专利名称：一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明公开了一种药物组合物及其制备方法和质量检测方法，特别涉及一种具有 治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物及其制备方法和质量检测方法。
背景技术：
具有月经紊乱，闭经，无排卵，多毛，肥胖，不孕合并双侧卵巢增大呈囊性改变，称 为多囊卵巢综合症。患者可具备以上典型症状，也可以只有部分症状，但因排卵障碍而致不 孕则是多囊卵巢综合征的主要临床表现。多囊卵巢综合征的确切病因不详，目前认为是卵巢产生过多雄激素，而雄激素的 过量产生是由于体内多种内分泌系统功能异常协同作用的结果。多囊卵巢综合症是以慢性 无排卵、闭经或月经稀发、不孕、肥胖、多毛和卵巢多囊性增大为临床特征的综合症候群。多 囊卵巢综合征，是多内分泌轴功能紊乱所引起的疾病的终期卵巢病理改变，其最初的神经 内分泌变化，是(^nrh-gnh释放频率和脉冲振幅增加，lh/fsh比值增高。多囊卵巢综合症的病因至今尚未定论，一些研究认为与以下几个方面有关下丘 脑垂体功能障碍；肾上腺皮质机能异常；胰岛素抵抗；卵巢局部自分泌旁分泌调控机制异 常；遗传因；高泌乳素等。多囊卵巢综合征最显著的特征是无排卵。由于没有排卵，所以卵巢只分泌雌激素 和雄激素，而不分泌孕激素。雌激素刺激子宫内膜增生。而孕激素使子宫内膜发生分泌反 应。如果子宫内膜长期受雌激素的作用而无孕激素的作用，就会发生子宫内膜增生过长和 子宫内膜癌。另外，也是因为多囊卵巢综合征患者不能排卵，所以她们无法自然怀孕，多囊 卵巢综合征患者是最常见的不孕症患者。近年还发现许多多囊卵巢综合征患者有高胰岛素 血症，高胰岛素血症患者容易出现糖尿病及心脑血管疾病，因此多囊卵巢综合征也是糖尿 病及心脑血管疾病的高危因素。目前，治疗多囊卵巢综合症的西医药可以临时控制病情，但是难以根治。建议患者 采用中药进行治疗，中医治疗需要结合具体脉象进行辩证，从根本上入手，对证用药，可达 到正常排卵。
发明内容
本发明的目的在于公开一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物，本发明 的目的还在于公开该药物组合物的制备方法，本发明的目的还在于公开该药物组合物的质 量检测方法。本发明的目的是通过如下技术方案实现的。本发明药物组合物的原料药组成为黄芪20-80重量份 茯苓10-50重量份 苍术10_50重量份淫羊藿10-50重量份 丹参5-20重量份。本发明药物组合物的原料药组成优选为
黄芪50重量份 茯苓30重量份 苍术30重量份淫羊藿30重量份丹参10重量份。本发明药物组合物的原料药组成优选为黄芪70重量份 茯苓15重量份 苍术15重量份淫羊藿45重量份丹参15重量份。本发明药物组合物的原料药组成优选为黄芪30重量份 茯苓45重量份 苍术45重量份淫羊藿15重量份 丹参8重量份。取上述原料，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床可接受的剂型片剂、颗粒剂、 口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂或注射剂。本发明药物组合物的制备方法包括如下步骤取上述原料药，丹参用4-8重量倍80-95 %乙醇加热回流提取1_3次，每次
0.5-1. 5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，备用；其余黄芪、茯苓、淫羊藿和苍术四味 药加5-12重量倍水浸泡0. 5-1. 5小时后，煎煮1-3次，每次1_3小时，过滤，合并滤液，与上 述备用液合并，浓缩成常温下密度为1.2-1.5的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入常规辅料，按 照常规方法制成临床接受的剂型片剂、颗粒剂、口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂或 注射剂。本发明药物组合物的制备方法优选包括如下步骤取上述原料药，丹参用6重量倍90%乙醇加热回流提取2次，每次1小时，合并提 取液，滤过，滤液回收乙醇，备用；其余黄芪、茯苓、淫羊藿和苍术四味药加8重量倍水浸泡 1小时后，煎煮2次，每次2小时，过滤，合并滤液，与上述备用液合并，浓缩成常温下密度为
1.2-1. 5的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入常规辅料，按照常规方法制成临床接受的剂型片 剂、颗粒剂、口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂或注射剂。其中，上述苍术优选炒苍术。本发明药物组合物的质量检测方法包括如下鉴别和含量测定方法中的一种或几 种鉴别a.取本发明药物组合物制剂日服用量的3/5-6/5，加乙醇5_15体积份溶解，超声 处理20-40分钟，过滤，滤液蒸干，加乙醇0. 5-1. 5体积份使溶解，作为供试品溶液；另取淫 羊藿苷加乙醇制成每1体积份含0. 001-0. 003重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱 法(《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶 gf254薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5-15 0.5-1.5 0.5-1.5 0. 5-1. 5为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本发明药物组合物制剂日服用量的5/7-10/7，加乙醚5_15体积份，振摇提取 20-40分钟，滤过，滤液蒸干，参照加乙酸乙酯0. 5-1. 5体积份使溶解，作为供试品溶液 ’另 取丹参酮iia对照品，加乙酸乙酯制成每1体积份含0. 001-0. 003重量份的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各5 μ 1， 分别点于同一硅胶g薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯=15-25 1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水= 25-40 60-75为流动相；柱温20-40°c;流速0.5-1. 5ml/分钟；蒸发光散射检测器高纯氮 气流速2-3l/分钟；漂移管温度100-110°c ；理论板数按黄芪甲苷峰面积计算不低于2000 ；对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1体积份含
