真菌、植物或 动物来源的毒素如小分子毒素或酶活性毒素，或其片段。"化疗剂"是通常用于治疗癌症的化合物。化疗剂的例子包括垸化 剂如塞替派和cytoxan 环磷酰胺；烷基磺酸盐如白消安，英丙舒凡，和哌 泊舒凡；氮丙啶如苯并多巴(benzodopa)，卡波醌，美妥替哌(meturedopa)，和 乌瑞替派(uredopa);氮杂环丙烷和亚甲基蜜胺(methylamelamine)包括六甲密胺， 三亚胺嗪，三亚乙基磷酰胺(trietylenephosphoramide)，三亚乙基硫代磷酰胺 (triethiylenethiophosphoramide)禾口三羟基甲蜜胺(trimethylolomelamine); 多聚乙 酰(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone));喜树碱(包括合成 类似物托泊替康)；苔藓抑素；卡利他汀(callystatin); cc-1065 (包括其阿多来 新，卡折来新，和比折来新合成类似物)；隐藻素(cryptophycins)(尤其是隐藻素 1和隐藻素8);多拉司他汀；多卡霉素(duocarmycin)(包括合成类似物，kw-2189 和cb1-tm1);软珊瑚醇；水鬼蕉碱(pancratistatin);萨科迪汀(sarcodictyin);海绵抑制素(spongistatin);氮芥如苯丁酸氮芥，萘氮芥，胆汁磷酰胺 (cholophosphamide)，雌莫司汀，异环磷酰胺，双氯乙基甲胺，盐酸氧化双氯乙 基甲胺，美法仑，新氮芥，苯芥胆甾醇，泼尼莫司汀，氯乙环磷酰胺，尿嘧啶 氮芥；亚硝基脲(nitrosureas)如卡莫司汀，氯脲菌素，福莫司汀，洛莫司汀， 尼莫司汀，和雷莫司汀；抗生素如烯二炔类抗生素(enediyne antibiotics)(例如， 剌孢霉素，尤其是刺孢霉素y1i和剌孢霉素coll (参见，例如，agnew， chem intl. ed. engl.， 33: 183-186 (1994));蒽环类抗生素，包括蒽环类抗生素a; 二膦 酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素(esperamicin);以及新制癌菌素生色团和相 关色蛋白烯二炔类抗生素生色团，阿克拉霉素(aclacinomysin)，放线菌素，奥 斯米星(authramycin)，偶氮丝氨酸，博来霉素，放线菌素c，卡柔比星(carabicin)， 洋红霉素，嗜癌霉素，色霉素(chromomycinis)，放线菌素d，柔红霉素，地托 比星，6-重氮-5-氧-l-正亮氨酸，adriamycns^阿霉素(包括吗啉代-阿霉素， 氰基吗啉代-阿霉素，2-吡咯啉代(pyrrolino)-阿霉素，和脱氧阿霉素)，表柔比星， 依索比星，伊达比星，麻西罗霉素，丝裂霉素如丝裂霉素c，霉酚酸，诺拉霉 素，橄榄霉素，培洛霉素，泊非霉素(potfiromycin)，嘌呤霉素，三铁阿霉素， 罗多比星，链黑菌素，链唑霉素，块菌素，乌苯美司，净司他丁，佐柔比星； 抗-代谢药如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-fu);叶酸类似物如二甲叶酸，氨甲喋呤， 蝶罗呤，三甲曲沙；嘌呤类似物如氟达拉滨，6-巯嘌呤，硫咪嘌呤，硫鸟嘌呤； 嘧啶类似物如安西他滨，氮杂胞苷，6-氮尿苷，卡莫氟，阿糖胞苷，双脱氧尿 苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿苷，依诺他滨，氟尿苷；雄激素类如卡普睾酮， 丙酸屈他雄酮，环硫雄醇，美雄垸，睾内酯；抗-肾上腺素和氨鲁米特，米托 坦，曲洛司坦；叶酸补充剂如亚叶酸(frolinic acid);乙酰葡醛酸内酯；醛磷酰 胺糖苷(aldophosphamideglycoside);氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；倍曲 比新(bestmbudl);比生群；依达曲沙；地磷酰胺；地美可辛；地吖醌；依弗米 星(dformithine);依利醋铵(elliptinium acetate);埃博霉素(epothilone);依托格 鲁；硝酸镓；羟基脲;磨茹多糖；氯尼达明；美登醇类如美登素和安丝菌素； 米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇(mopidanmol);根瘤菌剂；喷司他丁；蛋氨氮 芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基肼；丙卡巴肼；psk⑧多糖复合物(jhs 天然产物公司(jhs natural products),尤金市，俄勒冈州)；雷佐生；根霉素；西佐喃；锗螺胺；细格孢氮杂酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯乙胺；单端孢霉烯族 毒素类(尤其是t-2毒素，粘液霉素(verracurin) a，杆孢菌素a和安概丁 (anguidine));乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴 卫矛醇；哌泊溴垸；盖托星(gacytosine);阿糖胞苷("ara-c");环磷酰胺；塞替 派；紫杉垸，例如，taxoi^紫杉醇(布里斯托-美时施贵宝肿瘤学公司 (bristol-myers squibb oncology),普林斯顿，纽约州)，abraxantm不含克列 莫佛，紫杉醇的白蛋白工程化毫微粒制剂(美国药物伴侣公司(american pharmaceutical partners),山姆堡(schaumberg)，伊利诺伊州)，禾卩taxotere 多烯紫杉醇(rpr公司(rhone-poulencrorer)，安东尼(antony)，法国)；瘤可宁 (chloranbucil); gemzar②吉西他滨；6-硫代鸟嘌呤；巯嘌呤；氨甲喋呤；钼类 似物如顺铂和卡铂；长春碱；钼；依托泊苷(vp-16);异环磷酰胺；米托蒽醌； 长春新碱；navelbine 长春瑞滨；诺消灵；替尼泊苷；依达曲沙；柔红霉素； 氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；cpt-11;拓扑异构酶抑制剂rfs 2000; 二 氟甲基鸟氨酸(difluorometlhylornkhine) (dmfo);类视黄醇如维甲酸；卡培他 滨；和上述任何一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。