一种基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中医中药技术领域，具体涉及一种基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐 药性 的中药组合。
【背景技术】
[0002] 卵巢癌是妇科肿瘤中死亡率最高的恶性肿瘤，其中90%为上皮性卵巢癌。由于卵 巢癌发病隐匿，约70%患者确诊时已为晚期（figo分期jii期和iv期）。外科手术之后进行 紫杉醇/铂类为基础的化疗是目前晚期卵巢癌的标准治疗方案。在化疗初期，紫杉醇/铂 类联合化疗方案对卵巢癌非常有效，但80%的患者最终都会复发，并对紫杉醇/铂类耐药， 致使晚期卵巢癌患者的5年生存率仅为18%?30%。肿瘤细胞一旦对某种化疗药物产生耐 药，也会对其他作用机制和化学结构不同的药物产生耐药，这就是多药耐药性(multidrug resistance，mdr)。肿瘤细胞在耐药的同时，其内部的基因也会发生变化，例如肿瘤细胞 在耐药前无p糖蛋白（p-glycoprotein，p-gp)表达，但其发生耐药后，p-gp往往表达增高。 p-gp是一种"泵药"蛋白，肿瘤细胞中p-gp表达增高后，泵出抗肿瘤药物的能力增强。以卵 巢癌为例，紫杉醇/铂类抗肿瘤药物可以杀死正常卵巢肿瘤细胞，其原因是正常肿瘤细胞 无p-gp表达，抗肿瘤药物可以进入肿瘤细胞内，达到能够杀灭肿瘤细胞的浓度。但是卵巢 癌肿瘤细胞p-gp表达增高后，被p-gp泵出肿瘤细胞的抗肿瘤药物增多，肿瘤细胞内的抗肿 瘤药物浓度下降，达不到能够杀死肿瘤细胞的浓度，这就导致了化疗失败。另有研宄发现， 肿瘤细胞p-gp表达增高后，其浸润能力和转移能力增强，且肿瘤组织的病理类型也会发生 改变。
[0003]目前国内外逆转mdr的研宄主要是化学合成的药物和中药单体。一些化学合成 的mdr逆转剂已经进行了i/ii期临床试验，但这些mdr逆转剂均由于毒性过大或者在临 床试验中的逆转耐药作用并不明显而终止了研宄，如环孢菌素a及其同类化合物伐司朴达 (valspodar)等，其原因可能是这些mdr逆转剂只是单靶点作用于肿瘤耐药细胞，导致其临 床疗效并不明显。一些研宄人员转而从包括中药在内的天然产物中提取分离mdr逆转剂， 天然来源的mdr逆转剂通常具有毒性较低，人体耐受性良好的特点，但这些研宄大多还停 留在实验室阶段，目前并无太大的进展。因此，目前尚无可用于临床的mdr逆转剂。
[0004]桂枝茯苓丸是张仲景《金匮要略》所载经方，原方用于癥病，由桂枝、茯苓、牡丹皮、 赤芍、桃仁等量组成，已有上千年的应用历史，具有安全性高、毒性低的特点。现代药理研宄 表明，桂枝茯苓丸水煎液具有微弱的抑瘤作用，不能作为抗肿瘤药物在临床上使用。目前已 经发现茯苓和赤芍中含有逆转mdr作用的成分，但尚未有文献报道桂枝茯苓丸作为一个完 整的经方是否能发挥逆转肿瘤mdr的作用。
【发明内容】
[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性 的中药组合，该中药组合符合中医方剂配伍的整体观念，能更好地从多靶点、多途径、多环 节逆转肿瘤mdr，具有安全性高、疗效持久、治疗成本低的特点，从而达到提高化疗效果、改 善病人预后，并产生经济和社会效益。
[0006] 为实现上述目的，本发明技术方案是：一种基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药 性的中药组合，由下述重量配比原料制成：桂枝9-12份、茯苓10-15份、牡丹皮9-12份、赤 芍10-15份、桃仁9-12份。
[0007] 进一步的，所述基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，由下述重量 配比原料制成：桂枝9份、茯苓15份、牡丹皮9份、赤芍15份、桃仁9份。
[0008] 本发明利用桂枝茯苓丸所具有的多种药理活性，通过改变桂枝茯苓丸原方的组成 比例，成为一种基于桂枝茯苓丸的中药组合，制备该中药组合的浓缩液，以及根据该浓缩液 制备含药血清，通过实验证明该浓缩液及含药血清都可以有效地逆转高度耐药的卵巢癌细 胞的耐药性，具有安全性高、毒性低、疗效持久、治疗成本低的特点，可以有效地逆转高度耐 药的卵巢癌细胞的耐药性。
【具体实施方式】
[0009] 本发明基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，由下述重量份配比原 料制成：桂枝9-12份、茯苓10-15份、牡丹皮9-12份、赤芍10-15份、桃仁9-12份。
[0010] 实施例1 本发明基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，其各组分原料的述重量份 配比可以是：桂枝9份、茯苓10份、牡丹皮9份、赤芍10份、桃仁9份。
[0011] 实施例2 本发明基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，其各组分原料的述重量份 配比也可以是：桂枝10份、茯苓13份、牡丹皮10份、赤芍13份、桃仁10份。
[0012] 实施例3 本发明基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，其各组分原料的述重量份 配比也可以是：桂枝12份、茯苓15份、牡丹皮12份、赤芍15份、桃仁12份。
[0013] 实施例4 本发明基于桂枝茯苓丸逆转卵巢癌多药耐药性的中药组合，其各组分原料的述重量份 配比还可以是：桂枝9份、茯苓15份、牡丹皮9份、赤芍15份、桃仁9份。
[0014] 实验例1 : 实验方法： 按所述配比取桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁，牡丹皮用水蒸汽蒸馏，收集蒸馏液，分 取挥发性成分备用；牡丹皮药渣与桂枝、赤芍、桃仁及茯苓用90%乙醇提取二次，合并提取 液，回收乙醇至无醇味，减压浓缩至适量；桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁及牡丹皮药渣再加 水煎煮二次，滤过，合并滤液，减压浓缩至适量，与上述浓缩液及所述挥发性成分合并混合， 达到1ml药液中含生药1. 5g的标准（以下简称浓缩液)。
[0015] 细胞株skov3是人卵巢癌敏感细胞株，skov3/ddp是用顺铂（ddp)诱导的耐药细胞 株。按照上述方法制备的浓缩液，给wistar大鼠灌胃给药后制备桂枝茯苓丸含药血清（以 下简称含药血清)，采用cck-8(cellcountingkit-8)试剂盒检测含药血清联合顺钼/紫杉 醇分别在人卵巢癌敏感细胞株sk0v3及其耐顺铂细胞sk0v3/ddp中的半数抑制浓度（ic5q)， 计算耐药倍数和耐药逆转倍数。采用流式细胞术测定经耐