0.0001-0. 0005重量份的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物组合物制剂日服用量的7/10-14/10，精密称 定，置索氏提取器中，加甲醇40-80体积份，冷浸过夜，加热回流提取至回流液无色，提取液 回收溶剂并浓缩至干，残渣加水5-15体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇提取2-6次，每 次30-50体积份，合并正丁醇液，用氨试液洗1-3次，每次30-50体积份，弃去氨试液，正丁 醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5-15体积份量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得；测定法分别吸取对照品溶液15μ 1、30μ 1，供试品溶液20μ 1，注入液相色谱仪， 测定，以外标两点对数方程计算，即得；本发明药物组合物日用制剂量含黄芪按黄芪甲苷(c41hsa4)计不得低于
1.26-2. 52mgo本发明药物组合物的质量检测方法优选包括如下鉴别和含量测定方法中的一种 或几种鉴别a.取本发明药物组合物制剂日服用量的3/5-6/5，加乙醇10体积份溶解，超声处 理30分钟，过滤，滤液蒸干，加乙醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷加乙 醇制成每1体积份含0. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》 2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶gf254薄层板上， 以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=10 :1:1: 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本发明药物组合物制剂日服用量的5/7-10/7，加乙醚10体积份，振摇提取30 分钟，滤过，滤液蒸干，参照加乙酸乙酯1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮iia 对照品，加乙酸乙酯制成每1体积份含0. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱 法(《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶g 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯=19 1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对 照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水= 32 68为流动相；柱温30°c ；流速1. oml/分钟；蒸发光散射检测器高纯氮气流速2. 5l/ 分钟；漂移管温度105°c ；理论板数按黄芪甲苷峰面积计算不低于2000 ；对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1体积份含0. 0003 重量份的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物组合物制剂日服用量的7/10-14/10，精密称 定，置索氏提取器中，加甲醇60体积份，冷浸过夜，加热回流提取至回流液无色，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次40 体积份，合并正丁醇液，用氨试液洗2次，每次40体积份，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣 加甲醇溶解并转移至10体积份量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得；测定法分别吸取对照品溶液15μ 1、30μ 1，供试品溶液20μ 1，注入液相色谱仪， 测定，以外标两点对数方程计算，即得；本发明药物组合物日用制剂量含黄芪按黄芪甲苷(c41hsa4)计不得低于 1. 26-2. 52mg。本发明所述的重量份与体积份的比例为克/毫升。本发明药物组合物质量控制方 法可以应用于组合物的各种剂型，如片剂、颗粒剂、口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂 或注射剂等临床可接受的剂型，由于不同剂型的制剂其中所含的相当生药量是相同的，因 此各个剂型在进行质量控制时，所选用样品量可统一折算为相当生药量，本质量控制方法 中药物组合物制剂可以为每片、每粒、每支或每丸等。
图1 专属性考察色谱图；图2 检测限考察色谱图；图3 定量限考察色谱图；图4 色谱柱选择色谱图；图5 流动相选择色谱图；图6 柱温考察色谱图；图7:流速考察色谱图。本发明药物组合物制剂以黄芪、淫羊藿、苍术、茯苓和丹参为原料药，经过特殊制 备方法制成各种剂型。药效学实验表明，本发明药物组合物可以降低血糖和胰岛素，降低血 清睾酮的含量，在治疗多囊卵巢综合症方面具有重要意义。本发明经过处方筛选实验表明， 在对多囊卵巢综合症治疗中最佳配伍比例为黄芪50g、苍术30g、茯苓30g、淫羊藿30g、丹 参 10g。下述实验例和实施例进一步说明但不限于本发明。实验例1本发明药物组合物中丹参提取工艺比较研究1、处方黄芪50g淫羊藿30g苍术30g 茯苓30g丹参10g2、实验材料(1)实验动物=wistar健康成年大鼠，雌性70只，体重250士20g ；雄性25只，体重 300士20g。由沈阳药物研究所提供。(2)药物及试剂醇提组本发明实施例1制备的药物组合物胶囊剂，水提组将 本发明实施例1所述方法中丹参的溶剂换为水，同法制备的药物组合物胶囊剂；睾酮；中性 茶油(香油)；睾酮试剂盒(批号20081201，北京市福星生物工程有限公司)。血糖试纸及 血糖仪。(3)器材1mm采血管；iml及5ml注射器；1. 5ml离心管；al204电子分析天平(每 特勒-托利多仪器上海有限公司)；dtt-600电子天平(江苏常熟长青仪器仪表厂)。dfm-96 型多管放射免疫计数器(合肥众成机电技术公司)。