该定义还包括调节或抑制激素作用的抗-激素剂，如抗-雌激素类和 选择性雌激素受体调节剂(serm)，包括，例如，他莫昔芬(包括nolvadex 他莫昔芬)，雷洛昔芬，屈洛昔芬，4-羟泰米芬，曲沃昔芬，雷洛昔芬(keoxifene)， lyi17018，奥那司酮，和fareston 托瑞米芬；抑制芳香酶的芳香酶抑制剂， 它能调节肾上腺中雌激素的产生，例如有4(5)-咪唑，氨鲁米特，megase⑧醋 酸甲地孕酮，aromasin②依西美坦，福美斯坦(formestanie)，法倔唑，rivisor 伏氯唑，femara⑧来曲唑和arimidex⑧阿那曲唑；和抗-雄激素如氟他胺， 尼鲁米特，比卡鲁胺，亮丙瑞林，和戈舍瑞林；以及曲沙他滨(l,3-二氧戊烷核 苷胞嘧啶类似物)；反义寡核苷酸，尤其是那些抑制涉及异常细胞增殖的信号 传导途径中基因表达的反义寡核苷酸，如pkc-a， raf，和h-ras;疫苗如基 因疗法疫苗，例如，allovectin⑧疫苗，leuvectin⑧疫苗，和vaxid⑧疫 苗；proleukin ril-2; lurtotecan⑧拓扑异构酶1抑制剂；abarelix rmrh;和上述任何一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。术语"细胞因子"是由一种细胞群释放的作为胞间介质作用于其他细胞的蛋白质。这种细胞因子的例子有淋巴因子，单核因子；白介素(il)如 il-1， il-la， il-2， il-3， il-4， il-5， il-6， il-7， il-8， il-9， il-ll， il-12, il-15;肿瘤坏死因子如tnf-a或tof-(3;和其他多肽因子包括lif和kit配体 (kl)。文中，术语细胞因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质 以及天然序列细胞因子的生物活性等价物，包括合成制得的小分子实体及其药 学上可接受的衍生物和盐。术语"激素"指通常由具有导管的腺器官分泌的多肽激素。激素包 括，例如，生长激素如人生长激素，n-甲硫氨酰人生长激素，和牛生长激素； 甲状旁腺激素；甲状腺素；胰岛素；胰岛素原；松弛素；松弛素原(prorelaxin); 糖蛋白激素如促卵泡激素(fsh)，促甲状腺激素(tsh)，和黄体化激素(lh); 促乳素，胎盘催乳激素，小鼠绒促性素相关肽，抑制素；激活素；米勒管抑制 物；和血小板生成素。在文中，术语激素包括来自天然来源或来自重组细胞培 养物的蛋白质以及天然序列激素的生物活性等价物，包括合成制得的小分子实 体及其药学上可接受的衍生物和盐。术语"生长因子"指促进生长的蛋白质，其包括，例如，肝生长因子； 成纤维细胞生长因子；血管内皮生长因子；神经生长因子如ngf-(3;血小板衍 生生长因子；转化生长因子(tgf)如tgf-a和tgf-p;胰岛素样生长因子-i和 -ii;红细胞生成素(epo);骨诱导性因子；干扰素如干扰素-a、 -(3和-y;和集落 刺激因子(csf)如巨噬细胞-csf(m-csf);粒细胞巨噬细胞-csf(gm-csf);和 粒细胞-csf(g-csf)。文中，术语生长因子包括来自天然来源或来自重组细胞 培养物的蛋白质以及天然序列生长因子的生物活性等价物，包括合成制得的小 分子实体及其药学上可接受的衍生物和盐。出于本文的目的，"肿瘤坏死因子-a(tnf-a)"指人tnf-a分子，其 包含pennica等，nature, 312: 721 (1984)或aggarwal等，jbc， 260: 2345 (1985)
所述的氨基酸序列。 "tnf-a抑制剂"在文中指一般通过结合tnf-a并中和其活性从而在 一定程度上抑制tnf-a的生物学功能的试剂。tnf抑制剂的例子在文中具体 包括依那西普(enbrel )，英夫利昔单抗(remicade )和阿达木单抗 (humiratm)。
"非甾类抗炎药，，或"nsaid"的例子有乙酰水杨酸，布洛芬，萘普生， 吲哚美辛，舒林酸，托美汀，包括其盐或衍生物等。术语"整联蛋白"指允许细胞结合和响应胞外基质并参与伤口愈合、 细胞分化、肿瘤细胞归巢和细胞凋亡等各种细胞功能的受体蛋白。它们是参与 细胞-胞外基质和细胞-细胞相互作用的细胞粘附受体大家族的一部分。功能性 整联蛋白由非共价结合的称为ot和(3的两个跨膜糖蛋白亚基构成。(x亚基彼此 均有一定同源性，p亚基亦是如此。受体总含有一条a链和一条p链。例子包 括ct6131， a3(31， a7pi， lfa-1等。在文中，术语整联蛋白包括来自天然来源或 来自重组细胞培养物的蛋白质以及天然序列整联蛋白的生物活性等价物，包括 合成制得的小分子实体及其药学上可接受的衍生物和盐。"(x4-整联蛋白"是在除 中性白细胞之外的白细胞表面表达的a4-(31和a4-|37整联蛋白的a4亚基。"整联蛋白拮抗剂或抗体"的例子在文中包括lfa-1抗体，如购自基 因技术公司(genentech)的依法利珠单抗(efalizumab) (raptiva ),或a4整联蛋 白抗体(例如，"a4-整联蛋白抗体"是结合cx4-整联蛋白的抗体)如购自拜尔金公 司(biogen)的那他珠单抗(tysabri )，或二氮杂环苯丙氨酸衍生物(wo 2003/89410)，苯丙氨酸衍生物(wo 2003/70709， wo 2002/28830， wo 2002/16329和wo 2003/53926)，苯基丙酸衍生物(wo 2003/10135)，烯胺衍生 物(wo 2001/79173)，丙酸衍生物(wo 2000/37444)，链烷酸衍生物(wo 2000/32575)，取代的苯基衍生物(美国专利号6677339和6348463)，芳香胺衍 生物(美国专利号6369229)， adam解聚素结构域多肽(us 2002/0042368)， avp3 整联蛋白抗体(ep 633945)，氮杂-桥二环氨基酸衍生物(wo 2002/02556)，等等。"皮质激素"指一些具有甾类的通用化学结构、能够模拟或增强天然 产生的皮质激素的作用的合成或天然产生的物质中的任何一种。合成皮质激素 的例子包括泼尼松，泼尼松龙(包括甲泼尼龙)，地塞米松曲安西龙，和倍他米 松。 "b细胞表面标记"或"b细胞表面抗原"在文中指在b细胞表面表达 的、能够被与其结合的桔抗剂寻耙的抗原。示例性的b细胞表面标记包括 cdio， cd19, cd20， cd21， cd22, cd23， cd24， cd37， cd40， cd53, cd72， cd73， cd74， cdw75， cdw76， cd77， cdw78， cd79a， cd79b，cd80, cd81， cd82， cd83, cdw84， cd85，和cd86白细胞表面标记(有关 描述可参见the leukocyte antigen facts book(白细胞抗原事实丛书)，第二版， 1997， barclay等编，学术出版社(academic press), hb公司(harcourt brace & co.),纽约)。其他b细胞表面标记包括rp105, fcrh2， b细胞cr2， ccr6， p2x5， hla-dob， cxcr5， fcer2， br3， btig， nag14， slgc16270， fcrhl， irta2， atwd578， fcrh3， irta1, fcrh6， bcma，和239287。特别感兴 趣的b细胞表面标记是相比哺乳动物的其他非b细胞组织优先在b细胞上表 达、并可在b细胞前体和成熟b细胞上表达的标记。"结合b细胞表面标记的抗体"是在与b细胞表面标记结合后能破坏 或消耗哺乳动物体内的b细胞和/或干扰一种或多种b细胞功能的分子，例如， 通过减弱或防止b细胞引起的体液反应。所述抗体优选能够消耗用其处理的哺 乳动物体内的b细胞(即降低循环b细胞水平)。这种消耗可通过各种机制实现， 如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)和/或依赖于补体的细胞毒性 (cdc)、抑制b细胞增殖，和/或诱导b细胞死亡(例如通过细胞凋亡)。"拮抗剂"指能够中和、阻断、抑制、消除、降低或干扰具体或特定 蛋白质活性的分子，所述活性包括以配体为例其与一种或多种受体的结合或者 以受体为例其与一种或多种配体的结合。拮抗剂包括抗体及其抗原-结合片段， 蛋白质，肽，糖蛋白，糖肽，糖脂，多糖，寡糖，核酸，生物有机分子，肽模 拟物，药物制剂以及它们的代谢物，转录和翻译控制序列，等等。拮抗剂还包 括蛋白质的小分子抑制剂，以及特异性结合蛋白质从而阻断其与其靶标结合的 融合蛋白、受体分子和衍生物，蛋白质的拮抗剂变体，蛋白质的反义分子，rna 适体，以及针对蛋白质的核酶。 "b细胞表面标记拮抗剂"是在与b细胞表面标记结合后能破坏或消 耗哺乳动物体内的b细胞和/或干扰一种或多种b细胞功能的分子，例如，通 过减弱或防止b细胞引起的体液反应。所述拮抗剂优选能够消耗用其处理的哺 乳动物体内的b细胞(即降低循环b细胞水平)。这种消耗可通过各种机制实现， 如adcc和/或cdc、抑制b细胞增殖，和/或诱导b细胞死亡(例如通过细胞 凋亡)。本发明范围内的拮抗剂包括结合b细胞标记的抗体，合成或天然-序列 肽，融合蛋白，和小分子拮抗剂，可任选偶联于或融合于细胞毒剂。例子包括但不限于，例如，cd20抗体，br3抗体(例如，wo0224卯9)， br3-fc，等等。
cd20抗体的例子包括"c2b8"，现在称为"利妥昔单抗" ("rituxan ")(美国专利号5736137);钇-[90]-标记的2b8鼠科抗体，称为 "y2b8"或"替伊莫单抗"(zevalin )，可购自idec制药公司(idec pharmaceuticals, inc.)(美国专利号5736137; 1993/6/22由atcc以登录号 hb11388保藏，名称是2b8);鼠科igg2a"bl"，也称为"托西莫单抗"，任选用 "i标记以得到""i-bl"或"碘im托西莫单抗"抗体(bexxartm)，可购自corixa (也可参见美国专利号5595721);鼠科单克隆抗体"1f5" (press等，blood 69(2): 584-591 (1987)及其变体，包括"插入构架的(framework-patched)"或人源化1f5 (wo 2003/002607， leung， s.;以hb-96450保藏于atcc);鼠科2h7和嵌合 2h7抗体(美国专利号5677180);人源化2h7 (参见，例如，wo04/056312; us20060024295); humax-cd20tm抗体(基因迈伯公司(genmab)，丹麦)；wo 2004/035607中列出的人单克隆抗体(teeling等)；ame-133tm抗体(应用分子进 化公司(applied molecular evolution)); a20抗体或其变体如嵌合或人源化a20 抗体(分别表示为ca20、 ha20) (us 2003/0219433，伊缪麦迪克斯公司 (immunomedics));禾口购自international leukocyte typing workshop (国际白细胞 分型工作室)的单克隆抗体l27， g28-2， 93-1 b3， b-c1或nu-b2(valentine等， 选自leukocyte typing iii(白细胞分型iii) (mcmichad编，第440页，牛津大学 出版社(oxford university press) (1987))。"缓解疾病的抗风湿药"或"dmard"的例子包括羟氯替平，柳氮磺 吡啶，氨甲喋呤，来氟米特，依那西普，英夫利昔单抗(加口服和皮下甲氨喋 呤)，硝基咪唑硫嘌呤，d-青霉胺，金(口服)，金(肌内)，米诺环素，环孢霉素， 葡萄球菌蛋白a免疫吸附，包括其盐和衍生物，等等。 "ctla4"在活化的t淋巴细胞上表达并参与下调免疫应答。文献中 ctla4的其他名称包括细胞毒t淋巴细胞相关抗原4，细胞毒t淋巴细胞相 关蛋白4，细胞分化抗原cd152，和细胞毒t淋巴细胞相关颗粒丝氨酸蛋白酶 4。许多其他术语也在文中进行了定义或表征。发明详述 cd4是主要在t淋巴细胞谱系细胞(包括大部分胸腺细胞和外周t 细胞亚类)上表达的表面糖蛋白。某些非淋巴细胞也表达低水平的cd4，尽管 这种趋异细胞分配的功能意义还未知。在成熟t细胞上，cd4通过与抗原呈递 细胞表达的mhc ii类分子相互作用而发挥共识别功能。004 t细胞主要构成 在病毒、细菌、真菌和寄生虫感染的t-依赖性应答期间调节t和b细胞的功 能辅助细胞亚类。在自身免疫性疾病(尤其当对自身抗原的耐受性被破坏时)的发病 机制中，cd4 t细胞可导致炎性反应从而造成关节和组织破坏。例如，通过 募集造血谱系的炎性细胞，产生抗体、炎性细胞因子和介质，以及通过激活杀 伤细胞有助于这些过程。cd4 t细胞与狼疮的发病机制有关。例如，cd4 t细胞存在于肾 小球肾炎部位。据报道，sle患者的cd4 t细胞对抗原超响应并在体外耐受 凋亡。能支持b细胞产生自身抗体的自身抗原特异性cd4 t细胞(产生ifn-y 的效应/记忆cd4 细胞)存在于sle患者中。此外，观察到mhc ii级等位基因 和sle风险之间强烈相关。类似地，cd4 t细胞与ms的发病机制有关。例如，cd4 辅助 t细胞参与ms的发病机制，相应的实验室模型，实验性变应性脑脊髓炎(eae)， 以及消除了 t细胞的实验室动物显示不会产生eae (steinman等的uspn 4695459， 题为"method of treating autoimmune diseases that are mediated by leu3/cd4 phenotype t cells(治疗leu3/cd4表型t细胞介导的自身免疫性疾病 的方法)"，traugott等，(1983) "multiple sclerosis: distribution of t cell subsets within active chronic lesions(多发性硬化t细胞亚类在活动性慢性损伤内的分 布)"science 219: 308-310， arnason等，(1962) "role of the thymus in immune reaction in rats: ii. suppressive effect of thymectomy at birth on reactions of delayed (cellular) hypersensitivity and the circulating small lymphocyte (胸月泉在大.