3、实验方法(1)模型制备将健康成年wistar大鼠按雌雄比例3 1合笼，夜晚将雌鼠放入 雄鼠笼中，次日晨取出，并阴道涂片查找精子，找到精子则视为孕0天。未孕者仍与雄鼠合 笼，直到受孕。对达到孕16天的雌鼠随机分别颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2. 5mg/只及中 性茶油对照。连续注射3天。观察产仔情况，最后取所产下的雌鼠，生长至成年，连续2个 周期阴道涂片无明显动情周期者则为实验对象。(2)分组及给药将20只模型大鼠随机分为2组，即水提组和醇提组，10只/组。 水提组按照3. 92g/kg、醇提组按照4. 02g/kg分别给大鼠灌胃，连续灌胃20天后，给空腹12 小时大鼠尾部取血用血糖仪测空腹血糖，然后眶静脉毛细玻管采血iml，3000转/分离心取 血清，用放免法测空腹血清睾酮，操作严格按照试剂盒要求进行。最后给大鼠按照3g/kg灌 胃50%葡萄糖，分别测灌糖后0. 5huh,2h血中葡萄糖含量。结果见表1-表3。4、实验结果表1水提组ogtt血糖水平(mmol/l)测定结果(n = 6)
权利要求
1.一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料 药组成为黄芪20-80重量份 茯苓10-50重量份 苍术或炒苍术10-50重量份淫羊藿10-50重量份 丹参5-20重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为黄芪50重量份 茯苓30重量份 苍术或炒苍术30重量份淫羊藿30重量 份丹参10重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为黄芪70重量份 茯苓15重量份 苍术或炒苍术15重量份淫羊藿45重量份 丹参15重量份。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为黄芪30重量份 茯苓45重量份 苍术或炒苍术45重量份淫羊藿15重量份 丹参8重量份。
5.如权利要求1-4任一所述的药物组合物，其特征在于取该药物组合物的原料药，加 入常规辅料，按照常规工艺制成临床可接受的剂型片剂、颗粒剂、口服液体制剂、丸剂、胶 囊剂、缓释制剂或注射剂。
6.如权利要求1-4任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取原料药，丹参用4-8重量倍80-95%乙醇加热回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小时，合 并提取液，滤过，滤液回收乙醇，备用；其余黄芪、茯苓、淫羊藿和苍术四味药加5-12重量倍 水浸泡0. 5-1. 5小时后，煎煮1-3次，每次1-3小时，过滤，合并滤液，与上述备用液合并，浓 缩成常温下密度为1.2-1.5的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入常规辅料，按照常规方法制成 临床接受的剂型片剂、颗粒剂、口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂或注射剂。
7.如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为取原料药，丹参用6重量倍90 %乙醇加热回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤 过，滤液回收乙醇，备用；其余黄芪、茯苓、淫羊藿和苍术四味药加8重量倍水浸泡1小时后， 煎煮2次，每次2小时，过滤，合并滤液，与上述备用液合并，浓缩成常温下密度为1. 2-1. 5 的稠膏，干燥，粉碎成细粉，加入常规辅料，按照常规方法制成临床接受的剂型片剂、颗粒 剂、口服液体制剂、丸剂、胶囊剂、缓释制剂或注射剂。
8.如权利要求1-4任一所述的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法为鉴别a.取本发明药物组合物制剂日服用量的3/5-6/5，加乙醇5-15体积份溶解，超声处理 20-40分钟，过滤，滤液蒸干，加乙醇0. 5-1. 5体积份使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿 苷加乙醇制成每1体积份含0. 001-0. 003重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法 (《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶gf254 薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5-15 0.5-1.5 0.5-1.5 0. 5-1. 5为展开 剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点；b.取本发明药物组合物制剂日服用量的5/7-10/7，加乙醚5-15体积份，振摇提取 20-40分钟，滤过，滤液蒸干，参照加乙酸乙酯0. 5-1. 5体积份使溶解，作为供试品溶液 ’另取丹参酮ii a对照品，加乙酸乙酯制成每1体积份含0.001-0. 