鼠免疫反应中的作用ii.出生时进行的胸腺切除术对延迟的(细胞)超敏反应
和循环小淋巴细胞的抑制作用)"j exp med 116: 177-186，以及gonatas和 howard (1974) "inhibition of experimental allergic encephalomyelitis in ratsseverely depleted of t cdls(抑制t细胞严重消耗大鼠的实验性变应性脑脊髓 炎)"science 186: 839-841)。 cd4 和cd8 t细胞在ms损伤中被发现；已知 这两者都产生炎性细胞因子，尽管它们对于发病机制的相对贡献还不清楚。观 察到ms患者血液中髓磷脂特异性cd4 细胞的频率提高了 4倍。据信，目前 使用的或者将来很可能用于治疗ms的一些药物部分通过它们对t细胞的作用 而起作用；例如，tysabi^(那他珠单抗，a-4整联蛋白抗体)，campath (阿仑 单抗，cd52抗体)，和达珠单抗(il-2ra抗体)。此外，ms风险的增加与mhc ii级等位基因(3.6倍)以及程度较低的i级等位基因(2倍)相关。 —方面，本发明提供通过给予非消耗性cd4抗体和临床上或实验 上用来治疗狼疮的其他化合物的组合来治疗狼疮，包括sle和狼疮肾炎的方 法。本发明的另一方面提供通过给予导致肾功能改善和/或蛋白尿或活动性尿沉 淀减轻的非消耗性cd4抗体来治疗狼疮肾炎，包括中期到晚期疾病的方法。 本发明还有一方面提供通过给予任选与临床上或实验上用来治疗ms的其他化 合物组合的非消耗性cd4抗体来治疗ms的方法。本发明还有另一方面提供 通过给予通常与临床上或实验上用来治疗自身免疫性疾病的其他化合物组合 的非消耗性cd4抗体来治疗患有自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、哮喘、 银屑病、炎性肠病(例如，克罗恩病和溃疡性结肠炎)和斯耶格伦综合征的移植 物受者或对象的方法。
cd4抗体已经描述了许多消耗性和非消耗性cd4抗体。也已经报道了这些 抗体在诱导对抗原(包括自身抗原)的耐受性方面的应用。参见，例如，uspn 4695459; cobbold和waldmann的uspn 6056956，题为"non-depleting anti-cd4 monoclonal antibodies and tolerance induction(一一消耗'性抗-cd4单克隆抗体禾口而t 受诱导)，，；cobbold和waldmann的uspn 5690933，题为"monoclonal antibodies for inducing tolerance(用于诱导耐性的单克隆抗体)"；cobbold等的欧洲专利申 请公布0240344，题为"monoclonal antibodies and their use(单克隆抗体及其应 用)，，；hanna等的uspn 6136310，题为"recombinant anti-cd4 antibodies for human therapy(用于人类治疗的重组抗-cd4抗体)"；newman等的uspn 5756096，题为"recombinant antibodies for human therapy(用于人类治疗的重组抗体)"；newman等的uspn 5750105，题为"recombinant antibodies for human therapy(用于人类治疗的重组抗体)"；kung和goldstein的uspn 4381295，题 为"monoclonal antibody to human helper t cells and methods of preparing same(人辅助t细胞的单克隆抗体及其制备方法)"；waldmann (1989) "manipulation of t匿cell responses with monoclonal antibodies(单克隆抗体对t细 胞反应的操纵)"ann rev immunol 7: 407-44;以及wofsy和seaman (1987) "reversal of advanced murine lupus in nzb/nzw fl mice by treatment with monoclonal antibody to l3t4(用l3t4单克隆抗体治疗来逆转nzb/nzw fl小 鼠的高级鼠科狼疮"j immunol 138: 3247-53。具体地说，非消耗性cd4抗体 和及其在诱导耐受性中的应用已经描述于frewin等的美国专利申请公开号 2003/0108518，题为"trxl antibody and uses therefor(trxl抗体及其用途)"和 frewin等的美国专利申请公开号2003/0219403 ，题为"compositions and methods of tolerizing a primate to an antigen(使灵长类动物耐受抗原的组合物和方法)"， 各自通过引用纳入本文。适用于所述方法的示例性非消耗性cd4抗体包括trx1抗体，描 述于frewin等的美国专利申请公开号2003/0108518，题为"trx1抗体及其用 途"和frewin等的美国专利申请公开号2003/0219403，题为"使灵长类动物耐受 抗原的组合物和方法"。这些抗体是人源化抗体，其包含经修饰的人抗体的恒 定区、人抗体的轻链和重链构架区以及衍生自小鼠单克隆抗体的轻链和重链 cdr。因此，在一类实施方式中，非消耗性cd4抗体是如图1-4中任一 所示的trx1抗体。该抗体可具有seq id no: 3所示轻链氨基酸序列和seq id no: 6所示重链氨基酸序列、seq id no: 9所示轻链氨基酸序列和seq id no: 12所示重链氨基酸序列、seq id no: 15所示轻链氨基酸序列和seq id no: 18 所示重链氨基酸序列、或seq id no: 21所示轻链氨基酸序列和seq id no: 24 所示重链氨基酸序列。在相关类型的实施方式中，所述抗体包含某抗体的cd4 结合片段，该抗体包含seq id no: 3所示轻链氨基酸序列和seq id no: 6所 示重链氨基酸序列、seq id no: 9所示轻链氨基酸序列和seq id no: 12所示 重链氨基酸序列、seq id no: 15所示轻链氨基酸序列和seq id no: 18所示重链氨基酸序列、或seq id no: 21所示轻链氨基酸序列和seq id no: 24所 示重链氨基酸序列。包含trx1抗体一个或多个cdr的抗体也可用于该方法。因此， 在一类实施方式中，非消耗性cd4抗体包含图1a所示轻链的cdr1 (seq id no: 25)、 cdr2 (seq id no: 26)或优选cdr3 (seq id no: 27)。所述抗体任 选包含图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3(seq id no: 25-27)。类似地， 在一类实施方式中，所述抗体包含图1d所示重链的cdr1(seqidn0:28)、 cdr2 (seq id no: 29)或优选cdr3 (seq id no: 30)。所述抗体任选包含图id 所示重链的cdr1、 cdr2和cdr3(seq id no: 28-30)。在一类实施方式中， 所述抗体包含图1a所示轻链的cdr1、 cdr2和cdr3以及图id所示重链的 cdr1、 cdr2和cdr3(seqidno:25-30)。该抗体任选还包含图1a、图2a、 图3a或图4a所示轻链的fr1、 fr2和/或fr3，和/或图1d、图2d、图3d 或图4d所示重链的fr1、 fr2、 fr3和/或fr4。其他示例性抗体包括，但不限于，与trx1抗体结合相同表位的抗 体(例如，如图l-4中任一所示的抗体)。当所述对象是人时，所述抗体优选是人源化抗体或人抗体。显然， 在治疗非人哺乳动物时，任选改造所述抗体以适用于该动物，例如通过掺入合
适种类哺乳动物免疫球蛋白的构架和恒定区序列。该抗体任选是单克隆抗体、 完整抗体、抗体片段和/或天然抗体。该抗体任选具有减弱的效应功能，例如，与人iggl相比，从而降 低其诱导补体活化和/或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性的能力。例如，该抗体
与fc受体的结合降低(或没有)。类似地，该抗体可具有非糖基化的fc部分。 该抗体任选为能够结合fcrn的抗-cd4变体抗体。 狼疮的治疗 —方面，本发明提供通过给予治疗有效量的抗-cd4非消耗性抗体 和/或第二药剂来治疗哺乳动物对象如人类对象的狼疮的方法。所治疗对象的狼 疮通常是系统性红斑狼疮(sle)、皮肤红斑狼疮(cle)或狼疮肾炎，但也可以是 其他形式的狼疮，如肾外狼疮、脑炎狼疮、儿科狼疮、非肾狼疮、盘状狼疮或 脱发性狼疮。要治疗的狼疮在治疗开始时可以是早期、中期或晚期疾病。在治疗狼疮肾炎的实施方式中，所述狼疮肾炎可以是i-vi级中的任何一种。例如， 要治疗的狼疮可以是膜增生性狼疮肾炎(ii级)或膜性狼疮肾炎(v级)。狼疮通常 是是增生性狼疮肾炎(iii级或iv级)，治疗目的是使蛋白尿减轻、活动性尿沉 淀减轻和使肾功能正常或稳定。例如，蛋白尿(用本领域已知方法测量，例如，
24小时尿蛋白质测量，使用标尺(dipstick)或其他常规分析，例如本文实施例l 所述)可降低至少25%或至少50%，或甚至至少75%或至少90%，或者蛋白尿 可降至低于l g/天或低于500 mg/天。另一例子是，对象的尿蛋白质与肌酸酐 之比可降低至少25%或至少50%，或者该比例可降至低于1或低于0.5。类似 地，活动性尿沉淀(通过本领域已知方法监测，例如通过显微观察)可降低至少 25%、至少50%、至少75%或至少90%，或在治疗开始后仅保留非活动性尿沉 淀(低于10红血细胞/高倍视野且不存在红细胞管形，优选低于5红血细胞/高 倍视野可证实这一点)。 一方面，当治疗狼疮肾炎时，用所述组合开始治疗后 所述对象显示出蛋白尿减轻和/或活动性尿沉淀减轻。例如，对象尿液中的蛋白 质浓度可降至用所述组合开始治疗前对象尿液中蛋白质浓度的75%以下，50% 以下，25%以下，或10%以下，或降至低于1 g/天或低于500 mg/天，和/或活 动性尿沉淀可降低至少25%、至少50%、至少75%或至少90%，或者在治疗 开始后仅有非活动性尿沉淀(例如，低于io、优选低于5红血细胞/高倍视野)。
—类常规实施方式中，在该方法中将治疗有效量的非消耗性cd4 抗体和至少一种第二化合物的组合给予对象以治疗狼疮。所述非消耗性cd4 抗体可以是本文所述的任何一种。所述第二化合物是通常用来治疗狼疮的化合
物，例如，护理或实验性治疗的标准品。示例性的第二化合物包括，但不限于， 细胞毒剂；免疫抑制剂；抗疟药如羟氯喹，氯喹，或喹纳克林；化疗剂；细胞 因子拮抗剂或抗体；生长因子；激素(例如，激素替代疗法)；抗-激素疗法；整 联蛋白拮抗剂或抗体，例如，a4-整联蛋白抗体或拮抗剂；b细胞表面标记拮抗 剂；b细胞表面标记的抗体(例如，cd20抗体，例如，利妥昔单抗，也称为 rituxan ); cd5、 cd28或cd40的抗体或阻断剂；皮质激素，例如，甲泼尼 龙，泼尼松如低剂量泼尼松，地塞米松，或糖皮质激素(glucorticoid)，例如， 经关节注射，包括全身性皮质激素治疗；dmard;或上述任何一种的组合， 等等。也可参见美国专利申请公布2006/0024295和2003/0219403。
在一类实施方式中，上述第二化合物选自，例如，环磷酰胺，霉酚