003重量份的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各5 μ 1， 分别点于同一硅胶g薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯=15-25 1为展开剂，展开，取出，晾干； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水= 25-40 60-75为流动相；柱温20-40°c;流速0.5-1. 5ml/分钟；蒸发光散射检测器高纯氮 气流速2-3l/分钟；漂移管温度100-110°c ；理论板数按黄芪甲苷峰面积计算不低于2000 ； 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1体积份含 0. 0001-0. 0005重量份的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物组合物制剂日服用量的7/10-14/10，精密称定，置 索氏提取器中，加甲醇40-80体积份，冷浸过夜，加热回流提取至回流液无色，提取液回收 溶剂并浓缩至干，残渣加水5-15体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇提取2-6次，每次 30-50体积份，合并正丁醇液，用氨试液洗1-3次，每次30-50体积份，弃去氨试液，正丁醇液 蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5-15体积份量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得；测定法分别吸取对照品溶液15 μ 1、30 μ 1，供试品溶液20 μ 1，注入液相色谱仪，测 定，以外标两点对数方程计算，即得；本发明药物组合物日用制剂量含黄芪按黄芪甲苷(c41h68o14)计不得低于1. 26-2. 52mgo
9.如权利要求8所述的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法为 鉴别a.取本发明药物组合物制剂日服用量的3/5-6/5，加乙醇10体积份溶解，超声处理30 分钟，过滤，滤液蒸干，加乙醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷加乙醇制成 每1体积份含0. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年 版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以乙酸乙 酯-丁酮-甲酸-水=10 1 1 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下 检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本发明药物组合物制剂日服用量的5/7-10/7，加乙醚10体积份，振摇提取30分 钟，滤过，滤液蒸干，参照加乙酸乙酯1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮iia对 照品，加乙酸乙酯制成每1体积份含0. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法 (《中国药典》2005年版一部附录vib)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶g薄 层板上，以甲苯-乙酸乙酯=19 1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水=32 68 为流动相；柱温30°c ；流速1. oml/分钟；蒸发光散射检测器高纯氮气流速2. 5l/分钟；漂 移管温度105°c ；理论板数按黄芪甲苷峰面积计算不低于2000 ；对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1体积份含0. 0003重量 份的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物组合物制剂日服用量的7/10-14/10，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇60体积份，冷浸过夜，加热回流提取至回流液无色，提取液回收溶剂 并浓缩至干，残渣加水10体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次40体积份， 合并正丁醇液，用氨试液洗2次，每次40体积份，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶 解并转移至10体积份量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得；测定法分别吸取对照品溶液15μ 1、30μ 1，供试品溶液20 μ 1，注入液相色谱仪，测 定，以外标两点对数方程计算，即得；本发明药物组合物日用制剂量含黄芪按黄芪甲苷(c41h68o14)计不得低于1. 26-2. 52mg。
10.如权利要求1-4任一所述的药物组合物在制备具有治疗多囊卵巢综合症作用的药 物中的应用。
11.如权利要求1-4任一所述的药物组合物在制备具有降低ogtt血糖作用的药物中的应用。
12.如权利要求1-4任一所述的药物组合物在制备具有降低胰岛素含量作用的药物中 的应用。
13.如权利要求1-4任一所述的药物组合物在制备具有降低血清睾酮含量作用的药物 中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种具有治疗多囊卵巢综合症作用的药物组合物及其制备方法和质量检测方法。本发明药物组合物制剂以黄芪、淫羊藿、苍术、茯苓和丹参为原料药，经过特殊制备方法制成各种剂型。药效学实验表明，本发明药物组合物可以降低血糖和胰岛素，降低血清睾酮的含量，在治疗多囊卵巢综合症方面具有重要意义。本发明经过处方筛选实验表明，在对多囊卵巢综合症治疗中最佳配伍比例为黄芪50g、苍术30g、茯苓30g、淫羊藿30g、丹参10g。
文档编号a61k9/16gk102145041sq201010109559
公开日2011年8月10日 申请日期2010年2月9日 优先权日2010年2月9日
发明者侯凤祥 申请人:侯凤祥