酸酯、ctla4-ig和br3-fc。环磷酰胺是商品名为cytoxan 。霉酚酸酯也称为 cellcept 、 mmf或2-吗啉代乙基(e)-6-(l,3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧 -5-异苯并呋喃基)-4-甲基-4-己烯酸酯(1^乂611(^6)。 ctla4-ig是连接于经修饰的 人免疫球蛋白fc部分的人细胞毒t-淋巴细胞-相关抗原4(ctla-4)的胞外结构 域，例如，阿巴特赛普(abatacept)(布里斯托-美时施贵宝公司的€^11(^@)或 rg2077 (来普里基因公司(repligen))。示例性的a4-整联蛋白抗体是那他珠单 抗(tysabi^)。baff的可溶性拮抗剂br3-fc是一种包括人br3胞外结构域(在 b细胞上发现的baff受体)和人iggl fc的融合蛋白(参见，例如，vugmeyster 等，(2006) american journal of pathology 168: 476-489和kayagaki等，(2002) immunity 10: 515-524)。该组合中可任选包含第三种、第四种(等等)化合物； 一个例子是，皮质激素如甲泼尼龙和/或泼尼松可与cd4抗体和环磷酰胺一起 给予。 —实施方式中，对象之前从未用药物，如免疫抑制剂，治疗过狼疮 和/或之前从未用抗-cd4抗体治疗过。在另一实施方式中，对象之前用药物治 疗过狼疮和/或之前用抗-cd4抗体治疗过。在进一步的实施方式中，对象未患 类风湿性关节炎。再在进一步的实施方式中，对象未患多发性硬化症。再在其 他实施方式中，对象未患狼疮之外的自身免疫性疾病。"自身免疫性疾病"在文 中表示由个体自身的组织或器官或共分离物引起并针对这种组织或器官或共 分离物的疾病或病症，或其表现形式或由此导致的症状。 一实施方式中，其指 由于b细胞产生与正常的身体组织和抗原反应的抗体而导致或加剧的症状。在 其他实施方式中，所述自身免疫性疾病涉及自身抗原(例如核抗原)的表位的特 异性自身抗体的分泌。 —实施方式中，用所述组合开始治疗前，所述对象显示出蛋白尿， 通过治疗改善了这种蛋白尿。例如，治疗开始前，对象显示出的蛋白尿高于500 mg/天、高于1000mg/天、高于2000 mg/天或高于3500 mg/天；治疗开始后， 蛋白尿可降低至少25%或至少50%，或者甚至至少75%或至少90%，或者蛋 白尿可降至低于1 g/天或低于500 mg/天，例如，通过24小时尿蛋白质测量测 得。
蛋白质与肌酸酐之比的降低也可类似地监测。尿蛋白质和肌酸酐水 平可通过本领域已知方法测量，例如，通过测量随机尿液样品的尿蛋白质与肌 酸酐之比。 一实施方式中，用所述组合开始治疗前，所述对象显示出蛋白质与 肌酸酐之比高于0.5、高于1或高于2;治疗开始后，蛋白质与肌酸酐之比可能 被降至，例如，低于1(例如，对治疗部分响应时)或低于0.5(例如，完全响应
时)。治疗开始后，与治疗前的值相比，蛋白质与肌酸酐之比可降低至少25% 或至少50%。 一实施方式中，用所述组合开始治疗前，所述对象显示出肾病范
围的蛋白尿，即蛋白质与肌酸酐之比高于3;治疗开始后，蛋白质与肌酸酐之
比被降至低于3，或者任选降低至少25%或至少50%或者降至低于2或低于1。例如，可通过监测补体水平、自身抗体水平、和/或整体疾病活性 来评价对用该组合治疗狼疮，包括狼疮肾炎的反应。例如，补体水平(例如， c3、 c4和ch50)的正常化可表明治疗成功。类似地，治疗开始后，自身抗体 如抗-双链dna抗体、ana和抗-clq的水平可降低例如至少25。/。、至少50% 或至少75%。也可观察到肾活检的改善，从而表明治疗成功。任选地，用所述组合开始治疗前，所述对象显示出肾病综合征。可 通过本领域已知方法诊断肾病综合征。 一些病征、症状或其他标志可用来诊断 肾病综合征，其中包括24小时尿蛋白质高于3.5g/天，蛋白质与肌酸酐之比高 于3 ，低白蛋白血症(血液中的白蛋白水平低)，尤其是眼、脚和手周围的水肿(肿 胀)，和/或高胆固醇血症(血液中胆固醇水平高)。本发明不限于肾病综合征的这 些病征、症状或其他标志。用该组合治疗可任选缓解肾病综合征。例如，治疗 开始后所述对象任选显示出蛋白尿减轻到低于3.5 g/天，例如，低于3 g/天， 低于2g/天，低于lg/天，或甚至低于0.5g/天，和/或治疗开始后蛋白质与肌 酸酐之比降至低于3，例如，低于2，低于l，或甚至低于0.5。用该组合治疗对象对于对象有可观益处，例如，可减轻不良副作用。 例如，与非消耗性cd4抗体组合治疗所需的第二化合物(例如，环磷酰胺)的量 可以大大低于单用这第二化合物治疗以缓解症状所需的量。例如，环磷酰胺可 产生严重副作用；因此迫切需要用较少药物完成治疗。 —方面，该方法包括用非消耗性cd4抗体和第二化合物治疗对象 以减轻症状，然后继续用非消耗性cd4抗体(不与第二化合物组合)治疗对象以维持消退。例如，可用非消耗性cd4抗体和环磷酰胺、霉酚酸酯或ctla4-ig 的组合治疗对象以减轻症状，然后单用非消耗性cd4抗体(即，不与环磷酰胺、 霉酚酸酯或ctla4-ig组合)治疗以维持消退。使对象接触最少的第二化合物的 方法也能降低副作用。在其他实施方式中，用非消耗性cd4抗体和第二化合 物治疗对象以减轻症状，然后用除非消耗性cd4抗体之外的第二化合物或一 种或多种其他化合物继续治疗对象以维持消退。另一类常规实施方式还提供治疗哺乳动物对象例如人的狼疮肾炎 的方法。在该方法中，将治疗有效量的非消耗性cd4抗体给予对象。用所述 抗体开始治疗后，与治疗开始前对象显示出的蛋白尿和/或活动性尿沉淀水平相 比，所述对象显示出肾功能改善，蛋白尿减轻，和/或活动性尿沉淀减轻。例如， 蛋白尿可降低至少25%、至少50%、至少75%或至少90%，或者蛋白尿可降 至低于1 g/天或低于500 mg/天；尿蛋白质与肌酸酐之比可降低至少25%或至 少50%，或者该比例可降至低于1或低于0.5;和/或活动性尿沉淀可降低至少 25%、至少50%、至少75%或至少90%，或者在治疗开始后仅有非活动性尿沉 淀。所述非消耗性cd4抗体可以是本文所述的任何一种。 —实施方式中，对象之前从未用药物治疗过狼疮肾炎和/或之前从 未用抗-cd4抗体治疗过。在其他实施方式中，对象之前用药物治疗过狼疮肾 炎和/或之前用抗-cd4抗体治疗过。在其他实施方式中，本发明的非消耗性抗 -cd4抗体是唯一的给予对象以治疗狼疮肾炎的药物。在其他实施方式中，本 发明的非消耗性cd4抗体是用来治疗狼疮肾炎的药物之一。在进一步的实施 方式中，所述对象未患类风湿性关节炎。再在进一步的实施方式中，所述对象 未患多发性硬化症。再在其他实施方式中，所述对象未患除狼疮和/或狼疮肾炎 之外的自身免疫性疾病。在一类实施方式中，该方法包括给予至少一种第二化合物，如本文 所述与非消耗性cd4抗体组合的化合物中的任何一种。例如，环磷酰胺、霉 酚酸酯、ctla4-ig或a4-整联蛋白抗体可与非消耗性cd4抗体组合给予对象。 该组合中可任选包含第三种、第四种等化合物；例如，皮质激素如甲泼尼龙和 /或泼尼松可与cd4抗体和环磷酰胺一起给予。 —实施方式中，用非消耗性cd4抗体治疗开始前，所述对象显示出蛋白尿，用非消耗性cd4抗体开始治疗后这种蛋白尿降低。例如，治疗开
始前，对象显示出的蛋白尿高于500 mg/天、高于1000 mg/天、高于2000 mg/ 天或高于3500mg/天；治疗开始后，蛋白尿可降低至少25%、至少50%、至少 75%或至少90%，或者蛋白尿可降至低于1 g/天或低于500 mg/天。可类似地监 测到蛋白质与肌酸酐之比的降低。 一实施方式中，治疗开始前，所述对象显示 出蛋白质与肌酸酐之比高于0.5、高于1或高于2;治疗开始后，蛋白质与肌酸 酐之比可降低至少25%或至少50%，或降至低于1或低于0.5。 一实施方式中， 用所述组合开始治疗前，所述对象显示出肾病范围的蛋白尿，即蛋白质与肌酸 酐之比高于3;治疗开始后，蛋白质与肌酸酐之比被降至低于3，或者任选降 低至少25%或至少50%或者降至低于2或低于1。任选地，治疗开始前，所述 对象显示出肾病综合征。肾病综合征可任选通过治疗而缓解。例如，治疗开始 后对象可任选显示出蛋白尿减轻至低于3.5g/天，例如，低于3g/天，低于2g/ 天，低于lg/天，或者甚至低于lg/天或低于0.5g/天。 治疗多发性硬化症多发性硬化症(ms)是一种人中枢神经系统(cns)的炎性和脱髓鞘 变性疾病。它是一种世界性疾病，在美国有大约300， 000人患有该病；它主 要发生在年轻成年人中，约70%-80%患者的发病年龄在20-40岁之间(anderson 等，ann neurology 31(3): 333-6 (1992); noonan等，neurology 58: 136-8 (2002))。 基于其临床过程，磁共振成像(mrj)扫描评价，和活检及尸检材料的病理学分 析，ms是一种异质性疾病(lucchinetti等，ann neurol 47: 707-17 (2000))。该 病有多种表现，包括脊髓、脑干、颅神经、小脑、大脑和认知综合征。大多数 ms患者有进行性残疾，尤其是在未来25年中。在疾病发生后的15年内一半 的ms患者需要手杖来行走。ms是造成青年和中年神经残疾的主要原因，直 到过去十年还不知道有益的治疗方法。由于没有特异性临床发现，ms难以诊 断，因此需要开发高度结构化的诊断标准，其中包含一些技术进步，包括mri 扫描、诱发电位和脑脊液(csf)研究。所有诊断标准取决于不同时间发生的中 央白质内分散损伤的一般原理而不能由其他病因学如感染、血管疾病或其他自 身免疫性病症来解释(mcdonald等，ann neurol 50: 121-7 (2001))。 ms具有四 种疾病模式复发性-间歇性(relapsing-remitting)ms (rrms;发病时80%-85%的病例)，原发性进行性ms (ppms;发病时10%-15%)，进行性复发性ms
(prms;发病时5%);和继发性进行性ms (spms) (kremenchutzky等，brain 122 (第10部分)1941-50 (1999); confavreux等，n engl j med 343(20): 1430-8 (2000))。预计50%的rrms患者在10年内将发展成spms，并有多达90%的 rrms患者将最终发展成spms (weinshenker等，brain 112 (第1部分)133-46 (1989》。本发明包括治疗哺乳动物对象如人类对象的多发性硬化症的方法。 一方面，该方法包括给予所述对象治疗有效量的非消耗性cd4抗体。所述非 消耗性cd4抗体可以是本文所述的任何一种。在其他方面，该方法包括给予 所述对象治疗有效量的非消耗性cd4抗体和至少一种第二化合物的组合。同 样，所述非消耗性cd4抗体可以是本文所述的任何一种。所述第二化合物通常用来治疗ms，例如，护理或实验性治疗的标 准品。示例性第二化合物包括，但不限于，细胞毒剂；免疫抑制剂(例如，环 磷酰胺)；b细胞表面标记拮抗剂；b细胞表面标记抗体；cd20抗体，例如， 利妥昔单抗，见us 20060051345); cd5、 cd28或cd40的抗体或阻断剂；皮 质激素(例如，泼尼松)、ctla4-ig、 a4-整联蛋白的抗体或拮抗剂如那他珠单抗 (tysabri ),霉酚酸酯，抑制素，lfa-1或cd-lla的抗体或阻断齐lj(参见jardieu 等的美国专利申请公开号20050281817，题为"method for treating multiple sclerosis(治疗多发性硬化症的方法)"，白介素-12抗体，(3干扰素(例如，干扰素 (3-la如avonex⑧或rebi产，或干扰素卩-lb如betaseron ),醋酸格拉默 (copaxone ), cd52抗体如阿仑单抗(campat1^)，白介素受体抗体如达珠单抗 (zenapax ,白介素-2受体ot亚基抗体)，等等。在一类实施方式中，该方法包括用非消耗性cd4抗体和第二化合 物治疗对象以减轻症状，然后用非消耗性cd4抗体(不与第二化合物组合)继续 治疗对象以维持消退。例如，对象可用非消耗性cd4抗体和醋酸格拉默的组 合治疗，然后单用非消耗性cd4抗体治疗以维持消退。在其他实施方式中， 对象可用非消耗性cd4抗体和第二化合物治疗以减轻症状，然后用除非消耗 性cd4抗体之外的第二化合物或一种或多种通常用来治疗ms的化合物继续 治疗。
—实施方式中，对象之前从未用药物如免疫抑制剂治疗过多发性硬 化症和/或之前从未用抗-cd4抗体治疗过。在其他实施方式中，对象之前用药
物治疗过多发性硬化症和/或之前用抗-cd4抗体治疗过。通常，所述对象对于多发性硬化症的治疗是适格的，即所述对象是 ms对象。出于本文的目的，这种ms对象是正在经历、曾经经历、或者可能 经历多发性硬化症的一种或多种病征、症状或其他标志的对象；已诊断出多发 性硬化症的对象，例如无论是新诊断出的("新发生的"ms)、之前诊断出又重新 复发或恶化、之前诊断出并正在消退，等等；和/或有多发性硬化症风险的对象。 鉴定患有多发性硬化症或有患病风险的人时可任选通过血清、脑脊液(csf)和/ 或ms损伤中cd20阳性b细胞水平升高，和/或采用检测自身抗体的试验来筛 选，定性并优选定量评估。示例性的这种与多发性硬化症相关的自身抗体包括 抗-髓磷脂碱性蛋白(mbp)、抗-髓磷脂少突胶质神经细胞糖蛋白(mog)、抗-神 经节苷脂和/或抗-神经丝抗体。可在对象的血清、脑脊液(csf)和/或ms损伤内 检测这种自身抗体。"升高的"自身抗体或b细胞水平在文中是指这种自身抗体 或b细胞的水平明显超过未患ms的个体的水平。文中，要治疗的ms包括原发性进行性多发性硬化症(ppms)、复 发性-间歇性多发性硬化症(rrms)、继发性进行性多发性硬化症(spms)和进行 性复发性多发性硬化症(prms)。当治疗开始时所述ms可以是早期、中期或晚 期疾病。表述"治疗有效量"用于ms治疗时是指抗体(或者抗体和至少第二化合 物的组合)的用量能有效预防、缓解或治疗多发性硬化症。这种有效量将通常 改善ms的病征、症状或其他标志，如降低复发率、预防残疾、降低脑mri 损伤的数目和/或体积、改善定时25-英尺行走(timed 25-foot walk)、延长疾病进 展时间(例如采用扩展的残疾状态量表(expanded disability status scale, edss)) 等等。 一方面，治疗对象的脱髓鞘被降低。"原发性进行性多发性硬化症"或"ppms"的特征为疾病从其发作逐 步进展，根本没有任何叠加的复发和消退。可能存在疾病活性平稳期，然后可 能有情况较好和较差的几天(或几周)。ppms与rrms和spms的不同之处在 于，它通常发生于30岁晚期或40岁早期，男性和女性同样容易患病，且最初 的疾病活性通常出现在脊髓而非脑中。ppms通常会迁移到大脑，但相比prms或spms不太可能损伤大脑区域；例如，ppms患者不太可能产生认知问题。
ppms是ms的一个亚型，在mri扫描中最不可能显示炎性(钆增强)损伤。该 病的原发性进行性形式占所有多发性硬化症患者的10-15%。可按照mcdonald 等，arm neurol 50: 121-7 (2001)的标准定义ppms。本文治疗的ppms对象通 常是有可能或已经被诊断为ppms的对象。"复发性-间歇性多发性硬化症"或"rrms"的特征为复发(也称为恶 化)，期间可能出现新症状或者旧症状重新出现或恶化。复发之后是消退期， 期间患者会从复发的缺陷中完全或部分恢复。复发可持续数天、数周或数月， 而恢复可以是缓慢而逐渐的或者几乎是瞬间的。绝大多数ms患者首先被诊断 为rrms。这通常发生在它们20或30岁时，尽管早得多或者晚得多诊断出也 是已知的。患上这种ms亚型的女性是男性的两倍。复发期间，髓磷脂一中枢 神经系统(cns)白质区域内围绕神经纤维(神经元)的保护性绝缘鞘一在炎性反 应中会被身体自身的免疫系统损伤。这造成许多明显依赖于cns损伤区域而 变化的神经学症状。复发后，炎性应答立即消失，cns中一种特殊类型的神经 胶质细胞(称为少突胶质细胞)引起髓鞘再生一使轴突周围的髓磷脂鞘可能被修 复的一种过程。正是这种髓鞘再生可能造成症状消退。约50%的rrms患者 在发病10年内转变成spms。 30年后，这一数字上升到90%。任何时刻，该 病的复发性-消退形式约占所有ms患者的55%。"继发性进行性多发性硬化症"或"spms"的特征为临床神经学损伤 稳定进展且有或没有叠加的复发和最低消退及平稳。spms患者之前经历过 rrms期，这一时期将持续2-40年或更长。任何叠加的复发和消退随时间而 减少。从疾病的继发性进行性阶段发作开始，相比rrms阶段残疾开始更快地 产生，尽管在某些个体中这一过程也是十分缓慢的。10年后，50%的rrms 患者将发展成spms。在25-30岁时，这一数字升高至90。/。。 spms中的炎性 损伤形成水平将低于rrms，但疾病的总负荷会继续进展。任何时刻，spms 占多发性硬化症患者的约30%。"进行性复发性多发性硬化症"或"prms"的特征为临床神经学损伤 稳定进展并伴有叠加的复发和消退。复发之后立即是明显的恢复，但两次复发 之间症状会逐渐恶化。prms影响所有多发性硬化症患者的约5%。 一些神经学家认为prms是ppms的变化形式。 其他病症的治疗非消耗性cd4抗体，包括非消耗性cd4抗体和一种或多种其他化 合物的组合，也可用于除狼疮或多发性硬化症之外的疾病和病症，例如，cd4 t细胞造成的病理状况。因此，本发明的一个方面提供治疗哺乳动物对象如人 类对象的病症的方法。该方法包括给予所述对象治疗有效量的非消耗性cd4 抗体和至少一种第二化合物的组合。 一实施方式中，所述对象是组织移植物受 者，且要治疗的病症是移植排斥或移植物抗宿主病。能够用该组合物治疗的其 他病症包括，但不限于，自身免疫性病症或疾病如类风湿性关节炎、哮喘、银 屑病、炎性肠病(例如，克罗恩病或溃疡性结肠炎)和斯耶格伦综合征。所述非消耗性cd4抗体可以是上述任何一种。该第二化合物可任 选是用来治疗所述病症，例如，护理或实验性治疗的标准品。示例性第二化合 物包括，但不限于，细胞毒剂；免疫抑制剂(例如，环磷酰胺)；b细胞表面标 记拮抗剂；b细胞表面标记抗体；cd20抗体，例如，利妥昔单抗，见us 20060051345); cd5、 cd28或cd40的抗体或阻断剂；皮质激素(例如，泼尼 松)、ctla4-ig、 a4-整联蛋白的抗体或拮抗剂如那他珠单抗(tysabi^)，霉酚酸 酯，抑制素，lfa-1或cd-lla的抗体或阻断齐u(参见jardieu等的美国专利申请
发明者b·欧文 申请人:基因技术股份有限公司